朱双
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：武汉大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 锦鲤Δ6脂肪酸去饱和酶基因克隆及表达研究被引量：2
- 2015年
- 旨在揭示变温鱼类合成HUFAs过程中的关键酶及其功能,以锦鲤(Cyprinus carpiokoi)为材料,通过RT-PCR扩增获得了一段长度为854 bp的Δ6脂肪酸去饱和酶基因的c DNA序列片段,并对其进行了序列分析和蛋白产物结构预测。结果显示,该片段与南亚野鲮(Labeo rohita)Δ6脂肪酸去饱和酶基因有93.5%的同源性,编码的蛋白产物具有典型的Δ6脂肪酸去饱和酶结构特点,包含2个组氨酸保守区(HDFGH、HFQHH)和2个跨膜结构域。荧光定量PCR表明,Δ6脂肪酸去饱和酶在锦鲤肝脏中的表达量最高,在肠、脑和心脏中表达量依次降低,而在肌肉和鳃的表达量相对较低。幼鱼在不同培养水温下,各组织中该基因的表达量均随温度的下降而升高,以适应低温环境。
- 张萍薛伟伟蒋雪薇朱双刘江东
- 关键词：锦鲤
- 斑马鱼胚胎细胞和中国仓鼠卵巢细胞远缘杂交融合条件的优化
- 2016年
- 以斑马鱼胚胎细胞(ZEM-2s)和中国仓鼠卵巢细胞(CHO-k1)为实验材料,采用聚乙二醇(PEG)作为促融剂,从PEG的相对分子质量、浓度、作用温度和时间等方面进行单因子实验,以期寻找两种细胞融合的最佳条件。实验结果表明,融合的最适条件是融合温度为37℃,浓度为40%,分子量为2 000的PEG处理斑马鱼胚胎细胞和中国仓鼠卵巢细胞100sec,平均融合率高达25.3%,与未加入PEG的细胞相比,最佳条件下处理的两种细胞融合现象明显(p<0.05),表明该条件下的处理能够显著促进细胞的融合。
- 蒋雪薇王军朱双孙英杰朱晓芹刘江东
- 电穿孔转染悬浮细胞KM933及1301方法的建立及优化
- 2017年
- 采用电穿孔法将p EGFP-N1质粒转染KM933及1301细胞,优化控制电穿孔条件电压(Voltage)或者电容(Capacitance)参数,经过两轮单一变量优化试验,得出KM933细胞系最佳转染电压V(optimal)为185V、电容C(optimal)为700μF,48h转染效率约为35%,存活率约为70%;1301细胞系最佳转染电压V(optimal)为185V、电容C(optimal)为600μF,48h转染效率约为20%,存活率约为65%。该实验方法操作简单,实验成本低,转染效果好,可用于脂质体等常规方法难以转染细胞的外源基因导入,为进一步研究其他基因转移到KM933及1301细胞提供实验方法奠定技术基础。
- 朱双朱晓芹孙英杰冷心怡刘江东
- 关键词：电穿孔
