张燕茹
- 作品数：5 被引量：4H指数：1
- 供职机构：西安交通大学医学部更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 己糖激酶2促进人宫颈癌细胞系的迁移与增殖被引量：1
- 2020年
- 目的研究己糖激酶2(HK2)通过p-ERK1/2促进人子宫颈癌细胞HeLa增殖和迁移的分子机制。方法用Western blot和细胞免疫化学检测HK2在宫颈癌细胞系中的表达;用G418压力筛选获取HK2稳定表达的HeLa-HK2及对照细胞系;用细胞划痕和Transwell小室法检测HeLa-HK2及对照细胞的迁移和侵袭;用细胞计数、MTT法、流式细胞仪检测HeLa-HK2及对照细胞的增殖、细胞活力及细胞周期的分布;用Western blot和细胞免疫化学检测ERK1/2、p-ERK1/2、cyclin A和Slug蛋白的表达;用ERK抑制剂(FR180204)抑制ERK1/2和p-ERK1/2表达后观察HeLa-HK2细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化。结果成功构建HK2稳定表达的HeLa-HK2细胞系;HeLa-HK2细胞迁移、侵袭及增殖能力显著强于对照细胞,HeLa-HK2细胞中p-ERK1/2、cyclin A和Slug蛋白表达高于对照细胞;使用FR180204在HeLa-HK2细胞中抑制ERK1/2和p-ERK1/2表达后,可以抑制HK2对细胞增殖、迁移和侵袭的增强作用。结论HK2通过p-ERK1/2上调cyclin A和Slug蛋白表达促进细胞的增殖、迁移和侵袭。
- 雷丹张燕茹陈茜李露崔南
- 关键词：P-ERK1/2SLUG宫颈癌
- Slug通过下调CDH3/β-catenin/C-myc表达抑制宫颈癌细胞增殖
- 2021年
- 目的探讨Slug通过下调CDH3/β-catenin/C-myc表达抑制宫颈癌细胞增殖的作用机制。方法G418压力筛选获取Slug稳定表达的SiHa细胞系;行转录组测序分析,Real-time PCR、Western blot和细胞免疫化学检测CDH3在Slug过表达SiHa细胞中的表达;Western blot和细胞免疫化学检测CDH3在SiHa和HeLa细胞中的表达;在瞬转CDH3表达载体的HeLa细胞和挽救CDH3表达的SiHa-Slug细胞中通过Western blot检测β-catenin和C-myc蛋白的表达;细胞计数和CCK-8检测CDH3对HeLa和SiHa-Slug细胞增殖的影响;双荧光素酶报告系统和染色质免疫共沉淀实验检测Slug对CDH3启动子区的调节作用。结果成功构建Slug稳定表达的SiHa细胞系;过表达Slug可以下调CDH3在SiHa细胞中的表达;在HeLa和SiHa-Slug细胞中分别上调和挽救CDH3表达可以上调β-catenin和C-myc蛋白的表达并促进细胞增殖;Slug可以识别并结合CDH3启动子区的E-box,从而抑制CDH3在SiHa细胞中的转录。结论Slug通过抑制CDH3在SiHa细胞中的转录,可下调β-catenin和C-myc蛋白的表达,抑制SiHa细胞增殖。
- 刘宪张燕茹张燕茹冯倩王海燕王海燕
- 关键词：SLUGΒ-CATENIN细胞增殖宫颈癌
- Msi1过表达对宫颈癌细胞增殖及干性维持的影响及其机制
- 2021年
- 目的探讨Msi1通过Wnt/β-catenin通路促进宫颈癌细胞增殖及干细胞样特性的作用机制。方法取制备成功的Msi1稳定过表达的SiHa、HeLa细胞株及相应的对照细胞株,其中Msi1稳定过表达的SiHa细胞及其对照细胞分别命名为SiHa-Msi1组、SiHa-EGFP组,Msi1稳定过表达的HeLa细胞及其对照细胞分别命名为HeLa-Msi1组、HeLa-EGFP组。