张梦媛
- 作品数：4 被引量：25H指数：2
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- 呼吸道菌群失调加重小鼠过敏性呼吸道炎症反应被引量：1
- 2017年
- 【目的】探讨呼吸道菌群失调对小鼠过敏性呼吸道疾病发病的影响。【方法】C57BL/6雌性小鼠给予万古霉素雾化吸入10 d后处死,应用16S rRNA高通量测序技术分析支气管肺泡灌洗液(BALF)菌群组成,探索建立小鼠呼吸道菌群失调模型的方法。建模成功后,应用相同的方法建立小鼠呼吸道菌群失调模型,在此基础上,通过腹腔注射致敏及雾化吸入卵清蛋白(OVA)激发,诱导小鼠过敏性呼吸道炎症反应,计数擦鼻频率,检测BALF中细胞总数及嗜酸性粒细胞百分比,肺组织病理分析炎症反应及杯状细胞增生情况,ELISA法检测血清中IgE水平,BALF中IFN-γ、IL-4、IL-5水平,血清、BALF及肠组织中IL-33水平,从而分析呼吸道菌群失调对过敏性呼吸道炎症反应的影响。【结果】万古霉素雾化吸入使小鼠呼吸道Bradyrhizobium、Sphingopyxis、Cupriavidus、Pelomonas等菌属增加,而Akkermansia及Prevotella_6等菌属显著降低,发生明显的菌群失调。利用此动物模型进一步研究发现,呼吸道菌群失调加重了卵清蛋白诱导的过敏性呼吸道炎症反应,表现为擦鼻频率增加,BALF中细胞渗出增加、嗜酸性粒细胞百分比增高,肺组织炎症及杯状细胞增生加重,血清中IgE水平增加。另外,与卵清蛋白组相比,菌群失调联合卵清蛋白组小鼠BALF中Th1型细胞因子IFN-γ水平降低,Th2型细胞因子IL-4、IL-5水平升高,发生更为严重的Th1/Th2平衡失调;BALF中IL-33水平增加,而血清及肠组织中IL-33水平差异无统计学意义,表明呼吸道菌群失调仅影响局部IL-33的产生。【结论】应用万古霉素雾化吸入成功建立了小鼠呼吸道菌群失调模型。呼吸道菌群失调可能通过增加局部IL-33产生,激活Th2及固有样淋巴细胞(ILC),诱发Th1/Th2平衡失调,从而促进过敏性呼吸道疾病发病。
- 王学坤龙云张宗义王森林张梦媛王鹏程
- 关键词：细胞因子
- 肠道厌氧菌失调加重流感病毒感染小鼠肺部免疫病理损伤被引量：13
- 2016年
- 目的探讨肠道厌氧菌失调与流感病毒感染之间的关系,以及对小鼠肺部免疫细胞中炎性因子的影响。方法将36只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、病毒对照组、甲硝唑组,每组12只。甲硝唑组小鼠用18 mg/m L甲硝唑灌胃8 d,造成小鼠肠道厌氧菌菌群失调;再予每只小鼠50μL/d FM1株流感病毒连续滴鼻4 d,建立厌氧菌失调小鼠感染流感病毒的动物模型。观察各组小鼠精神状态、肺指数、肺组织病理形态变化、盲肠及肠黏膜病理形态变化,ELISA测定小鼠肺组织匀浆中白细胞介素4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)、IL-10和IL-17含量的变化。结果甲硝唑能使该组小鼠肺指数明显升高,其肺组织及盲肠组织病理改变较病毒对照组小鼠而言,表现出更为严重的炎症损伤。FM1甲型流感病毒感染后,甲硝唑组小鼠肺组织匀浆中IFN-γ、IL-17水平与病毒对照组相比显著降低,IL-4、IL-10含量虽有升高,但差异无统计学意义。结论肠道厌氧菌失调可能通过调节小鼠肺部炎性因子的分泌,抑制其适应性免疫应答,影响FM1流感病毒在体内复制及清除的时间,从而进一步加重流感病毒引起的免疫病理损伤。
- 吴莎颜宇琦张梦媛施珊珊江振友
- 关键词：肠道菌群炎性因子
- 结核分枝杆菌Hsp65-Esat6与hGM-CSF联合DNA疫苗的构建与体外研究被引量：1
- 2016年
- 目的:应用分子生物学技术,构建p IHsp65-Esat6GM共表达质粒,并在真核细胞中表达.方法:以p EGHsp65Esat-6为模板经聚合酶链反应(PCR)扩增出Hsp65-Esat6基因,同时从质粒p ORF-h GM-CSF中扩增出基因佐剂h GM-CSF,分别克隆到真核表达载体p IRES的多克隆位点A(MCSA)和B(MCSB)中,构建p IHsp65-Esat6GM共表达质粒,并转染Hep G-2细胞中表达和检测.结果:酶切鉴定提示插入的基因片段大小分别为1.93 kb和0.47kb,测序分析表明克隆的Hsp65-Esat6和人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(h GM-CSF)序列与Gen Bank上公布序列完全一致;Western-bolt检测到Hsp65-Esat6融合蛋白相对分子质量(Mr)为75 000 k Da;RT-PCR方法检测出p IGM,p IHsp65GM和p IHsp65-Esat6GM转染组细胞均有h GM-CSF mRNA表达,三组细胞中h GM-CSF基因mRNA的表达量差异无统计学意义(P>0.05).ELISA方法检测到p IHsp65-Esat6GM转染组细胞培养上清中h GM-CSF的表达,且与空载体对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).结论:成功构建和表达了p IHsp65-Esat6GM质粒,为研制优于卡介苗(BCG)的新型抗结核病的DNA疫苗奠定了基础.
- 王森林张梦媛王学坤周曙光江振友
- 关键词：双顺反子基因佐剂
- 小檗碱对甲型流感病毒FM1株感染小鼠肺中RLH信号通路的影响被引量：10
- 2016年
- 【目的】研究小檗碱对甲型流感病毒FM1株感染小鼠肺组织中RLH信号通路的影响,探讨其抗病毒作用的机制。【方法】以50μL流感病毒FM1株LD50滴鼻感染RIG-I-/-小鼠和正常野生型C57BL/6小鼠,建立小鼠流感模型,分别用小檗碱和奥司他韦治疗。观察小鼠的生存率以及肺组织炎症损伤状况;RT-q PCR和Western-blot检测正常野生型C57BL/6小鼠RLH信号通路中RIG-I、NF-κB和MAVS的表达。【结果】正常野生型C57BL/6小鼠小檗碱组的生存率为80%,与病毒组50%相比明显提高,其肺组织病变局限,炎症明显减轻。通过RT-q PCR和Western-blot检测到小檗碱可下调正常野生型C57BL/6小鼠RLH信号通路中RIG-I、NF-κB和MAVS的表达。与病毒组相比,RIG-I、NF-κB和MAVS的m RNA表达量分别降低42.28%、33.12%和48.12%,同时,它们的蛋白表达量分别降低17.37%、13.83%和28.91%。【结论】小檗碱对于FM1株引起的小鼠流感具有较好的治疗作用,可通过影响RLH信号传导通路的活化来发挥抗流感病毒作用。
- 张梦媛颜宇琦秦洪琼王森林施珊珊吴莎江振友
- 关键词：小檗碱炎症反应
