邹绮
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 供职机构：包头医学院生物医学研究中心更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金内蒙古自治区自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 人DNMT3B1原核表达载体的构建和表达被引量：1
- 2011年
- 目的构建人DNMT3B1原核表达载体,并进行初步表达。方法据Genebank中人DNMT 3B1 cDNA序列设计并合成特异性引物,提取HCT116细胞总RNA,利用PCR技术扩增出DNMT 3B1,并将扩增产物克隆到原核表达载体PGEX-4T.3中,并对重组质粒进行鉴定。转化E.coli BL21,IPTG诱导表达目的蛋白。结果 PCR扩增得到人DNMT 3B1的cDNA片段大小为2.6 kb,重组子利用限制性内切酶进行酶切、PCR鉴定和DNA序列分析得到原核表达载体PGEX-DNMT3B1I,PTG诱导表达后,SDS-PAGE分析表明目的蛋白在E.coli BL21(DE3)中高效表达,相对分子质量约为100 kd。结论成功构建了人DNMT3B1原核表达载体并完成其在E.coli BL21(DE3)中的诱导表达,为进一步在体外研究DNMT3B异构体提供了条件。
- 姜树原张颜波邹绮罗天娇张胜周立社邵国
