李迪
- 作品数：13 被引量：23H指数：2
- 供职机构：陕西省人民医院更多>>
- 发文基金：陕西省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- siRNA靶向沉默载脂蛋白2(Lcn2)对缺氧诱导视网膜神经节细胞-5细胞凋亡的作用及机制被引量：2
- 2017年
- 目的研究载脂蛋白2(lipocalin 2,Lcn 2)对缺氧诱导视网膜神经节细胞-5(retinal ganglion cells,RGC-5)损伤的抑制作用及可能机制。方法将RGC-5细胞置于缺氧环境下处理(0 h、4 h、8 h、12 h、24 h、48 h),采用实时定量PCR和Western blot法检测Lcn 2的表达水平。将细胞分为4组:对照组、缺氧组、si NC+缺氧组(转染siRNA阴性对照后进行缺氧处理24 h)和si Lcn 2+缺氧组(细胞转染Lcn 2 siRNA后进行缺氧处理24 h)。ELISA检测细胞凋亡率和Caspase-3活性,DCFH-DA试剂盒检测活性氧(reactive oxygen speciesin,ROS)产生情况,线粒体膜电位检测试剂盒评价线粒体膜电势,Western blot检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved-Caspase-3,c-Caspase-3)、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(cleaved-PARP,c-PARP)、Bax、Bcl-2和细胞色素C(cytochrome C,Cyto C)蛋白表达。结果与0 h组相比,缺氧组(4 h、8 h、12 h、24 h和48 h)Lcn 2 mRNA表达水平均升高(均为P<0.05),同时缺氧组(12 h、24 h和48 h)的Lcn 2蛋白表达水平均较0 h组升高(均为P<0.05)。与对照组细胞凋亡率(99.66%±2.86%)比较,缺氧组(138.33%±13.76%)显著升高(P<0.05);si Lcn 2+缺氧组细胞凋亡率(105.02%±8.60%)较si NC+缺氧组(142.33%±6.54%)显著下降(P<0.05)。此外,缺氧组较对照组Caspase-3相对活性增强、c-Caspase-3和c-PARP表达均上调(均为P<0.05),与si NC+缺氧组比较,si Lcn 2+缺氧组Caspase-3相对活性水平、c-Caspase-3和c-PARP相对表达水平均降低(均为P<0.05)。与对照组ROS相对荧光强度(1.03±0.11)比较,缺氧组(4.26±0.63)增强(P<0.05),si Lcn 2+缺氧组ROS相对荧光强度(3.10±0.24)较si NC+缺氧组(4.73±0.26)显著减弱(P<0.05)。且si Lcn 2+缺氧组较si NC+缺氧组线粒体膜电势增加、Cyto C蛋白表达水平及Bax和Bcl-2相对比率减少(均为P<0.05)。结论沉默Lcn 2抑制缺氧诱导的细胞凋亡及ROS产生,可能是通过抑制线粒体凋亡信号通路实现的。
- 车选义赵清侠赵清侠
- 关键词：细胞凋亡
- 小鼠视神经损伤后视网膜中TLR-9与MyD88表达变化被引量：1
- 2022年
- 目的:探讨Toll样受体-9(TLR-9)与髓样分化因子(MyD88)在小鼠视神经损伤(ONI)后视网膜中的表达变化。方法:选取8周大小的雄性C57BL/6J小鼠36只,随机分为6组:空白对照组(未做任何处理)、ONI 1d组(视神经损伤后1d取材)、ONI 3d组(视神经损伤后3d取材)、ONI 5d组(视神经损伤后5d取材)、ONI 7d组(视神经损伤后7d取材)、ONI 14d组(视神经损伤后14d取材)。分组后通过视神经夹持的方法制作小鼠视神经损伤模型,利用RT-qPCR与Western-blot检测各组小鼠视网膜中TLR-9与MyD88的mRNA和蛋白水平。结果:ONI 1d组视网膜中TLR-9与MyD88的mRNA和蛋白水平与空白对照组比较无差异(P>0.05);ONI 3d、ONI 5d、ONI 7d、ONI 14d组视网膜中TLR-9与MyD88的mRNA和蛋白水平与空白对照组比较均明显增加(P<0.01)。与空白对照组比较视网膜中TLR-9与MyD88的mRNA和蛋白水平在小鼠ONI 3d开始升高(P<0.01),ONI 5d达到峰值(P<0.001),ONI 7d开始逐渐下降(P<0.01)。结论:小鼠视神经损伤能够激活视网膜中TLR-9与MyD88表达,TLR-9与MyD88可能在视神经损伤的进程中起重要作用。
- 李雪颖李迪陈丽平李静
- 关键词：视神经损伤视网膜
- 一种可调节型眼科手术头位固定器
- 本实用新型公开了一种可调节型眼科手术头位固定器，包括调节板，还包括角度调节组件和头部固定组件，所述调节板的顶部安装有头部固定组件，所述调节板的侧壁安装有角度调节组件，所述角度调节组件包括弧形板、电动伸缩杆、第一竖板、第二...
