李梦颖
- 作品数：3 被引量：16H指数：2
- 供职机构：武汉科技大学医学院公共卫生学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 精子相关抗原6(SPAG6)与TCTE3蛋白间相互作用探讨被引量：2
- 2017年
- 目的:探讨精子相关抗原6(sperm associated antigen 6,Spag6)和T复合体相关睾丸表达3(T-complex associated testis expressed 3,TCTE3)之间的相互作用。方法:PCR法观察Tcte3在雄性小鼠各组织中的表达;以小鼠睾丸c DNA为模板,扩增Tcte3序列,构建Tcte3/p GADT7、Tcte3/p EGFPN2重组质粒;以Tcte3/p EGFPN2转染CHO细胞和COS-1细胞,免疫荧光染色及Western blot检测TCTE3在细胞中的定位和表达;以Spag6/p GBKT7和Tcte3/p GADT7进行酵母双杂交实验,提取酵母蛋白后采用Western blot检测TCTE3与SPAG6之间是否存在直接的相互作用。结果:Tcte3在睾丸、脑、肝、肾、肺、脾、肌肉中均有表达;酶切和测序鉴定证实Tcte3/p GADT7和Tcte3/p EGFPN2重组质粒均构建成功;体外实验发现TCTE3主要在CHO和COS-1细胞质中表达,当与SPAG6质粒共转染后,TCTE3被募集至细胞微管中表达;酵母双杂交实验显示TCTE3/SPAG6组合后,在缺少SD/-Leu/-Trp/-His的培养板上有菌落生成,Western blot显示菌落中TCTE3、SPAG6蛋白表达显著,分子量正确。结论:精子相关抗原SPAG6与TCTE3之间存在直接的相互作用,SPAG6可募集TCTE3至细胞微管中表达。
- 双超凡柳赟昊刘晙玭闵洁李梦颖桂媛黄金宇张玲张志兵
- 关键词：男性不育酵母双杂交蛋白表达
- 精子相关抗原6与速激肽1相互作用关系的探讨被引量：3
- 2016年
- 目的:构建速激肽1(Tac1)基因真核表达载体并探讨其与精子相关抗原6(SPAG6)之间的相互作用。方法:提取10只昆明雄性小鼠的心、肝、脾、肺、肾、脑、肌肉、睾丸8个组织的RNA,逆转录成c DNA后,用RT-PCR法观察Tac1在各组织中的表达。构建Tac1/p GADT7、Tac1/p EGFP-N2重组质粒,将Tac1/p EGFP-N2转染至CHO和COS-1细胞,采用免疫荧光染色及Western印迹检测TAC1在细胞中的定位和蛋白表达。将Tac1/p GADT7与Spag6/p GBKT7进行酵母双杂交实验,提取酵母蛋白用Western印迹检测TAC1与SPAG6之间是否存在相互作用。结果:Tac1主要在睾丸、脑、心脏中表达。酶切和测序鉴定表明Tac1重组质粒构建成功,酶切鉴定片段390 bp。TAC1单独转染时,定位于CHO细胞的整个胞体,与SPAG6质粒共转染后,TAC1被募集至细胞微管中表达,用Western印迹检测到相对分子质量约为40 000的融合蛋白表达。与SPAG6的酵母双杂交实验显示TACl/SPAG6在缺少3种氨基酸(Leu、Trp、His)的培养板上有菌落生成,经Western印迹证实酵母融合蛋白中含有TAC1和SPAG6。结论:成功构建Tac1重组质粒,并利用该质粒证实了TAC1与SPAG6之间存在相互作用关系。
- 闵洁李梦颖柳赟昊刘晙玭双超凡张玲张志兵
- 关键词：细胞定位酵母双杂交雄性小鼠
- 前列腺按摩液/精浆弹性蛋白酶联合诊断ⅢA型前列腺炎合并不育症的价值被引量：11
- 2017年
- 目的:探讨前列腺按摩液(EPS)/精浆弹性蛋白酶(NE)联合诊断ⅢA型前列腺炎合并不育症的价值。方法:2015年5月至2017年3月分别遴选已生育ⅢA型前列腺炎患者(生育组)62例、ⅢA型前列腺炎合并不育症患者(不育组)67例,和无泌尿生殖道疾病对象(对照组)57例,检测其EPS和精浆中NE含量、精液常规、EPS常规及症状评分(CPSI);二元Logistic回归分析EPS/精浆的NE比值。结果:诊断ⅢA型前列腺炎合并不育症的联合预测因子为(精浆NE-2×EPS NE)。对129例ⅢA型前列腺炎患者(病例组)的相关性分析显示,联合预测因子与EPS的白细胞(WBC)呈负相关(r=-0.914,P<0.01),与症状评分、精子浓度、精子活率、精子活力呈负相关(P均<0.01),与精浆WBC、精液pH值的关联无统计学意义(P>0.05)。该预测因子在生育组、不育组、对照组中均值和95%置信区间分别为-2 238(-2 595,-2 054)、-1 511(-1 778,-1 307)、-148(-181,-118),在病例组(生育组+不生育组)和对照组间、病例组内生育组和不育组间差异有统计学意义(P<0.01)。联合预测因子诊断ⅢA型前列腺炎合并不育症的受试者工作特征曲线(ROC)面积为0.71(P<0.01)。结论:EPS NE和精浆NE含量联合诊断ⅢA型前列腺炎合并不育症有较大诊断价值,使用联合预测因子优于单独采用EPS NE或精浆NE含量诊断IIIA型前列腺炎合并不育症。
- 陈浩李梦颖许珊丹朱长才张玲
- 关键词：男性不育弹性蛋白酶
