康霞
- 作品数：3 被引量：10H指数：1
- 供职机构：南方医科大学南方医院更多>>
- 发文基金：广东省教育部产学研结合项目广州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人自身抗原52-kDRo/SSA,rRNP,Jo-1,SmD1,Scl-70,SSB-La的原核表达及纯化鉴定
- 2016年
- 目的制备重组人自身抗原52-kDRo/SSA,rRNP,Jo-1,SmD1,Scl-70以及SSB-La,为建立自制抗核抗体荧光免疫层析快速检测试剂盒奠定基础。方法在NCBI上查询人52-kDRo/SSA,rRNP,Jo-1,SmD1,Scl-70,SSB-La的碱基序列和氨基酸序列,运用软件预测抗原表位,选择抗原表位并对密码子进行偏嗜性改造,采用人工合成方法合成抗原表位序列并插入至原核表达载体pET30a中。将重组质粒导入大肠杆菌BL21经IPTG诱导表达,表达的重组蛋白用镍离子亲和层析柱纯化,用荧光免疫法测定重组蛋白活性。结果重组人自身抗原SSB-La是可溶性表达,52-kDRo/SSA,rRNP,Jo-1,SmD1以及Scl-70是包涵体形式表达;纯化产物经荧光免疫法测定活性,结果显示:SSB-La,Scl-70以及Jo-1具有较高的抗原活性,52-kDRo/SSA,rRNP以及SmD1抗原活性较弱。结论成功制备了重组人自身抗原52-KDRoSSA,rRNP,Jo-1,SmD1,Scl-70以及SSB-La,为下一步研究开发自制抗核抗体荧光免疫层析快速检测试剂盒奠定了基础。
- 李欣吴淡娟李海侠褚帅康霞裘宇容
- 关键词：荧光免疫法
- ECLIA、CMIA、ELISA3种方法测定血清抗CCP抗体在RA诊断中的应用被引量：9
- 2014年
- 目的评价电化学发光法(ECLIA)、化学发光法(CMIA)及酶联免疫吸附测定法(ELISA)3种方法测定血清抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体的差异及在类风湿关节炎(RA)诊断中的作用。方法采用ECLIA、CMIA及ELISA测定45例临床确诊的RA患者、34例非RA患者及24例其他患者(包括HBsAg阳性9例、anti-HCV阳性8例、EB-IgA阳性7例)血清中抗CCP抗体水平。结果 3种方法测定所有标本抗CCP抗体阳性率差异无统计学意义(P>0.05),但ELISA与ECLIA及CMIA间的一致性均较差(Kappa<0.75),ECLIA与CMIA间一致性良好(Kappa>0.75),ECLIA灵敏度优于CMIA及ELISA,CMIA特异性优于ECLIA及ELISA。HBsAg、anti-HCV、EB-IgA阳性均可造成ELISA结果假阳性,累计阳性率达33.33%。结论在临床标本抗CCP抗体检测中,ECLIA灵敏度最高,CMIA特异性最好,ECLIA、CMIA优于ELISA,具有重要临床应用价值。
- 康霞李欣杨春莉冯平锋潘洁袁帅裘宇容
- 关键词：电化学发光法化学发光法抗环瓜氨酸肽抗体
- GSK-3β对小鼠骨髓树突状细胞成熟和功能的调控作用被引量：1
- 2015年
- 目的探讨GSK-3β对小鼠骨髓树突状细胞(BMDC)成熟和功能的调控作用。方法脂多糖催熟BMDC,Western blotting检测刺激前后糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)的磷酸化水平的改变;利用GSK-3β的选择性抑制剂SB216763处理BMDC,检测表型、细胞因子表达和混合淋巴反应(MLR)的变化情况;构建过表达小鼠GSK-3β的慢病毒载体并转染DC2.4细胞,Western blotting检测过表达GSK-3β对调控树突状细胞(DC)成熟的关键调控因子鸟的网状内皮组织增生病毒癌基因相关B(Rel B)蛋白水平的影响。结果经脂多糖处理后,GSK-3βY216磷酸化水平下调,Ser9磷酸化水平显著上调,表明GSK-3β的活性显著下降。抑制GSK-3β的活性能上调DC表面共刺激分子CD40和CD86的表达,削弱脂多糖诱导的促炎细胞因子IL-6和IL-12表达上调,而对抗炎细胞因子IL-10的表达有促进作用,同时降低脂多糖诱导成熟的DC刺激同种异基因T细胞增殖的能力。在未成熟的DC2.4细胞中,过表达GSK-3β能够下调Rel B的水平。结论 GSK-3β参与调控DC的成熟和功能,高活性的GSK-3β抑制未成熟树突状细胞(i DC)的自发性成熟,GSK-3β失活后促进DC表型的成熟,而在脂多糖诱导DC分化的过程中GSK-3β发挥促炎作用。GSK-3β能够下调Rel B的蛋白水平,有望成为构建新型耐受性DC的新靶点。
- 褚帅李海侠李欣康霞黄清水王红霞裘宇容
- 关键词：糖原合成酶激酶-3Β