- 李迪
- BHMT对同型半胱氨酸诱导的人晶状体上皮细胞氧化损伤的保护作用被引量：2
- 2019年
- 目的:观察甜菜碱高半胱氨酸甲基转移酶(BHMT)在同型半胱氨酸(Hcy)环境下对人晶状体上皮细胞(HLEC)的保护作用。方法:构建BHMT基因过表达慢病毒载体,将体外培养的HLEC随机分为3组:正常组:正常培养的HLEC;对照组:感染了空载体的HLEC-B3,BHMT过表达组(OE):感染了过表达BHMT基因载体的HLEC-B3,均培养于10%FBS(胎牛血清)培养基+5mmol/L Hcy培养液中。应用EdU(5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷)试剂盒检测细胞的增殖能力,流式细胞仪检测活性氧(ROS)含量,可见分光光度计测算谷胱甘肽(GSH)活性,Western blotting检测内质网应激相关蛋白(GPR78,Nrf2)及凋亡相关酶Caspase-12的表达。结果:BHMT过表达组较对照组细胞增殖能力增长约30.0%(P<0.05)。ROS检测显示,正常组、对照组、过表达组荧光强度分别为(89.2043±0.3511)%、(91.4502±0.0606)%、(49.5625±0.4502)%,过表达组与正常组有差异(P<0.05);GSH活性检测显示:相比于正常组与对照组,BHMT高表达组GSH活性明显上升(P<0.05);Western blotting结果显示:GRP78的相对表达量在正常组及对照组中明显高于过表达组,Nrf2的相对表达量在正常组与对照组中明显低于过表达组。凋亡相关酶Caspase-12的相对表达量在过表达组中明显低于对照组。结论:BHMT可以抑制Hcy对HLEC的氧化损伤作用,降低ROS水平,升高GSH活性,减轻内质网应激反应,抑制细胞凋亡。BHMT对Hcy诱导的HLEC氧化损伤有重要的保护作用。
- 周海燕薛雨顺严宏李迪王新川
- 关键词：同型半胱氨酸人晶状体上皮细胞细胞凋亡
- 硫氧还蛋白-2在氧化损伤的人晶状体上皮细胞中的表达及其意义被引量：10
- 2018年
- 目的:探讨硫氧还蛋白-2(thioredoin-2,Trx-2)是否参与白内障的发病过程及其对过氧化氢(H_2O_2)诱导的人晶状体上皮细胞氧化损伤的影响。方法:选取志愿者(因外伤行透明晶状体取出术患者)10例和行超声乳化白内障手术患者(年龄大于60岁)30例的晶状体前囊膜,采用链霉素亲生物素蛋白-过氧化物酶标免疫组织化学法检测志愿者和白内障患者晶状体上皮细胞中Trx-2蛋白的表达情况。体外培养SRA01/04细胞,根据不同处理分为空白对照组、20μmol/L H_2O_2组、50μmol/L H_2O_2组、100μmol/L H_2O_2组、阴性对照组(转染对照空p CMV6质粒并用100μmol/L H_2O_2处理)和过表达Trx-2组(转染p CMV6-Trx-2过表达质粒并用100μmol/L H_2O_2处理)。采用噻唑蓝[3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT]法检测各组细胞活力;采用流式细胞术检测各组细胞的凋亡;采用化学比色法检测各组细胞中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶(catalase,CAT)活性,谷胱甘肽(glutathione,GSH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;采用Western印迹检测各组细胞中Trx-2以及B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白(B-cell lymphoma 2 protein,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(cysteinyl aspartate specific proteinase-3,caspase-3)的表达。结果:与志愿者相比,白内障患者晶状体上皮细胞中Trx-2蛋白表达明显减少(P<0.05)。与空白对照组比较,20,50,100μmol/L H_2O_2组Trx-2蛋白表达量均明显降低(均P<0.05)。与空白对照组相比,100μmol/L H_2O_2组和阴性对照组细胞存活率降低、凋亡率增加,细胞内SOD和CAT活性降低、GSH含量减少、MDA含量增加,Trx-2和Bcl-2蛋白表达降低,Bax和caspase-3蛋白表达增加(均P<0.05)。与阴性对照组比较,过表达Trx-2组细胞存活率增加、凋亡率降低,SOD和CAT活性增加、GSH含量升高、MDA含量降低,Trx-2和Bcl-2蛋白表达
