林梓浩
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：西北农林科技大学园艺学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 黄瓜叶片细胞壁蛋白双向电泳体系的建立被引量：3
- 2013年
- 【目的】建立一套适合黄瓜叶片细胞壁蛋白质组学研究的双向电泳体系，为黄瓜细胞壁蛋白质组学的后续研究奠定基础。【方法】以黄瓜品种“长春密刺”幼苗叶片为材料，比较2种不同提取介质（CaClz和LiCl溶液）对细胞壁蛋白的提取效果，对比IPG胶条梯度、裂解液、上样量及等电聚焦程序对黄瓜叶片细胞壁蛋白双向电泳结果的影响。【结果】以0．2mol／LCaCl。和3moI／LLiCl溶液依次提取黄瓜叶片细胞壁蛋白，选用17cmpH3～10NLIPG胶条和裂解液1I（7mol／L尿素、2mol／L硫脲、40g／LCHAPS、10g／LDTT和1mmol／LPMSF），上样量800μg，按聚焦程序I（20℃水化14h，100V30min，250V30min，500V30min，1000V1h，线性升压5h至10000V，10000V聚焦6．5h）聚焦后进行双向电泳分离和考马斯亮蓝G-250染色，可获得重复性好、分辨率高的双向电泳图谱。【结论】建立并优化了适合于黄瓜叶片细胞壁蛋白质组学分析的双向电泳体系。
- 林梓浩李玉红董从娟陈鹏
- 关键词：黄瓜叶片细胞壁蛋白双向电泳
- 黄瓜叶片胞间隙蛋白质双向电泳体系的建立被引量：1
- 2013年
- 以黄瓜种质‘PI088’幼苗为材料,提取胞间隙液,制备蛋白样品,通过对不同IPG胶条、等电聚焦条件、分离胶浓度、上样量等条件的探索,建立适合黄瓜叶片胞间隙蛋白质组的双向电泳体系。结果显示:(1)用pH 3～10的非线性IPG胶条,等电聚焦时间为70 000Vh,分离胶浓度为10%,上样量为800μg时,能够得到较好的2-DE图谱。(2)利用所建立的双向电泳体系找到了对照及接种霜霉菌后2d的黄瓜叶片胞间隙差异蛋白,其中的12个上调表达点和10个下调表达点的表达量变化在1.5倍以上。并选取一个差异点成功进行了质谱分析。(3)质谱分析结果显示,所找的差异点为一种酸性的几丁质酶,等电点为4.27。可见,采用所建立的双向电泳体系可获得分辨率高、重复性好的2-DE图谱并能很好地用于质谱分析。
- 董从娟李玉红林梓浩陈鹏
- 关键词：黄瓜叶片细胞间隙液双向电泳
- 黄瓜-霜霉菌互作中抗感种质叶片分泌蛋白质组学分析
- 目的与意义霜霉病是黄瓜栽培中最为严重的常发性、流行性卵菌病害,培育抗病品种是防治黄瓜霜霉病的最有效的途径,而抗病品种的高效培育依赖于黄瓜抗病机制的解释,因此加强黄瓜对霜霉病抗性分子机理的研究,对于黄瓜抗病分子育种具有一定...
- 董从娟林梓浩李玉红
- 关键词：黄瓜霜霉菌
