唐东英
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
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- 相关领域：生物学更多>>
- 拟南芥DBB1a(double B-box 1a)蛋白的表达、纯化及Western blotting检测被引量：2
- 2010年
- PCR扩增拟南芥(Arabidopsis thaliana)DBB1a cDNA的保守区段(GenBank登录号:AT2G21320),转化到冷诱导表达载体pCold TF上,构建pCold-DBB1a重组质粒,转化大肠杆菌DH5a。15℃下IPTG诱导表达融合蛋白,并通过SDS-PAGE检测。证实目的蛋白以可溶形式在约20 kD处高效表达,与预期蛋白大小相吻合。表达蛋白经Ni琼脂糖凝胶亲和层析纯化,SDS-PAGE及Western blotting检测证实纯化后获得高纯度融合蛋白,这为进一步研究DBBl a功能奠定了基础。
- 屠小菊汪启明李秀山邓克勤唐东英罗泽宇赵小英刘选明
- 关键词：蛋白纯化WESTERNBLOTTING
- 拟南芥Rad23原核重组蛋白构建和活性检测被引量：1
- 2011年
- 在拟南芥中,Rad23基因通过参与泛素/26S蛋白酶体途径调节植物生长发育和激素应答.为进一步研究该基因编码蛋白的分子作用机制及其生物学功能,构建了pCold-Rad23融合蛋白重组表达载体,将该载体转化到大肠杆菌BL21中诱导表达目的蛋白.SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳检测结果表明,分子质量为94ku左右的融合重组蛋白在大肠杆菌中获得高效表达.采用纯化的重组蛋白多次免疫昆明小白鼠的方法,获得了特异性强并且效价高的多克隆抗体,经蛋白印迹检测,在分子质量40ku左右处出现特异的蛋白质条带,证明所制备的抗血清可以与拟南芥Rad23蛋白特异性结合.
- 李秀山刘斌赵李剑唐东英赵小英刘选明
- 关键词：蛋白原核表达抗体
