方志红
- 作品数：28 被引量：214H指数：8
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- 白羊草肌动蛋白基因片段的克隆及序列分析被引量：1
- 2014年
- 根据几种禾本科植物肌动蛋白基因的保守序列设计一对简并引物,以白羊草(Bothriochloa ischaemum)幼叶总RNA为模板,采用RT-PCR方法克隆获得一个肌动蛋白基因cDNA片段,命名为BiACT,该基因片段长度为720bp,编码240个氨基酸残基。氨基酸比对分析结果表明,BiACT基因编码的氨基酸与其他植物肌动蛋白的氨基酸序列具有较高的同源性。
- 李春艳方志红董宽虎
- 关键词：白羊草肌动蛋白基因克隆
- 一种紫花苜蓿单荚结实率相关基因MsDAM及其应用
- 本发明公开了一种紫花苜蓿单荚结实率相关基因MsDAM，其核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:2所示，所述的紫花苜蓿单荚结实率相关基因MsDAM，其编码的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO:3所示，所述的紫花苜蓿单...
- 王学敏方志红武语笛温红雨王赞高洪文
- 紫花苜蓿MsWRKY33转录因子的分离及遗传转化研究被引量：10
- 2015年
- WRKY转录因子是植物特有的转录因子,广泛参与植物对多种逆境胁迫的反应。但是对紫花苜蓿中WRKY转录因子的研究还较少。本研究从紫花苜蓿中克隆了一个WRKY I类转录因子MsWRKY33。该基因CDS全长1536bp,编码512个氨基酸,结构分析显示MsWRKY33包括两个WRKY结构域和一个C2H2锌指结构(C-X4-CX23-H-X-H),表明其属于WRKY I族WRKY转录因子。亚细胞定位预测MsWRKY33蛋白定位在细胞核。MsWRKY33基因受盐、干旱和冷胁迫诱导,暗示基因可能参与了这些逆境胁迫的调控。构建原核表达载体pETMsWRKY33,SDS-PAGE分析表明在大肠杆菌中表达了MsWRKY33蛋白。扩增MsWRKY33编码区cDNA,以pBI121为基础载体,构建植物超表达载体pBI121-MsWRKY33。采用农杆菌介导的愈伤组织培养法转化紫花苜蓿。利用nptⅡ基因引物和载体特异引物检测抗性苗呈阳性,表明目的基因已成功导入紫花苜蓿基因组中。qRT-PCR检测发现,MsWRKY33基因在转基因株系中得到增强表达。本研究为进一步探索WRKY转录因子基因在紫花苜蓿抗逆性调控中的作用奠定了基础。
- 冯光燕王学敏付媛媛方志红高洪文张新全
- 关键词：紫花苜蓿转录因子
- 白羊草转录组和差异性表达分析
- 2018年
- 为了获得白羊草(Bothriochloa ischaemum)转录组数据库和差异表达基因,通过Illumina HiSeq4000高通量测序技术对白羊草对照组和干旱胁迫组进行转录组测序。经组装分析共获得118580条Unigenes;将所得到的Unigenes与基因库数据进行比较,对Unigenes进行功能注释,共50070条Unigenes获得功能注释。白羊草转录组中的Unigenes根据GO功能大致可分为细胞组分、分子功能和生物学过程三大类共54个分支。通过将所有Unigenes与KOG数据库比对,共有1586条Unigenes可归为25类。以KEGG数据库作为参考,依据代谢途径可将Unigene定位到116个代谢途径分支。通过差异性分析发现,差异性表达基因共3987条,其中上调基因占39.45%,下调基因占60.55%。本研究为白羊草分子生物学研究提供了宝贵的基因组数据库资源。
- 方志红石永红吴欣明任彬琳张燕贾会丽郭璞池惠武李莲芬王运琦董宽虎刘建宁
- 关键词：白羊草转录组代谢通路
- NaCl和Na_2SO_4胁迫对白羊草种子萌发的影响被引量：8
- 2011年
- 用不同浓度的NaCl和Na2SO(40,12.5,25,50,75,100,150,200,300 mmol/L)对白羊草种子进行胁迫,测定其对白羊草种子发芽率、发芽势、发芽指数、萌发活力指数、耐盐指数和综合相对盐害率等指标的影响。结果表明,在NaCl胁迫下,白羊草种子的萌发随着盐浓度的增高表现为低盐(12.5或25 mmol/L)促进、高盐(>25 mmol/L)抑制;在Na2SO4胁迫下,随着盐浓度的增加,对种子萌发的抑制作用明显增强。
- 武路广方志红董宽虎
- 关键词：白羊草种子萌发NACLNA2SO4
