张慧敏
- 作品数：6 被引量：4H指数：1
- 供职机构：新疆农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：新疆维吾尔自治区自然科学基金国家级大学生创新创业训练计划更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程生物学更多>>
- 一株新疆野鸭源新城疫病毒F基因的克隆及序列分析
- 张慧敏木哈买提江·铁格斯加尔肯苏占强杜润慈冉多良姚刚刘建华
- 新疆褐牛CD46基因的原核表达及其多克隆抗体的制备
- 2017年
- 旨在克隆并表达新疆褐牛CD46基因,制备其多克隆抗体,为进一步研究牛CD46分子生物学功能奠定基础。采用RT-PCR方法从新疆褐牛脾脏中扩增CD46基因全长,进行测序,并对测序结果进行生物信息学分析,将CD46部分序列亚克隆于pET-28a(+)和pVAX1载体中。将阳性重组质粒pET-28a-△CD46转化于E.coli Rosetta-gamiB(DE3)感受态细胞,诱导表达截短CD46蛋白。用切胶纯化的His-△CD46融合蛋白免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体;采用ELISA测定多克隆抗体的效价;取无内毒素重组质粒pVAX1-△CD46转入BHK-21(仓鼠肾细胞)细胞,表达产物以制备的多克隆抗体为一抗,采用Western blot法检测该多克隆抗体的特异性。CD46基因的测序结果表明,部分基因蛋白表达、纯化条带大小与预期一致;制备的抗牛CD46多克隆抗体效价高于1∶128 000,并具有良好的特异性。
- 木哈买提江.铁格斯张慧敏杜润慈加尔肯苏战强冉多良刘建华
- 关键词：新疆褐牛CD46融合蛋白多克隆抗体
- 新疆褐牛CD46基因的克隆、原核表达及抗血清制备
- 木哈买提江·铁格斯张慧敏杜润慈加尔肯苏战强李春燕冉多良刘建华
- CD46基因在新疆褐牛不同组织中的表达研究被引量：1
- 2017年
- 为了探究CD46基因在新疆褐牛不同组织中的表达丰度差异,初步掌握CD46基因在新疆褐牛不同组织中的表达规律,试验设计了特异性引物,应用实时荧光定量PCR技术分析新疆褐牛心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、小肠、大肠、胃、肌肉、卵巢和乳腺中的CD46基因表达情况。结果表明,新疆褐牛CD46基因在所检测的11种组织中均有表达,不同组织部位的表达存在差异,其中肝脏CD46表达丰度最高,其表达丰度显著高于肺脏、脾脏、肾脏、胃、小肠、大肠、卵巢和乳腺(P<0.05)。本研究对新疆褐牛各组织CD46基因的表达规律进行初步分析,为CD46基因表达规律与其生物功能研究的开展提供了参考依据。
- 木哈买提江.铁格斯张慧敏宋焕堂加尔肯苏战强冉多良刘建华
- 关键词：新疆褐牛
- 一株新疆野鸟源新城疫病毒的分离鉴定、F基因克隆及遗传进化分析被引量：2
- 2017年
- 为了解新疆野鸟新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)感染情况,分析其分子特征和基因变异特点,防止新城疫的暴发和蔓延,本试验用9日龄SPF鸡胚进行病毒的分离传代,HA、HI试验和RT-PCR方法对位于"东非—西亚迁徙线"福海县的野鸟进行了NDV检测,分离到1株野鸟源NDV,并命名为NDV/Pintail/CH(XJ)/01/2016。结果表明,该NDV分离株F基因ORF长1 662bp,编码553个氨基酸,F基因碱性裂解位点序列为^(112)G-R-Q-G-R-L^(117),符合弱毒株特征;遗传进化分析显示,NDV/Pintail/CH(XJ)/01/2016与乌克兰鸽源分离株Doneck/3/968、比利时鸭源分离株Simeonovgrad核苷酸同源性均为99.7%,属于NDV ClassⅡ基因Ⅱ型。而上述3株病毒均与疫苗毒La Sota具有较高同源性(99.5%~99.8%)。本研究结果为家禽NDV外流进入自然环境提供了论据。
- 张慧敏木哈买提江·铁格斯史军吴桂灵古丽扎提·阿地理加尔肯苏战强冉多良沙依兰·卡依扎兰玲姚刚刘建华无
- 关键词：野鸟F基因遗传进化分析
- 牛病毒性腹泻病毒感染对CD46基因修饰树突状细胞表型及其细胞因子分泌的影响被引量：1
- 2018年
- 为研究CD46分子在BVDV感染树突状细胞(DC)介导的免疫应答中的作用,本研究根据牛CD46基因保守序列设计3对短发卡RNA(shRNA)的正义、反义寡核苷酸链,以及3对乱序列作为阴性对照,将其退火后分别克隆至p LL3.7质粒载体中,获得CD46基因shRNA重组质粒后将其转染MDBK细胞。采用荧光定量PCR和western blot技术筛选最佳沉默CD46基因的shRNA重组质粒,将其和表达载体p VAX1-CD46转染新疆褐牛DC(MDDCs)后利用BVDV感染MDDCs,通过荧光定量PCR检测DC表型及其细胞因子mRNA转录水平。结果显示,与未转染细胞组相比,CD46基因过表达的MDDCs中CD40、CD80、CD86和MHC-II的mRNA转录水平均明显升高(p<0.05);而CD46基因沉默的MDDCs中CD40 mRNA转录水平也明显升高(p<0.05),CD86 mRNA转录水平变化不明显(p>0.05),CD80和MHC-II的mRNA转录水平均明显下降(p<0.05)。与未转染细胞组相比,CD46基因过表达组IL-10和IL-12 mRNA转录水平变化不明显(p>0.05),而CD46基因沉默的MDDCs中IL-10和IL-12 mRNA的表达均明显下降(p<0.05)。本研究从新的角度初步揭示了CD46分子对BVDV感染DC成熟、初始T细胞增殖和分化的影响,为解决DCs对BVDV的免疫抑制作用提供新的思路。
- 刘建华木哈买提江.铁格斯王思云张慧敏胡月苏丹丹加尔肯苏战强翟少华冉多良
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒树突状细胞细胞表型细胞因子
