韩鹏
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 比格犬会厌黏膜来源干细胞的分离培养与生物学特性鉴定
- 2013年
- 目的:探讨建立喉部黏膜间充质干细胞的分离培养方法,并对其生物学特性进行鉴定,为进一步研究其在喉部瘢痕中形成的作用及喉部组织工程提供参考。方法:以比格犬喉部会厌背侧(舌面)黏膜为研究对象,采用消化培养的方法分离具有间充质干细胞样细胞。选取第3代细胞对其进行生物学特性鉴定,首先利用MTT法检测其增殖活性及克隆形成情况,然后通过流式细胞术检测细胞表面分子标记物CD29及CD34的表达情况,最后应用第3代细胞对其进行成脂肪细胞和成骨细胞分化培养,观察其分化能力。结果:分离培养细胞形态较为一致,绝大多数呈梭形,排列不规则。MTT增殖活性实验及克隆形成试验结果显示,所分离的细胞具有良好的增殖活性和克隆形成率;流式细胞术结果显示,该细胞表达CD29间充质干细胞细胞表面标记物,低表达造血干细胞细胞表面标记物CD34;同时,该细胞诱导分化成脂肪细胞和成骨细胞实验表明,其具有多向分化潜能。结论:从比格犬会厌背侧黏膜分离的细胞具有间充质干细胞样特性,为进一步研究喉部瘢痕形成机制及喉部组织工程提供了技术基础。
- 梁媛媛韩鹏杨润琴刘阳邓志宏
- 关键词：间充质干细胞生物学特性
- 不同部位喉黏膜间充质细胞的分离培养被引量：3
- 2011年
- 目的:探讨不同部位喉黏膜间充质细胞的分离、培养方法,为喉部组织工程提供更多的可供选择的种子细胞。方法:收集临床上喉部手术病人切下的不同部位的喉黏膜,主要是会厌的背侧黏膜和声带的黏膜,各3例,共计6例。对会厌背侧的黏膜采用消化培养的方法,对声带部位的黏膜采用组织块培养法。最后通过免疫荧光染色对两种方法所获得的细胞进行鉴定,确定其来源于喉黏膜的间充质。结果:通过两种方法均可以成功获得相应部位的细胞,免疫荧光染色vimentin均呈阳性表达且CK均呈阴性表达,证明了获得的细胞确实是来源于间充质。结论:本实验成功的培养出了喉部不同部位的间充质细胞,为喉部的组织工程提供了更多的可供选择的种子细胞。
- 刘阳韩鹏梁媛媛邓志宏
- 关键词：喉黏膜间充质细胞
- 犬声带激光损伤模型的建立及意义
- 2012年
- 目的建立支撑喉镜下犬声带激光损伤模型,观察其声带损伤愈合的大体形态学及组织学变化,为研究声带损伤后的修复提供动物模型。方法选用中华田园犬5只,4只于支撑喉镜下以半导体激光损伤双侧声带膜部中后1/3,深达甲杓肌,1只犬未行任何处理作为对照组。分别在术后4d、2、4及8w于支撑喉镜下观察声带大体形态改变后,各处死1只犬取声带损伤部位组织,通过HE染色、Masson三色染色、EVG染色、爱先蓝染色及免疫组化染色观察声带固有层胶原、弹力纤维、透明质酸(HA)及纤维连接蛋白(fibronectin)含量及分布的变化。结果术后4d支撑喉镜下见犬双侧声带充血水肿,组织切片示上皮未被覆固有层,损伤处大量炎性细胞侵润,固有层、肌层结构混乱不清;2w时喉镜下见声带充血水肿较前减轻,切片示受损部位上皮完全被覆,炎性细胞较前减少,胶原增生并排列紊乱,弹力纤维含量减少,HA含量下降,纤维连接蛋白含量增加;4w时喉镜下见声带炎症反应基本消失,受损部位表面不规则,瘢痕形成,切片示受损部位固有层被致密的纤维组织所替代,胶原含量持续增加,弹力纤维含量略下降,HA含量持续下降,Fibronectin含量持续增加;8w时喉镜下仍可见声带瘢痕,损伤处局部萎缩,切片示胶原呈粗大条索状,弹力纤维含量趋于稳定,HA含量下降,Fibronectin含量略上升。结论半导体激光可造成犬声带膜部热损伤模型,损伤后声带固有层内大量纤维组织形成,胶原含量上升,弹力纤维含量降低,HA含量降低,为研究声带损伤修复提供了可靠的动物模型。
- 韩鹏梁媛媛赵昱刘阳杨润琴邓志宏
- 关键词：声带动物模型支撑喉镜
- 声带组织切片方法的比较
- 2012年
- 目的:探讨犬声带冠状位切片与水平位切片各自的特点,为声带实验提供合适的切片方法。方法:家犬4只,2只取材后行冠状位石蜡切片,2只取材后行水平位石蜡切片。通过HE染色观察声带固有层的一般组织结构,Masson三色染色观察固有层中胶原的排列情况。结果:HE染色示冠状位、水平位切片均可见声带表面被覆复层鳞状上皮,固有层内有大量排列紧密的纤维组织,纤维组织中夹杂少量腺体,固有层下方为肌层。冠状位切片可观察声带某一点冠状面固有层的情况,若观察整个声带的情况需声带连续切片;水平位切片可在一张切片中观察到前联合、声带膜部及声带突部位的固有层情况,解剖标志明显,利于定位。Masson三色染色示冠状位、水平位切片均可见固有层浅层有较细的胶原纤维束,中层有较粗的纤维束与较细的纤维束交织排列,深层纤维束排列更紧密。结论:冠状位切片可观察声带某一点冠状面固有层的整体情况,水平位切片可在一张切片中观察到前联合、膜部及声带突部位的固有层情况。
- 韩鹏赵昱王延辉梁媛媛刘阳杨润琴邓志宏
- 关键词：声带MASSON三色染色