- Na_2SO_4胁迫对碱蒿叶绿素、甜菜红素和O_2^-产生速率的影响被引量：3
- 2010年
- 以碱蒿(Artemisia anethifolia)为材料,研究不同浓度Na2SO4胁迫下碱蒿幼苗的叶绿素含量、甜菜红素含量和O2-产生速率与耐盐性之间的关系。结果表明:随着Na2SO4处理浓度的增加,碱蒿幼苗叶绿素含量降低;O2-产生速率呈先升高后降低的趋势;甜菜红素含量的变化不明显。叶绿素和O2-产生速率可作为碱蒿的耐盐性鉴定指标。
- 方志红董宽虎
- 关键词：碱蒿NA2SO4胁迫叶绿素甜菜红素
- 柠条锦鸡儿CkCDPK基因的克隆、表达分析及载体构建被引量：2
- 2019年
- 钙依赖蛋白激酶作为一个关键的信号传导器,通过调控和参与植物体内的代谢途径等方式在植物抵御逆境胁迫过程中发挥着重要作用。为了探索柠条锦鸡儿相关基因的功能,本研究利用同源克隆的方法,从柠条锦鸡儿中克隆了1个CDPK类基因的CDS,命名为CkCDPK。通过测序和生物信息学分析,结果显示,该基因包含1710bp的开放阅读框,编码570个氨基酸,分子质量为64.03ku,蛋白质等电点(PI)为9.12。结构分析显示,CkCDPK含有N端可变区、蛋白激酶区、4个EF手型结构和类似钙调素等结构域。利用实时荧光定量PCR检测了CkCDPK基因在不同逆境胁迫下的表达量,结果显示,NaCl胁迫和干旱胁迫下该基因的表达量呈现出单峰趋势,其中,盐胁迫6h、干旱胁迫4h表达量最高,外源ABA诱导下该基因的表达量基本呈逐渐上升趋势。表明该基因可能参与了柠条锦鸡儿的抗逆性调控。构建植物超表达载体pCAMBIA3301-CkCDPK,可为进一步研究CkCDPK基因在柠条锦鸡儿抗逆性调控中的作用奠定基础。
- 贾会丽郭继承吴欣明吴欣明王运琦刘建宁方志红石永红
- 关键词：柠条锦鸡儿逆境胁迫
- 白羊草NAC转录因子基因的克隆及表达分析被引量：12
- 2013年
- NAC转录因子是植物特有的转录因子并在植物的生长发育过程中发挥重要的作用,根据其他植物NAC转录因子基因的氨基酸保守序列设计简并引物,通过RT-PCR和RACE技术从白羊草(Bothriochloa ischaemum)中获得了全长cDNA,命名为BiNAC。序列分析表明,该cDNA片段全长为1549bp,开放阅读框1125bp,编码374个氨基酸,具有典型的NAC类蛋白的结构特征。进化树分析表明,该蛋白属于ATAF亚族,与高粱(Sorghum bi-color)亲缘关系最近,同源性达到94%。Real-time PCR检测结果表明,BiNAC基因在茎中的表达量最高,根中表达量最少,并且受NaCl胁迫表达上调。同时成功构建了植物表达载体pBI121-BiNAC-GUS,为进一步开展NAC基因的功能研究创造了条件。
- 方志红王学敏李俊董洁高洪文董宽虎
- 关键词：白羊草NAC转录因子基因序列
- 一种牧草取样装置
- 本实用新型公开了一种牧草取样装置，具体涉及牧草取样技术领域，括固定环，所述固定环的一侧固定安装有外装桶，所述外装桶远离固定环的一侧转动连接有贯穿并延伸至外装桶外的取样管，所述取样管位于外装桶外的一侧固定安装有钻头，所述取...
- 张燕池惠武郭璞方志红李莲芬王运琦
- 转MsLEA4-4基因拟南芥株系的耐盐性分析被引量：7
- 2020年
- 为了深入研究紫花苜蓿(Medicago sativa)MsLEA4-4基因的抗逆性,本试验对前期获得的转MsLEA4-4基因的拟南芥(Arabidopsis thaliana)株系进行不同浓度盐胁迫处理,以验证MsLEA4-4基因在拟南芥植株体内的耐盐性。试验结果表明:盐胁迫后转基因株系的发芽率达到55%,比对照植株(Control plant,CK)高81%;转基因株系的鲜重、叶绿素含量均高于CK(P<0.05);盐胁迫后转基因株系的存活率比CK提高75.0%~81.3%;盐胁迫明显抑制根系生长,但转基因植株的侧根数量比CK多4~5根(P<0.05);盐胁迫后转基因株系体内的可溶性糖含量(P<0.05)和超氧化物歧化酶(P<0.01),过氧化氢酶(P<0.01),过氧化物酶(P<0.05)活性均高于CK,脯氨酸(P<0.01)和丙二醛(P<0.05)含量均低于CK。综上可得,MsLEA4-4基因参与了拟南芥体内的耐盐性调控,提高了转基因拟南芥对盐胁迫的耐受性。本研究为进一步探索MsLEA4-4在转基因紫花苜蓿盐胁迫中的功能及培育耐盐性紫花苜蓿品种提供依据。
- 贾会丽贾会丽王学敏石永红石永红王运琦吴欣明刘建宁方志红
- 关键词：紫花苜蓿盐胁迫拟南芥
