郭永明
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：川北医学院基础医学院病原生物学与免疫学实验教学中心更多>>
- 发文基金：四川省自然科学基金更多>>
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- 致病性大肠杆菌绿色荧光蛋白标记被引量：2
- 2015年
- 目的:用增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)标记致病性大肠杆菌(enteropathogenic escherichia coli,EPEC),以方便研究细菌的黏附。方法:以真核表达载体p EGFP-C1为模板设计引物,采用PCR方法扩增EGFP基因并测序后,克隆入原核表达质粒载体p Trc99a,转染EPEC,用荧光显微镜观察IPTG诱导后EPEC对Hep-2细胞的黏附及荧光表达情况。结果:成功构建原核表达质粒p Trc99a-EGFP和菌株EPEC/EGFP,黏附到Hep-2细胞表面的细菌克隆能够表达绿色荧光蛋白。结论:对EPEC进行了EGFP标记,为计数细菌的黏附提供方便。
- 郭永明陈晓丽余晶杨晓红杨健
- 关键词：致病性大肠杆菌绿色荧光蛋白
- 致病性大肠埃希菌EspA抗血清制备及其对细菌粘附的影响
- 2016年
- 目的制备致病性大肠埃希菌(EPEC)分泌蛋白A(EspA)抗血清,并检测其对EPEC粘附的中和作用。方法以EPEC标准株E2348/69为模板,采用PCR方法获得EspA基因,将目的基因连接载体pET32a,构建重组表达质粒pET32a-EspA,转入表达菌株BL21后用IPTG诱导表达并采用Ni-柱亲和层析法纯化EspA;以纯化EspA辅以佐剂免疫家兔,多次免疫获得抗血清,采用中和试验检测抗血清中和EPEC粘附Hep-2细胞的能力。结果成功构建EspA原核表达质粒,表达蛋白分子质量单位为37ku,与预期值相符。用纯化的表达蛋白EspA免疫家兔,对流免疫电泳检测抗血清的效价为1∶2,但稀释度≤1∶16时仍能效抑制EPEC粘附Hep-2细胞。结论 EspA抗血清具有抑制EPEC粘附Hep-2细胞作用,有望为疫苗研发的候选抗原。
- 郭永明黄荣王朝莉杨晓红杨健
- 关键词：致病性大肠埃希菌抗血清粘附
- EPEC粘附相关分子抗血清制备及其中和能力探讨
- 目的:构建EPEC粘附相关分子Bfp A、Esp A和Intimin C300(羧基端300个氨基酸)原核表达载体,纯化相应蛋白并制备其抗血清,并探讨抗血清对EPEC粘附Hep-2细胞的影响。方法1.以EPEC标准株E2...
- 郭永明
- 关键词：EPECINTIMIN粘附
- 文献传递
