刘乃勇
- 作品数：25 被引量：62H指数：5
- 供职机构：西南林业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金云南省教育厅科学研究基金云南省应用基础研究基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 管氏肿腿蜂寄生对黄粉甲硫氧还蛋白基因转录的影响
- 2016年
- 硫氧还蛋白参与体内必要的抗氧化作用和氧化还原调控过程,在昆虫体内能维持稳定的氧化还原状态,为初步了解硫氧还蛋白在黄粉甲体内的作用以及管氏肿腿蜂寄生对该蛋白基因转录的影响,采用RACE技术,克隆获得黄粉甲硫氧还蛋白基因,并进行多序列比对及荧光定量PCR分析。结果表明:cDNA序列长531 bp,开放阅读框318 bp,其推导的氨基酸序列编码106个氨基酸,3'端非编码区序列为95 bp,5'端非编码区序列为119 bp;预测理论分子量为11.97 kDa,等电点为4.22,含有一个保守的氧化还原活性位点CGPC。黄粉甲硫氧还蛋白基因编码的蛋白序列与其他昆虫的硫氧还蛋白相似性高于60%;硫氧还蛋白基因在黄粉甲各发育阶段中,在蛹期的表达水平最高,在成虫期表达水平最低,在蛹期时的脂肪体中高度表达。被管氏肿腿蜂寄生后,黄粉甲硫氧还蛋白基因转录水平明显受到上调诱导。
- 黄镜梅刘乃勇张祖兵杨斌朱家颖
- 关键词：黄粉甲硫氧还蛋白基因克隆管氏肿腿蜂
- 椰子织蛾转录组分析被引量：2
- 2018年
- 为获取入侵性检疫害虫椰子织蛾的基因信息,利用高通量测序技术对该害虫进行了转录组测序。结果表明:经拼接共获得了37 416条unigenes,平均长度为803 bp,N50为1 415 bp;通过BlastX比对,有19 154条unigenes (51.19%)成功在Nr中被注释。在Nr中成功注释的unigene,与黑脉金斑蝶同源性最高,达到68.45%;在GO注释中,共有14 131 (37.76%)条unigenes被成功注释到细胞组分、分子功能和生物过程3大类的54个分支;在COG数据库中,成功注释的8 606条unigenes被注释到26个分类;在KEGG中,共有6 171条(16.49%) unigenes被注释到5大类通路的260条途径上。基于构建的转录组数据库,鉴定得到3 248个微卫星。
- 徐志文任雪敏王俊张枝全刘乃勇阎伟朱家颖
- 关键词：转录组基因功能注释
- 黄粉甲储存蛋白hexamerin基因的克隆及表达分析被引量：2
- 2019年
- 基于RACE技术从黄粉甲蛹中克隆得到储存蛋白hexamerin基因(TmolHex1和TmolHex2),应用生物信息软件和荧光定量PCR技术分析了基因的序列和表达特征。结果表明:克隆获得的TmolHex1和TmolHex2基因的开放阅读框分别为2133bp和2103bp,分别编码710和700个氨基酸,其编码蛋白预测理论分子量分别为85.53kDa和84.35kDa,等电点分别为6.05和6.72。TmolHex1和TmolHex2氨基酸序列中存在信号肽序列,富含芳香氨基酸,且具有芳香储存蛋白家族特征序列。TmolHex1和TmolHex2基因在黄粉甲的老熟幼虫和蛹脂肪体中表达量最高,表明其可能在生长发育、变态和能量代谢方面发挥重要作用。
- 徐志文任雪敏赵满刘乃勇吴国星杨斌朱家颖
- 关键词：黄粉甲HEXAMERIN基因克隆
