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细菌非编码小RNA研究进展被引量：2: 2014年; 细菌非编码小RNA（Small non-coding RNAs,sRNAs）是一类长度在40～500个核苷酸,通常位于细菌染色体基因间区转录但不编码蛋白的一类RNA分子.1967年,从大肠杆菌中分离出第一个sRNA-6SRNA,然而经历了30多年的时间才阐明其生物学功能.sRNAs广泛存在于生物界中,目前原核生物中以大肠杆菌和沙门菌中发现的sRNA数量最多,在霍乱弧菌、沙眼衣原体、产单核细胞李氏杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌以及产气荚膜梭菌中也均有发现.; 王勇祥孟霞孟宪臣聂佳佳朱国强; 关键词：小RNA 非编码金黄色葡萄球菌铜绿假单胞菌产气荚膜梭菌生物学功能

K88ac^+和K88ad^+产肠毒素大肠杆菌hlyA基因缺失株的构建及相关功能初步分析被引量：9: 2014年; 为研究产肠毒素大肠杆菌(ETEC)溶血素hlyA基因的相关生物学特性,本研究通过Red同源重组的方法构建了ETEC标准株K88ac+C83902和K88ad+C83903的hlyA基因缺失株。体外生长试验和酵解试验表明:缺失株C83902△hlyA和C83903△hlyA生长速度及生长周期各个阶段的特性与相应野生株相比无差异,其分解发酵糖类和氨基酸的能力也未发生改变。小鼠感染试验显示经野生株和回补株感染的小鼠致死率高,而缺失株不致死,表明hlyA基因可以增强ETEC对ICR小鼠的致病力。从感染小鼠的十二指肠、空肠、回肠分离感染的靶细菌,平板计数和PCR检测表明,ETEC在小鼠回肠的黏附能力强于在十二指肠和空肠,并且基因缺失株黏附能力比野生株显著降低。本研究首次对ETEC溶血素hlyA基因进行研究,为进一步阐释α-溶血素与机体相互作用的分子机制和ETEC的致病机制,以及预防ETEC感染提供了相关的实验依据。; 姜露聂佳佳杨样羊扬周明旭朱国强; 关键词：ETEC

细菌非编码小RNA的分类及功能简介被引量：6: 2013年; 细菌非编码小RNA（non-coding small RNA,简称sRNA）是一类长度为40~500个核苷酸,在基因组中被转录但不编码蛋白质的一类RNA分子。它们大多数在Hfq的协助下,通过碱基配对识别靶标mRNA,在转录后水平调节基因的表达,是细菌代谢、群体感应和适应环境变化及毒力基因表达的重要调节因子。本文对sRNA的分类及功能作如下综述。; 聂佳佳金鑫孟宪臣朱国强; 关键词：HFQ

肠炎沙门氏菌hfq缺失株的构建和对fliC基因的调控分析被引量：2: 2013年; Hfq是一种介导细菌非编码小RNA(sRNA)与其靶标mRNA结合的伴侣蛋白,可协助多种sRNA在转录后水平调控基因表达。本研究通过λ噬菌体的Red同源重组系统构建了肠炎沙门氏菌hfq缺失突变株SE50336△hfq。利用荧光定量PCR技术分析了hfq突变株中鞭毛主要结构蛋白fliC的表达情况。结果表明与野生株相比,hfq突变株fliC的表达量明显下降,只有野生株的3.7%。细菌运动性试验表明突变株在半固体培养基上的运动能力减弱。以上结果表明Hfq蛋白可调节鞭毛结构蛋白FliC的表达,造成FliC蛋白表达量明显下降,鞭毛的合成受到抑制,从而导致肠炎沙门氏菌的运动能力减弱。; 孟霞孟宪臣朱春红王亨王金秋聂佳佳朱国强; 关键词：肠炎沙门氏菌 HFQ FLIC 运动性

肠炎沙门氏菌sRNA伴侣蛋白Hfq表达与纯化被引量：8: 2013年; 利用pET原核表达系统和亲和层析表达纯化肠炎沙门氏菌sRNA伴侣蛋白Hfq。首先构建含靶基因hfq的重组表达质粒pET28a(+)-hfq,经PCR及双酶切鉴定构建正确,再将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导目的基因高效表达。SDS-PAGE及Western blot结果表明:Hfq在大肠杆菌中成功表达,蛋白分子质量约为16.6ku,且主要存在于上清中,以可溶形式表达。进一步对表达产物进行Ni 2+亲和层析纯化,获得纯度较高的融合蛋白,为研究Hfq蛋白与sRNA的相互作用以及sRNA的调控机制提供基础。; 孟宪臣孟霞聂佳佳厚华艳王勇祥朱国强; 关键词：肠炎沙门氏菌 SRNA 纯化

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聂佳佳