【目的】本研究旨在克隆获得家蚕Bombyx mori Caspase家族基因,并通过RNAi技术初步分析其在家蚕细胞水平细胞凋亡中的功能。【方法】用c DNA末端快速扩增方法(rapid amplification of c DNA ends,RACE)克隆家蚕Caspase家族一个新基因,用RNAi和流式细胞术初步分析该基因在家蚕细胞凋亡中的功能。【结果】将克隆获得的家蚕Caspase家族基因命名为Bm Caspase-X,其全长为2 105 bp,开放阅读框长为1 494 bp,编码497 aa,分子量为57.8 k Da,等电点为5.29。Bm Caspase-X含有Caspase特有的结构位点。系统进化分析表明,Bm Caspase-X与家蚕ICE同其他昆虫Caspase-4同源物先聚在一起,再与具有长前体结构域的昆虫其他因子聚为一类。RNAi初步结果显示该基因干扰后没有出现明显的细胞凋亡。【结论】Bm Caspase-X具有典型Caspase特征,属于Caspase家族成员。目前RNAi实验结果表明Bm Caspase-X未能引起家蚕细胞凋亡的改变。本文为进一步研究该基因的功能奠定基础。