- 斜纹夜蛾信息素结合蛋白SlitPBP4的分子克隆、组织表达谱及结合特性分析被引量：4
- 2018年
- 【目的】鉴定斜纹夜蛾Spodoptera litura新的信息素结合蛋白(pheromone binding protein,PBP)基因,明确其在斜纹夜蛾不同组织中的表达水平并探讨其功能。【方法】基于已报道的烟草天蛾Manduca sexta、家蚕Bombyx mori、君主斑蝶Danaus plexippus和庆网蛱蝶Melitaea cinxia 4种非夜蛾科昆虫PBP4同源基因的序列特点及与其他PBP基因在染色体上的相邻关系,通过分析实验室先前克隆到的斜纹夜蛾PBP/GOBP基因序列,克隆斜纹夜蛾PBP4同源基因;通过RT-PCR和q PCR技术测定该基因在斜纹夜蛾雌雄成虫不同组织中的表达水平;利用体外表达和荧光竞争性结合实验测定斜纹夜蛾PBP4蛋白对性信息素组分和植物气味物质的结合能力。【结果】在夜蛾科昆虫斜纹夜蛾中鉴定到首个PBP4基因,命名为Slit PBP4(Gen Bank登录号:MG356847),c DNA编码210个氨基酸,具有N末端信号肽、疏水性气味分子结合域及6个保守半胱氨酸等PBP的典型序列特征,其基因组DNA在保守位置也含有2个内含子;但和已报道的斜纹夜蛾3个PBP相比,PBP4的C末端明显较长。Slit PBP4在雄成虫腹部(生殖系统)极高表达,在雌雄成虫触角及其他组织中仅微弱表达或不表达。荧光竞争性结合实验结果表明,Slit PBP4蛋白与被测定的信息素组分及植物气味物质均没有明显结合能力。【结论】报道了夜蛾科昆虫的首个PBP4基因,该基因可能主要参与雄虫生殖相关的生理过程而非嗅觉功能。
- 孙佳斌刘乃勇李双美闫祺董双林
- 关键词：斜纹夜蛾组织表达分析原核表达
- 冷杉梢斑螟化学感受蛋白DabiCSP8的配体结合特性分析被引量：1
- 2023年
- 采用分子生物学和荧光竞争性结合测定等技术,研究了冷杉梢斑螟Dioryctria abietella雌虫性腺和雌、雄成虫足中高表达的化学感受蛋白DabiCSP8基因的表达特征和功能。定量分析结果表明,DabiCSP8基因在雌虫性腺中显著高表达,表达量分别是雌、雄虫触角的1232.27倍和3130.64倍;此外,该基因在雌、雄成虫足中表达量也较高。通过原核表达系统及亲和层析技术获得了13.64 kD的目的蛋白DabiCSP8。结合测定结果表明,DabiCSP8与探针N-苯基-1-萘胺(1-NPN)具有强的结合能力,结合常数(K_(1-NPN))为(1.61±0.02)μmol/L。β-紫罗兰酮是DabiCSP8的最佳结合配基,解离常数(K_(d))为(11.43±0.62)μmol/L。DabiCSP8结合腔内的极性氨基酸精氨酸46(Arg46)能够与β-紫罗兰酮形成两个氢键,暗示Arg46在该化合物的结合中起着重要作用。此外,DabiCSP8与部分杀虫剂具有中等强度的结合能力。
- 朱垚龙王政全吴春尹宁娜刘乃勇
- 关键词：化学感受蛋白Β-紫罗兰酮分子对接
- 一种利用氯吡脲类组合外源激素清除薇甘菊的方法
- 本发明属于农业化工技术领域，尤其为一种利用氯吡脲类组合外源激素清除薇甘菊的方法，以配制1L浓度为50ppm的清除剂为例，包括如下步骤：S1、称取50mg氯吡脲、50mg吲哚乙酸和50mg赤霉素，将其溶于5mL乙醇中；S2...
