李文婷
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 供职机构：吉林农业大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金：吉林省世行贷款农产品质量安全项目国家自然科学基金吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 家蝇幼虫抗菌蛋白基因AS566在毕赤酵母中的表达及产物抑菌活性检测
- 2016年
- 为采用巴斯德毕赤酵母系统表达家蝇幼虫抗菌蛋白AS566基因,并对其抑菌活性进行初步确证。以分子克隆法构建重组表达质粒pGAPZαA-AS566,将其线性化后电击转化至毕赤酵母GS115感受态细胞,在GAP启动子调控下,于30℃诱导表达,SDS-PAGE检测结果显示表达产物的分子质量约为43.5 ku,与预期结果一致。采用管碟法对表达产物的抑菌活性进行检测,结果显示该表达产物对鸡源沙门菌和猪源金黄色葡萄球菌的生长具有抑制作用。本研究为进一步研究家蝇幼虫抗菌蛋白的抑菌机制奠定了基础。
- 闫恕李文婷丁士雯袁野唐艳孔令聪裴志花刘树明马红霞
- 关键词：毕赤酵母真核表达抑菌活性
- 家蝇幼虫溶菌酶1基因的克隆与真核表达及表达产物抑菌活性的检测被引量：2
- 2015年
- 采用PCR扩增获得家蝇溶菌酶1基因(Musca domesticalysozyme-1,MdL-Ⅰ),构建真核重组表达质粒pPIC9K-MdL-Ⅰ。将线性化的重组质粒电击转入巴斯德毕赤酵母感受态GS115细胞内。将PCR鉴定为阳性的重组酵母菌进行甲醇诱导表达,并采用Tricine-Tris-SDS-PGAE检测表达产物的大小;经镍柱亲和层析纯化获得纯度较高的重组蛋白,采用管碟法检测重组蛋白的生物学活性。结果显示,重组质粒pPIC9K-MdL-Ⅰ获得高效表达,蛋白质的分子质量为14.2ku,管碟法检测重组蛋白对大肠杆菌、雏沙门菌均具有体外抑菌活性。本研究为利用毕赤酵母表达系统规模化生产具有抑菌活性的MdL-Ⅰ蛋白奠定了基础。
- 李文婷傅小蒙唐艳孔令聪裴志花刘树明马红霞
- 关键词：巴斯德毕赤酵母分泌表达抑菌活性
- 家蝇MDAP-2、Md-UF4及Md-UF21基因的真核表达及产物抑菌活性研究
- 抗菌肽是动物先天免疫系统抵御微生物入侵时产生的阳离子肽类活性物质,能够有效防止病菌的侵入,具有广谱抗菌活性,相对传统抗生素而言,它不容易引起细菌耐药性问题。因此,近年来,抗菌肽的研究受到了国内外相关学者的高度重视。家蝇(...
- 李文婷
- 关键词：毕赤酵母分泌表达
- 文献传递
- 一种新型家蝇幼虫抗菌肽基因(MDAP-2)的真核表达及抑菌活性检测被引量：1
- 2015年
- 利用毕赤酵母表达系统表达新型家蝇抗菌肽MDAP-2基因(Musca domestica antimicrobial peptide,MDAP-2),为其作为新型抗菌物质应用于临床提供实验依据。根据已有的MDAP-2的氨基酸序列,采用PCR技术扩增获得MDAP-2基因,构建真核重组表达质粒pPIC9K-MDAP-2,将线性化的重组质粒电击转入毕赤酵母(P.pastoris)感受态GS115细胞内,将PCR鉴定为阳性的重组酵母菌进行甲醇诱导表达,并采用Tricine-SDS-PGAE检测表达产物的大小,经镍柱亲和层析纯化获得纯度较高的重组蛋白,采用管碟法检测重组蛋白的生物学活性。结果显示,重组质粒pPIC9K-MDAP-2获得高效表达,蛋白分子量为7.8 kD,管碟法检测重组蛋白对大肠杆菌与沙门氏菌均具有体外抑菌活性。MDAP-2基因的成功表达为进一步研究表达产物的生物学及免疫学活性奠定基础。
- 李文婷闫恕张丹丹贾博岩唐艳孔令聪裴志花刘树明马红霞
- 关键词：分泌表达
