沈青
- 作品数：6 被引量：44H指数：3
- 供职机构：青岛大学医学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 重组金黄色葡萄球菌肠毒素A的表达及鉴定被引量：1
- 2013年
- 目的通过基因重组方式获得高纯度、高含量重组金黄色葡萄球菌肠毒素A(rSEA)。方法将金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)基因片段插入pET28a载体中,测序并正确鉴定后,将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,表达目的蛋白。重组蛋白用Ni-NTA His蛋白亲和柱纯化。结果 SDS-PAGE结果表明成功表达了分子量约为30 kD的重组蛋白,经Western blot和小鼠生物学鉴定,表达产物为重组金黄色葡萄球菌肠毒素A,并且具有较好的免疫原性,为制备抗金黄色葡萄球菌肠毒素A单克隆抗体及建立相应的免疫学检测方法奠定了基础。结论构建的rSEA表达载体稳定,可高效表达目的 rSEA蛋白。
- 王佳慧李楠沈青韩春卉张靖江涛李凤琴
- 关键词：葡萄球菌肠毒素原核表达
- 肉制品中马源性成分实时荧光PCR检测方法的建立被引量：3
- 2013年
- 目的建立肉制品中马源性成分的实时荧光PCR检测方法。方法参考欧盟实验室推荐的方法设计引物和探针,建立实时荧光PCR检测方法并验证方法的特异性、灵敏度,在北京部分超市、农贸市场、餐馆随机采集国产和进口牛、羊肉制品进行马源性成分检测。结果实时荧光PCR方法对马源性成分具有较高的特异性,与羊、猪、鸡、鸭、兔DNA均无交叉反应,与牛DNA在Ct 33.81出现交叉反应;所建方法对牛、羊肉中人工掺入马肉成分的检测灵敏度是0.1%。对北京市场上随机采集的122份牛、羊肉制品的检测结果显示,所有样品均未检出马肉成分。结论所建肉制品中马源性成分的检测方法简单、特异,检测灵敏度完全达到欧盟对肉类食品中掺入马源性成分比例的要求。
- 李楠王佳慧沈青韩春卉张靖李凤琴徐进江涛
- 关键词：实时荧光PCR牛肉制品羊肉制品
- DNA条形码技术在鱼种鉴定中的应用被引量：1
- 2014年
- 鉴于世界鱼种多达3万种,传统的形态学分类方法已不能满足对鱼种进行准确鉴定的需要,DNA条形码技术为这一问题的解决开辟了一条新思路。本文就DNA条形码的发展史、技术原理以及在鱼种鉴定中的应用进行综述。
- 沈青张东峰李凤琴
- 关键词：DNA条形码
- 北京地区牛、羊肉片中鸭、鸡、猪源性成分调查被引量：23
- 2014年
- 目的建立生肉制品中鸭、鸡、猪源性成分的荧光PCR检测方法,对北京地区出售的牛、羊肉片进行成分调查。方法合成检测鸭、鸡、猪源性成分的特异性引物和探针,建立实时荧光PCR检测方法,测定方法的特异性、灵敏度,在北京部分超市、农贸市场、餐馆采集牛、羊肉片进行成分调查。结果所建立的实时荧光PCR方法对鸭、鸡、猪源性成分具有较好特异性,与常见食用肉类DNA在Ct 30以内无交叉反应;对混合肉中鸭、鸡、猪成分DNA的检出限是0.1%。北京市场上采集的86份牛、羊肉片中,30份检出上述成分,占34.9%;羊肉片的掺假率高于牛肉片;农贸市场采集样品掺假率明显高于超市和餐馆。结论所建生肉制品中鸭、鸡、猪源性成分的检测方法简单、特异,对样品的检测结果显示,北京市售牛、羊肉中存在掺入鸭、鸡、猪肉的现象。
- 李楠王佳慧沈青李凤琴徐进江涛
- 关键词：实时荧光PCR牛肉片
- 应用DNA条形码技术鉴定烤鱼片、鱼干中河鲀鱼鱼种被引量：15
- 2014年
- 目的应用DNA条形码技术对北京和厦门市市售烤鱼片、鱼干中河鲀鱼成分进行鉴定。方法以烤鱼片、鱼干中提取基因组DNA为模板,利用针对河鲀鱼细胞色素氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因的特异性引物进行PCR扩增,将扩增产物克隆并测定线粒体COⅠ基因序列。将测序结果与GenBank中已有河鲀鱼的DNA序列进行BLAST比对,并且构建分子进化树。结果本研究27份样品中有15份能扩增出特异性条带。通过BLAST比对和进化树分析,将15份样品归属到不同的河鲀鱼鱼种中。结论北京和厦门市市售烤鱼片和鱼干中存在混入河鲀鱼的现象,应加强监管和规范产品的加工程序以避免中毒事件发生。
- 李楠江涛沈青王佳慧韩春卉张靖李凤琴徐进计融
- 关键词：烤鱼片鱼干DNA条形码掺假
- 市售烤鱼片中河鲀毒素检测及鲀毒鱼鱼种的鉴定被引量：4
- 2014年
- 目的检测北京和青岛市售烤鱼片样品中的河纯毒素（TTX），并对TTX阳性样品的鱼种进行鉴定。方法用ELISA方法检测烤鱼片样品中的河鲍毒素，并提取TTX阳性样品的线粒体基因组DNA，利用DNA条形码的线粒体细胞色素氧化酶亚基I（C01）基因对鱼种进行鉴定，构建分子进化树进行聚类分析。结果在所检测的90份样品中，TTX阳性者58份（64％），含量范围O．10～63．81mg／kg。阳性样品中，有24份（41．3％）被鉴定出含有纯毒鱼，且21份（87．5％）样品为剧毒的月尾兔头纯。结论北京和青岛市售部分烤鱼片中TTX阳性并检出含有纯毒鱼，建议生产厂家严把原料关，防止纯毒鱼混入，监管部门应加强对市售烤鱼片标签标识的监管。
- 沈青江涛李楠王佳慧韩春卉张靖徐进张东峰李凤琴
- 关键词：烤鱼片河鲀毒素