采用裸鼠成瘤检测SiHa-Msi1组、HeLa-Msi1组及其相应对照组体内肿瘤形成能力;细胞计数、软琼脂克隆形成实验检测SiHa-Msi1组、HeLa-Msi1组及相应对照组细胞的体外增殖能力;肿瘤细胞成球及连续成球实验检测SiHa-Msi1组、HeLa-Msi1组及相应对照组细胞的肿瘤干细胞样特性;在SiHa-Msi1组、HeLa-Msi1组及相应对照组细胞中,采用报告基因分析(TOP-Flash/FOP-Flash)检测Wnt/β-catenin通路活性的变化,采用real-time PCR检测干细胞相关因子Klf4、Sox2、Oct4、Aldh的表达,采用Western blot检测Wnt信号通路中的β-catenin、SOX2蛋白的表达。结果与相应对照组相比,SiHa-Msi1组和HeLa-Msi1组体内形成肿瘤体积和质量显著增加(P<0.05),体外细胞增殖数量、软琼脂形成的单克隆数量均显著增加(P<0.05),肿瘤细胞连续成球后成球数目及直径均显著增加(P<0.05);SiHa-Msi1组、HeLa-Msi1组Wnt通路活性显著增加(P<0.05),干细胞相关因子Sox2、Oct4、Aldh的RNA表达水平显著上调(P<0.05),Wnt通路中的β-catenin和SOX2蛋白表达显著上调(P<0.05)。结论Msi1过表达促进了宫颈癌细胞增殖并维持其干细胞样特性,可能通过激活Wnt/β-catenin信号通路,上调SOX2在宫颈癌细胞中的表达,从而发挥了促进宫颈癌进展的作用。
- 刘宪张燕茹张燕茹冯倩崔南
- 关键词：宫颈癌肿瘤增殖WNT/Β-CATENIN通路
- BAMBI基因敲除小鼠的繁育、基因型鉴定
- 2014年
- 目的 探讨BAMBI-/-小鼠的繁殖和鉴定方法,筛选出足够数量的BAMBI-/-小鼠,为研究BAMBI基因在肥胖、能量代谢等方面的生理功能提供实验动物.方法 将引进的2对BAMBI-/-小鼠扩繁后,以与背景品系C57BL/6J野生型（WT）回交的方式获得BAMBI＋/-小鼠,再将BAMBI＋/-小鼠进行互交大量繁殖.提取幼鼠尾部组织DNA,利用PCR方法鉴定基因型;选取BAMBI-/-小鼠取肩胛部位棕色脂肪组织（BAT）,腹股沟部位皮下白色脂肪组织（sWAT）,性腺周围白色脂肪组织（gWAT）和肝脏,利用实时PCR方法检测BAMBI mRNA的表达量.结果 BAMBI＋/-小鼠互交扩繁,短期能获得大量小鼠;C57BL/6J野生型（WT）、BAMBI＋/-和BAMBI-/-各表型结果基本符合孟德尔遗传规律;BAMBI-/-小鼠敲除效率理想.结论 BAMBI＋/-小鼠互交是繁育BAMBI-/-小鼠的较好方法;PCR方法能够准确鉴定BAMBI-/-小鼠.
- 罗肖魏双羽贾如姚婷张燕茹师小博闫剑群
- 关键词：基因敲除基因型鉴定PCR
- HK2通过Akt1/p-Akt1上调Cdc42表达促进宫颈癌细胞迁移和侵袭被引量：3
- 2022年
- 目的:探究己糖激酶2(HK2)通过Akt1/p-Akt1/Cdc42促进宫颈癌细胞迁移和侵袭的作用机制。方法:G418压力筛选并获取稳定表达HK2蛋白的HeLa和SiHa细胞系;Western blot和细胞免疫化学鉴定HK2蛋白在HeLa和SiHa细胞系中的表达水平;细胞划痕实验检测HK2对HeLa和SiHa体外划痕愈合能力的影响;Transwell迁移、侵袭实验检测HK2对HeLa和SiHa细胞体外迁移和侵袭能力的影响;GEPIA数据库分别分析宫颈癌中HK2的表达与Akt1、Cdc42表达的相关性;Western blot检测Akt1、p-Akt1、Cdc42蛋白在HK2过表达的HeLa细胞和SiHa细胞中的表达情况;在HK2过表达的HeLa、SiHa细胞中应用Akt1/p-Akt1抑制剂MK2206观察Cdc42的表达及细胞迁移和侵袭能力的变化。结果:成功构建HK2稳定表达的HeLa、SiHa细胞系;过表达HK2促进了HeLa、SiHa细胞的划痕愈合能力,促进了HeLa、SiHa细胞的体外迁移和侵袭;GEPIA在线数据库结果显示在宫颈癌中HK2表达与Akt1、Cdc42表达均呈正相关;过表达HK2上调了Akt1、p-Akt1、Cdc42蛋白在HeLa、SiHa细胞中的表达;在HK2过表达HeLa、SiHa细胞中,MK2206的使用抑制了HK2对Cdc42表达上调及细胞迁移和侵袭的促进作用。结论:HK2可能通过Akt1/p-Akt1途径上调Cdc42蛋白的表达促进HeLa和SiHa细胞的迁移和侵袭。
- 王蕾刘宪张燕茹滕月
- 关键词：HK2CDC42宫颈癌