- 车选义赵清侠李迪
- 关键词：H2O2晶状体上皮细胞
- 糖尿病合并视网膜脱离术后高眼压的处理及危险因素探讨被引量：5
- 2019年
- 目的:观察糖尿病合并孔源性视网膜脱离患者行玻璃体切割术后短期内眼压的波动情况并探讨可能的危险因素及有效的治疗方法。方法:连续收集100例糖尿病合并高度近视及孔源性视网膜脱离的患者并分为两组:试验组和对照组,试验组患者术后使用妥布霉素地塞米松滴眼液。分别监测术眼玻璃体切割术术前及术后的眼压情况,神经纤维层厚度(RNFL)和视盘参数,同时记录对侧眼术前的情况。实验数据采用Graphpad 7.0进行分析。结果:所有的糖尿病患者中有42眼在玻璃体切割术后1wk内出现眼压升高,其中试验组31眼,而对照组11眼。术后5d-1wk及1mo时两组间差异有显著统计学意义。随后,39眼经过治疗后眼压下降,3眼接受了青光眼滤过手术。与眼压升高前的视盘各参数相比,眼压升高后,平均及下方RNFL厚度变薄,盘沿面积变小,同时视杯容积和垂直杯盘比增加。眼压升高患者对侧眼的RNFL厚度相比于从未出现高压眼的患者明显变薄。结论:玻璃体切割术术后连续使用激素类药物是糖尿病合并视网膜脱离患者术后眼压升高的危险因素,并且可疑青光眼患者使用激素后眼压更易升高。
- 石蕊谢安明李迪车选义Rechard Hom
- 关键词：高度近视孔源性视网膜脱离眼压升高开角型青光眼
- BHMT对高同型半胱氨酸环境下大鼠晶状体上皮细胞的保护作用被引量：1
- 2019年
- 目的观察甜菜碱高半胱酸甲基转移酶(betaine-homocysteine methyl transferase,BHMT)在高同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)环境下对大鼠晶状体上皮细胞的保护作用。方法 SPF级SD大鼠28只,颈椎脱臼法处死后取出晶状体,随机分为对照组(A组)、BHMT组(B组)、Hcy+BHMT组(C组)、Hcy组(D组),每组7只。每组孵育24 h后观察晶状体透明度的改变,晶状体研磨超声粉碎,提取各组总蛋白,Bio-Rad蛋白质定量后,Western blot检测以下蛋白质变化:内质网应激蛋白相关的葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78),抗氧化损伤类蛋白质转录因子NF-E2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2-related factor 2,Nrf2),谷胱甘肽还原酶(glutathione reductase,GR),凋亡相关酶半胱氨酸蛋白水解酶-12(cysteinyl aspartate specific proteinase-12,Caspase-12),凝胶成像分析系统显影。使用流式细胞术检测细胞内2’,7’-二氯双氢荧光素(2’,7’-Dichlorofluorescein,DCF)的荧光强度,间接检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。结果体外培养24 h后,A、B组晶状体透明,D组晶状体混浊,C组较D组晶状体混浊程度明显减轻;ROS定量检测结果显示:D组表达量明显高于A、B、C组(均为P<0.05),而C组与A、B组比较差异均无统计学意义(均为P>0.05);内质网应激蛋白GRP78:D组表达量均明显高于A、B、C组(均为P<0.05),而C组与A、B组比较差异均无统计学意义(均为P>0.05);Nrf2与GR的表达量:D组均明显低于A、B、C组(均为P<0.05),而C组与A、B组比较差异均无统计学意义(均为P>0.05);Caspase-12表达量:D组均明显高于A、B、C组(均为P<0.05),而C组与A、B组比较差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论 BHMT在体外可以有效防护高Hcy环境下大鼠晶状体氧化损伤,减轻内质网应激反应,清除ROS,阻止细胞凋亡,减轻晶状体混浊度,证明了其在防治与Hcy有关的疾病方面的积极作用。
