冯政 作品数:14 被引量:34 H指数:3 供职机构: 扬州大学兽医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏高校优势学科建设工程项目 公益性行业科研专项 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 更多>>
禽沙门氏菌分离株耐药性及Ⅰ类整合子的检测 采用K-B纸片扩散法对61株禽沙门氏菌分离株进行了药敏试验,结果显示所分离的禽沙门氏菌对青霉素、苯唑西林、利福平和万古霉素的耐药率均达到了100%,但对美福仙、诺氟沙星、阿米卡星、卡那霉素、氯霉素、氟苯尼考有较好的敏感性... 苏洋洋 冯政 付玉勤 印云聪 刘珍 陈素娟 彭大新关键词:家禽 沙门氏菌 耐药性 文献传递 禽沙门菌分离株耐药性及Ⅰ类整合子的检测 2017年 为了分析禽沙门菌临床分禽株出现多重耐药的原因,采用Kirby-Bauer纸片扩散法对61株禽沙门菌分离株进行药敏试验筛选,通过PCR方法检测59株多重耐药沙门菌的Ⅰ类整合子的5’-CS端、3’-CS端和可变区基因并进行测序分析。药敏试验结果显示,所分离的禽沙门菌对青霉素、苯唑西林、利福平和万古霉素的耐药率均达到了100%,但对美福仙、诺氟沙星、阿米卡星、卡那霉素、氯霉素、氟苯尼考相对敏感;96.72%沙门菌能耐受6种及其以上抗菌药物,说明沙门菌的多重耐药性比例高。通过PCR及测序发现,5株禽沙门菌(8.5%)中检测到Ⅰ类整合子基因盒,包括4株雏沙门菌和1株肠炎沙门菌。序列分析结果显示,Ⅰ类整合子基因盒的核苷酸同源性达到100%;通过NCBI的BLAST分析发现,Ⅰ类整合子基因盒内含有dfr17和aad A5基因。因此,尽管禽沙门菌分离株的多重耐药性比例高,但是仅有少数菌株的耐药性与Ⅰ类整合子相关。 苏洋洋 冯政 付玉勤 印云聪 刘珍 陈素娟 彭大新关键词:家禽 沙门菌 耐药性 1株鹌鹑源鸡白痢沙门菌的分离鉴定及致病性初探 被引量:1 2021年 为查明某养殖场鹌鹑大量死亡的原因,采集病死鹌鹑的脏器进行病原的分离鉴定,测定疑似细菌的耐药情况,并进行动物回归试验。结果表明:病死鹌鹑剖检病变主要表现为肝脏肿大呈土黄色,肾脏肿大;分离菌株在麦康凯培养基上呈无色、半透明菌落;能发酵赖氨酸和β-半乳糖苷;采用选择性培养基培养和多重PCR (mPCR)试验确定其为鸡白痢沙门菌;该菌对苯唑西林等6种抗菌药耐药,呈现多重耐药性;气囊接种鹌鹑的半数致死量(LD50)为9.5×10^(5) cfu。这一研究说明鹌鹑的死亡是由鸡白痢沙门菌引起的,为鹌鹑的种群防控净化提供了理论依据。 李超 冯政 张若楠 王楠 王希玉 秦涛 秦涛 彭大新关键词:鹌鹑 鸡白痢沙门菌 不依赖RpoS的鸡白痢沙门菌生物被膜形成相关基因鉴定 被引量:1 2023年 为鉴定鸡白痢沙门菌生物被膜形成不依赖Rpo S的调控基因,以鸡白痢沙门菌S6702及其rpoS基因缺失株S6702ΔrpoS为母本,对S6702生物被膜状态和S6702ΔrpoS生物被膜状态(S7BF vs S7SBF)及S6702ΔrpoS浮游状态和S6702ΔrpoS生物被膜状态(S7SFY vs S7SBF)进行转录组测序分析,筛选差异表达基因,构建基因缺失株并验证其生物被膜形成能力。结果显示,S7BF vs S7SBF组共鉴定出83个差异表达基因,S7SFY vs S7SBF组共鉴定出1984个差异表达基因,筛选出15个可能与生物被膜形成相关的基因。以STM2361和STM1703为靶标构建基因缺失株,结晶紫染色定量结果显示,STM2361不影响鸡白痢沙门菌生物被膜的形成,而STM1703缺失能增强鸡白痢沙门菌的生物被膜形成能力。本研究鉴定出不依赖RpoS的鸡白痢沙门菌生物被膜形成调控基因,丰富了鸡白痢沙门菌生物被膜调控的信息。 