- 赵宁杨斌王大伟马云强冯小飞朱家颖刘乃勇周杰珑
- 文献传递
- 管氏肿腿蜂毒液精氨酸激酶基因的克隆与表达分析
- 2019年
- 为了解精氨酸激酶作为寄生蜂毒液蛋白的功能,本研究克隆了管氏肿腿蜂毒液精氨酸激酶基因的开放阅读框,分析其表达特征,并测定了该毒液蛋白在毒液中的酶活性。克隆获得的毒液精氨酸激酶基因的开放阅读框长1 068 bp,编码了355个氨基酸,其理论分子量为39.71 kDa,等电点为5.86,并具有精氨酸激酶典型的N端和C端结构域,以及精氨酸和ADP结合位点、ATP-胍基磷酸转移酶活性位点和高度保守的天冬氨酸和精氨酸残基。系统进化分析表明,膜翅目精氨酸激酶分为两个亚家族,管氏肿腿蜂精氨酸激酶属于亚家族1。荧光定量PCR分析结果显示,该毒液蛋白基因在卵、幼虫、蛹、雌成虫中的表达量逐渐上升,至羽化10 d时达最高。在不同组织中,该基因在头部和毒液器官中的表达量较高。通过酶活测定发现,管氏肿腿蜂毒液中精氨酸激酶的酶活性为5.18 U/g蛋白。该研究有助于今后揭示寄生蜂毒液精氨酸激酶的功能与作用机制。
- 张枝全任雪敏樊晓红王俊吴国星刘乃勇朱家颖
- 关键词：寄生蜂毒液精氨酸激酶基因克隆酶活测定
- 管氏肿腿蜂寄生及注射其毒液对黄粉甲蛹营养代谢的影响被引量：1
- 2018年
- 本文以肿腿蜂科管氏肿腿蜂Scleroderma guani为研究对象,研究该蜂寄生及毒液对寄主黄粉甲Tenebrio molitor蛹营养代谢的影响。通过Braford法、香兰素-浓硫酸法、蒽酮法和3’5-二硝基水杨酸法分别测定管氏肿腿蜂寄生及注射其毒液对黄粉甲蛹血淋巴和脂肪体中蛋白质、脂类和糖类含量的影响。研究发现管氏肿腿蜂寄生和注射其毒液能引起黄粉甲蛹血淋巴中的蛋白质含量增加和脂类含量下降,而脂肪体中的蛋白质含量减少和脂类含量升高。同时,该蜂寄生和注射其毒液,均能引起黄粉甲蛹血淋巴和脂肪体中的总糖、海藻糖和还原糖含量升高,但糖原含量下降。研究结果表明,管氏肿腿蜂毒液能调控寄主黄粉甲蛹血淋巴和脂肪体中营养物质的代谢,为揭示该蜂对寄主的营养代谢调控机制奠定了基础。
- 任雪敏赵满吴国星刘乃勇徐志文朱家颖
- 关键词：寄生蜂寄生毒液营养代谢
- 云南锦斑蛾幼虫触角和口器感器的超微结构被引量：2
- 2022年
- 利用扫描电子显微镜技术,研究了云南锦斑蛾幼虫头部触角和口器上的感器。结果表明,云南锦斑蛾幼虫头部呈椭球形。每根触角上具有1根毛形感器、1根刺形感器、5根锥形感器和1根栓锥形感器。上唇两侧各有6根刺形感器。内唇分布有6根刺形感器、4根内唇感器和2根指形感器。每个上颚表面具有2根刺形感器。下颚的感器主要分布在外颚叶和下颚须上,每片外颚叶上具有3根刺形感器、3根锥形感器和2根栓锥形感器;每根下颚须上具有8根锥形感器。每根下唇须上具有1根锥形感器和1根栓锥形感器。因此,锥形感器是云南锦斑蛾幼虫头部数量最多的感器,可能是幼虫搜寻寄主的关键感器;不同类型的感器在长度上存在差异。
- 李根层糯淑梅吴春杨安锦刘乃勇
- 关键词：扫描电镜感器
- 白蜡脊虎天牛雌雄成虫特征差异被引量：5
- 2017年
- 前期调查三台核桃Juglans sigillata‘Santai’虫害表明,白蜡脊虎天牛Xylotrechus rufilius(Bates,1884)是目前云南省三台核桃的主要蛀干天牛之一。采用形态对比研究法和扫面电镜技术观察白蜡脊虎天牛雌雄成虫外部形态特征和感器超微结构发现:雌虫前胸背板宽与长的比例要大于雄虫,雌虫腹部末端未被鞘翅覆盖的部分明显大于雄虫。白蜡脊虎天牛触角上有4类8种类型的感器,分别是2种毛型感器、1种刺形感器、4种锥形感器和1种耳形感器;其中锥形感器I型和耳形感器仅分布于雌虫触角,锥形感器IV型仅分布于雄虫触角。另外,后足跗节的毛型感器簇形态和前跗节锥形感器雌雄均存在明显差异。
- 吉帅帅刘乃勇赵宁庄翔麟
- 关键词：触角
