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姜博文
作品数:
1
被引量:2
H指数:1
供职机构:
山西大学生物技术研究所
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发文基金:
国家教育部博士点基金
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
刘静
山西大学生物技术研究所
王刚
山西大学生物技术研究所
聂欣
山西医科大学第二医院
申泉
山西大学生物技术研究所
柴宝峰
山西大学生物技术研究所
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2013
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重组人凝血因子Ⅸ小基因及其无义突变体稳定细胞株的构建及意义
被引量:2
2013年
本研究构建重组人凝血因子Ⅸ小基因及其无义突变体稳定细胞株并探讨其意义。将人凝血因子Ⅸ(F9)小基因克隆到哺乳动物表达载体pCMV-Tag3B上;利用PCR定点突变技术得到在小基因121位氨基酸位置含有一个提前终止密码子(premature termination codon,PTC)的无义突变体;将构建的F9小基因及其无义突变体分别转染人肝癌细胞HepG2,经G418抗性筛选,单克隆化扩大培养,得到稳定细胞株,分别命名为HepG2-WT和HepG2-N。结果显示:通过酶切鉴定、PCR鉴定及DNA测序分析证明,小基因及其无义突变体表达载体构建成功;通过RT-PCR及基因组PCR均扩增到了大小正确的目的基因片段,证明了含有重组人凝血因子Ⅸ小基因及其无义突变体的稳定细胞株构建成功。结论:本研究成功构建了重组人凝血因子Ⅸ小基因及其无义突变体稳定细胞株,该细胞株可用于无义突变导致血友病的治疗药物的筛选和PTC通读药物的筛选等。
王刚
姜博文
杨林花
聂欣
贾辰亮
刘静
申泉
柴宝峰
关键词:
血友病B
无义突变
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