冯政 苏洋洋 苏洋洋 秦涛 陈素娟 秦涛关键词:鸡白痢沙门菌 生物被膜 RPOS 1株鸭源污染棒状杆菌的分离鉴定与致病性分析 被引量:1 2021年 为查明某养殖场肉鸭皮肤损伤的病因,采集病鸭的脏器进行病原分离鉴定,测定了细菌的耐药情况,并进行动物回归试验。结果表明,分离菌株JS01在血琼脂培养基上呈现淡黄色透明光滑菌落,生化特性与棒状杆菌属细菌相似;16S rDNA基因序列与污染棒状杆菌(Corynebacterium pollutisoli)的同源性为100%;该菌仅对5种测试抗菌药敏感,多重耐药率达87.5%。腹腔接种雏鸭5.8×108CFU,可致75%雏鸭死亡;皮下和皮肤划痕接种不致死,但皮肤划痕接种的鸭会出现皮肤损伤。因此判定,肉鸭的皮肤损伤是由污染棒状杆菌感染引起的。 李超 张若楠 李海宾 冯政 王希玉 仲艳 秦涛 秦涛 彭大新生物被膜形成相关基因对鼠伤寒沙门菌耐药性的影响 被引量:3 2020年 目的检测鼠伤寒沙门菌S025△rpoN、△rpoS、△csgA和△bcsA缺失株生物被膜形成能力和对药物敏感性的差异,研究生物被膜及其成分对细菌耐药性的影响。方法运用试管法检测生物被膜,药敏试验、最小抑菌浓度(MIC)法和最小杀菌浓度(MBC)法检测细菌对药物的敏感性。结果与野生株相比,△rpoN缺失株生物被膜形成能力增强,但对抗生素的敏感性没有发生改变,△rpoS和△csgA缺失株丧失生物被膜形成能力,△bcsA缺失株生物被膜形成能力下降,△rpoS、△csgA和△bcsA缺失株对头孢噻肟、美福仙、四环素、强力霉素和庆大霉素的敏感性提高,且△csgA缺失株抑菌圈直径大于△bcsA缺失株,表明生物被膜形成提高了细菌的耐药性。庆大霉素MBC结果显示,野生株和△rpoN为6.25μg/ml,而△rpoS、△csgA和△bcsA分别为1.56μg/ml、1.56μg/ml和3.125μg/ml,表明生物被膜形成提高抗生素的杀菌浓度。结论沙门菌形成生物被膜能提高细菌的耐药性,且卷曲菌毛的作用更为重要。 阴银燕 史艺 秦涛 何凯明 徐诺 朱中天 冯政 王敏 殷立晗 陈素娟 徐正中 彭大新关键词:鼠伤寒沙门菌 生物被膜 耐药性 纤维素 生物被膜形成关键基因csgD对鼠伤寒沙门菌黏附侵袭上皮细胞能力的影响 2022年 为了探究生物被膜形成关键基因csgD与鼠伤寒沙门菌黏附侵袭上皮细胞能力的关系,本研究利用Red同源重组系统构建鼠伤寒沙门菌S025株csgD基因缺失株(S025ΔcsgD),利用原核表达载体构建回复株(S025ΔcsgDR);运用结晶紫染色定量、共聚焦显微镜和扫描电镜观察、平板表型鉴定等方法检测鼠伤寒沙门菌生物被膜形成能力,并比较野生株、缺失株和回复株黏附侵袭Caco-2细胞和HeLa细胞的差异。结晶紫染色定量、共聚焦显微镜和扫描电镜观察结果显示,与野生株S025和回复株S025ΔcsgDR相比,S025ΔcsgD生物被膜形成能力显著降低;生物被膜成分分析发现,野生株呈红色干燥粗糙型菌落,而S025ΔcsgD呈白色光滑型菌落,表明其卷曲菌毛和纤维素成分减少,回复株的菌落与野生株相似。黏附与侵袭试验结果显示,与野生株与回复株相比,S025ΔcsgD的黏附率和侵袭率显著降低。结果表明,生物被膜形成关键基因csgD在鼠伤寒沙门菌黏附和侵袭宿主上皮细胞方面发挥关键作用,这为进一步阐明生物被膜状态下的鼠伤寒沙门菌的致病机理奠定了理论基础。 张若楠 徐诺 陆游 冯政 陈素娟 秦涛 阴银燕 彭大新关键词:鼠伤寒沙门菌 生物被膜 2016 年~2018年华东地区家禽沙门菌的分离鉴定及耐药性分析 被引量:12 2020年 为了解华东地区家禽中沙门菌的流行和耐药情况,本研究于2016年~2018年分别采集患病鸡、鸭、鹅和鸽的肝脏样品195份、67份、138份和37份,进行沙门菌的分离,结合多重PCR(mPCR)和血清凝集试验确定其血清型,利用药敏纸片法测定沙门菌分离株对21种常用抗生素的耐药性。