李晓旭
- 作品数:2 被引量:1H指数:1
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- CD20抗体亲和力和免疫原性的改造及表达
- 2017年
- [目的]构建较高亲和力较低免疫原性的CD20抗体。[方法]通过专利分析,进行高亲和力和人源化的设计改造,将抗体的轻链和重链分别克隆到pc DNA3.1/ZEO(+)、pc DNA3.1(+)真核表达载体中,共转染中国仓鼠卵巢细胞CHO-K1,通过RT-PCR检测mRNA的转录,夹心ELISA检测抗体表达量,流式细胞术检测细胞上清与CD20阳性细胞Raji的结合活性。[结果]得到了高亲和力的人源化CD20抗体的轻链和重链基因片段,并成功地构建了重组表达载体pc DNA3.1/ZEO(+)-CD20L和pc DNA3.1(+)-CD20H,并可在CHO-K1细胞中表达,通过RT-PCR证明基因在CHO细胞中成功表达,ELISA法测得培养上清的含量在0.45~4.72μg/m L之间,流式检测表明上清中的抗体可与Raji细胞结合。[结论]成功构建并表达筛选了17株单克隆抗体,15号的表达量最大,为4.72μg/m L,为下一步研究抗体的亲合力、免疫原性以及生物学功能打下基础。
- 张倩倩纪前前李晓旭贾殿隆李军郭尚敬
- 关键词:抗体免疫原性非霍奇金淋巴瘤
- 2D/3D HepaRG细胞模型的建立及在体外肝毒性研究中的应用
- 方法:本研究首先以HepG2和HepaRG两种细胞作为研究对象,主要从酶学指标、蛋白表达及尿素分泌水平进行综合评估,从而优选出更合适的细胞构建2D及3D聚球体模型。通过RT-PCR检测手段研究2D及3D模型在基因层面的表...
- 李晓旭
- 关键词:HEPG2细胞肝毒性胆汁淤积