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文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇农业科学

主题

  • 1篇亲和性
  • 1篇柱头
  • 1篇自交
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  • 1篇自交亲和性
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  • 1篇芸芥
  • 1篇相关基因
  • 1篇基因
  • 1篇DDRT-P...

机构

  • 1篇甘肃农业大学
  • 1篇河西学院

作者

  • 1篇肖占文
  • 1篇张芬琴
  • 1篇白生文
  • 1篇范惠玲
  • 1篇程红玉
  • 1篇孙万仓
  • 1篇孙晓岩

传媒

  • 1篇西北农业学报

年份

  • 1篇2009
1 条 记 录,以下是 1-1
排序方式:
芸芥柱头总RNA提取方法及自交亲和性相关基因mRNA差异显示分析体系研究
2009年
以芸芥自交亲和系为材料,用改进异硫氰酸胍法提取芸芥柱头总RNA,所提取的RNA完整性好、没有DNA和蛋白质等污染,完全适用于后继实验。同时对影响DDRT-PCR扩增的参数进行了筛选研究,确定了Mg2+、dNTP、引物和TaqDNA聚合酶的浓度和扩增程序。结果表明,在25μL DDRT-PCR反应总体系中各组分的最佳量分别为:17.2μL DEPC-ddH2O;1.5μL 10×PCR Buffer(Mg2+);2.0μL dNTP(各2.5mmol/L);1.0μL锚定引物H-T11M(10μmol);1.0μL随机引物(5μmol/L);1.5μL cDNA;0.8μLTaqDNA Polymerase(2.5 U/μL)。PCR反应程序:①94℃4 min;②30℃1 min 30 s;③72℃1 min;④94℃30 s;⑤42℃1 min 30 s;⑥72℃1 min;从④到⑥35个循环;⑦72℃10 min。
白生文孙万仓范惠玲张芬琴肖占文程红玉孙晓岩
关键词:芸芥DDRT-PCR
共1页<1>
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