结果显示,2016年、2017年和2018年沙门菌分离株的数量分别为78株、71株和84株,共233株,其中鼠伤寒沙门菌110株(47.21%),鸡白痢沙门菌82株(35.19%),肠炎沙门菌25株(10.73%),德尔卑沙门菌5株(2.14%),纽波特沙门菌3株(1.29%),都柏林沙门菌2株(0.86%),波斯坦沙门菌2株(0.86%),猪霍乱沙门菌孔成道夫生物型2株(0.86%),邦戈尔沙门菌1株(0.43%)和斯坦利沙门菌1株(0.43%)。来源分布显示,鸡源分离株以鸡白痢沙门菌为主,鸭源、鹅源和鸽源分离株均以鼠伤寒沙门菌为主。季度分布统计结果显示,每年第二季度和第三季度沙门菌的分离率较高,第一季度和第四季度沙门菌的分离率相对较低。药敏试验结果显示,对青霉素、苯唑西林、利福平和红霉素等耐药菌株占比均在85%以上;2018年的分离株对头孢西丁、四环素和复方新诺明耐药性显著增加;多重耐药菌株占比达91.42%。以上结果表明,华东地区家禽源沙门菌主要为鼠伤寒沙门菌和鸡白痢沙门菌,多重耐药性严重,且对某些抗生素的耐药性显著增加,应予以持续监测。本研究为预防和控制沙门菌病的流行及传播提供参考依据。 仲艳 王希玉 李海宾 冯政 胡建乐 费中杰 杨铜 钱程 张凯云 刘岳龙 秦涛 陈素娟 陈素娟关键词:沙门菌 家禽 血清型 耐药性 2015~2018年华东地区野禽沙门菌的分离鉴定及耐药性分析 被引量:3 2019年 为了解野禽中沙门菌的携带和耐药情况,研究于2015~2018年采集华东地区野禽新鲜粪便样品5 889份,进行沙门菌的分离,采用多重PCR(mPCR)试验结合玻板凝集试验的方法确定其血清型,利用药敏纸片法测定了分离株对21种常用抗生素的耐药性。结果共分离到56株沙门菌,分离率为0.95%。其中,鼠伤寒沙门菌30株(占53.57%),猪霍乱沙门菌孔成道夫生物型10株(占17.86%),肠炎沙门菌7株(占12.50%),波斯坦沙门菌5株(占8.93%),猪霍乱沙门菌4株(占7.14%)。药敏试验结果显示,分离株对青霉素、头孢唑啉、苯唑西林、红霉素和利福平等抗生素的耐药率均超过50%,尤其对苯唑西林和利福平的耐药率为100%,多重耐药率达10.71%。以上结果表明,华东地区野禽携带的沙门菌主要为鼠伤寒沙门菌,首次从野禽中分离到猪霍乱沙门菌孔成道夫生物型和猪霍乱沙门菌。 李玉军 仲艳 费中杰 冯政 冯政 李超 张伟伟 秦涛 陈素娟 彭大新关键词:沙门菌 野禽 血清型 耐药性 鼠伤寒沙门菌SseB和SseL蛋白的原核表达和多克隆抗体的制备 被引量:3 2020年 为制备鼠伤寒沙门菌SseB和SseL蛋白的特异性多克隆抗体(多抗),以鼠伤寒沙门菌S025为供体菌,PCR扩增sseB和sseL基因,插入原核表达载体pGEX-6P-1,转化BL21(DE3)感受态细胞进行诱导表达,获得纯化蛋白免疫小鼠制备多抗;使用λ-red同源重组方法构建sseB和sseL基因缺失株;通过野生株和缺失株的Western-blot分析验证制备血清的特异性。结果显示:成功构建出重组质粒pGEX-6P-1-sseB和pGEX-6P-1-sseL,转化感受态细胞后,在IPTG 1 mmol/L、温度28℃、转速为220 r/min、诱导时间12 h的条件下,SseB和SseL蛋白呈可溶性表达;纯化蛋白免疫小鼠制备了多抗,Western-blot分析显示该多抗可特异性检测鼠伤寒沙门菌中的SseB和SseL蛋白。这两种蛋白多抗的获得为进一步研究其功能奠定基础。 李海宾 冯政 仲艳 王希玉 李超 秦涛 秦涛 彭大新关键词:鼠伤寒沙门菌 原核表达 多克隆抗体