- 周海燕薛雨顺王新川李迪高宁宁
- 关键词：高同型半胱氨酸
- 上调microRNA-27b对血小板衍生因子诱导下的人视网膜色素上皮细胞增殖的抑制作用被引量：2
- 2020年
- 目的观察过表达的microRNA-27b(miR-27b)对血小板衍生因子(platelet-derived growth factor,PDGF)诱导下的人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)增殖的抑制作用,探讨miR-27b在ARPE细胞生物学行为中的作用及其调控机制。方法将miR-27b过表达质粒或空载体转入ARPE-19细胞36 h后,用终浓度为20μg·L^-1的PDGF预处理ARPE-19细胞5 h。根据转染物不同,将实验分为空白对照组(control组)、miR-27b阴性对照组(miR-27b NC组)、miR-27b模拟物转染组(PDGF+mimics组)和空载体转染组(PDGF+NC组)。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测转染后各组ARPE-19细胞中miR-27b的表达水平;MTT法测定各组细胞活性;通过流式细胞术评估各组细胞周期的分布变化;Western blot检测各组细胞周期的正向调控因子cyclinD1、CDK4和负向调控因子p21 CIP1和p27 KIP1的表达水平。结果qRT-PCR检测结果显示:经PDGF处理5 h,与miR-27b NC组相比,PDGF+NC组miR-27b的表达显著降低(P<0.01);与PDGF+NC组相比,PDGF+mimics组miR-27b的表达增加(P<0.01)。MTT检测结果显示:与miR-27b NC组相比,PDGF+NC组ARPE-19细胞的光密度(D)值增加(P<0.01);而与PDGF+NC组相比,PDGF+mimics组可明显抑制ARPE-19细胞的D值(P<0.01)。流式细胞术检测结果显示:与空白对照组和miR-27b NC组相比,PDGF+NC组G0/G1期细胞的百分比显著降低,S期细胞的百分比增加(P<0.05);而与PDGF+NC组相比,PDGF+mimics组miR-27b的过表达显著增加了G0/G1期细胞的百分比,并抑制了细胞增殖(均为P<0.05)。Western blot检测结果显示:与PDGF-NC组相比,PDGF+mimics组miR-27b的过表达可显著降低cyclinD1蛋白和CDK4蛋白的表达,同时增强了p21 CIP1蛋白和p27 KIP1蛋白的表达(均为P<0.05)。结论上调miR-27b表达可抑制PDGF诱导的ARPE细胞增殖。
- 李静李迪李雪颖寇列玲车选义
- 关键词：人视网膜色素上皮细胞血小板衍生因子细胞周期
- 一种眼部手术用辅助装置
- 本发明公开了一种眼部手术用辅助装置，涉及医疗器械技术领域。为了解决现有的眼部手术辅助装置在对眼部进行手术时，操作不便，手术效率低下，不能很好的对眼部情况进行观察。一种眼部手术用辅助装置，包括活动板，所述活动板通过安装件转...
- 李迪
- 非诺贝特联合雷珠单抗球内注射对糖尿病性视网膜神经纤维层损伤的保护作用
- 2020年
- 目的观察口服非诺贝特对接受多次雷珠单抗球内注射的糖尿病性黄斑水肿(DME)患者视网膜神经纤维层(RNFL)厚度及黄斑区硬性渗出的影响。方法回顾性分析就诊于我院的63例DME患者(105眼)的临床资料,将患者按照是否口服非诺贝特分为非诺贝特组(F组,n=29,44眼)、DME组(D组,n=34,61眼),正常对照组(N组,n=20,40眼)。F组及D组患者接受球内注射雷珠单抗,随访6个月,比较各组的治疗效果,并分析抗VEGF治疗后RNFL变薄的危险因素。结果治疗后6个月,F组的各方位RNFL、AMT及CFT厚度均与N组无显著差异(P>0.05),但明显厚于D组,渗出总面积明显小于D组(P<0.05)。Logistic回归分析显示,糖尿病病史、高甘油三酯为抗VEGF治疗后RNFL变薄的独立危险因素,而口服非诺贝特的年限为保护性因素(P<0.05)。结论口服非诺贝特可辅助DME的治疗,对DME造成的视网膜神经损伤具有明显的保护作用。
- 石蕊李迪秦静刘明杨乐张雪梅车选义
- 关键词：非诺贝特糖尿病性黄斑水肿硬性渗出球内注射
