李富禄
- 作品数:5 被引量:14H指数:2
- 供职机构:山西农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金:山西省回国留学人员科研经费资助项目山西省国际科技合作计划引进国际先进农业科技计划更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 猪CART mRNA全CDS区序列的克隆与表达载体的构建被引量:3
- 2011年
- 选用猪为研究对象,以可卡因苯异丙胺调控转录肽(CART)作为影响猪繁殖机能的多肽,依据NCBI上登录的CARTmRNA序列设计3对特异性引物,用RT-PCR方法从下丘脑内扩增出CART mRNA的部分序列并进行序列分析;再根据扩增出的序列设计一对带酶切位点的特异性引物,用PCR方法扩增出含EcoRⅠ/HindⅢ酶切位点的CART mRNA的全编码序列(CDS)区序列.结果表明:猪下丘脑CART mRNA的CDS区全长367 bp,CART基因在下丘脑上有表达,并成功构建pEG-32a-CART原核表达载体.
- 李鹏飞李富禄于秀菊吕丽华
- 可卡因-苯丙胺调控转录肽(CART)对猪卵巢卵泡颗粒细胞雌激素产生的影响被引量:11
- 2012年
- 旨在研究可卡因-苯丙胺调控转录肽(Cocaine amphetamine regulated transcript,CART)对促卵泡素(Follicular stimulating hormone,FSH)诱导的猪卵巢卵泡颗粒细胞雌激素产生的影响。用Long-term培养方法在不同CART、FSH浓度下对猪卵巢卵泡颗粒细胞培养7d,在显微镜下观察各孔细胞生长情况并采集图像;采用双抗体夹心ABC-ELISA法测定各孔雌激素浓度。细胞培养168h后:(1)在培养液不添加CART时,添加FSH孔中的雌激素浓度与不添加孔相比,显著提高;浓度为25ng.mL-1时,雌激素浓度最高,为(17 295.57±184.03)pg.mL-1;(2)CART对体外培养的无FSH和FSH为5ng.mL-1的猪卵巢卵泡颗粒细胞雌激素的产生没有影响;(3)当培养体系FSH浓度分别为25和50ng.mL-1时,随着CART浓度的升高(0.01、0.1、1μmol.L-1),培养液雌激素浓度有下降的趋势,但各组间差异不显著(P>0.05)。但是,当FSH为25ng.mL-1,CART为0.1和1μmol.L-1时,与对照组相比,颗粒细胞雌激素的产生明显受到抑制(P<0.05)。但是,统计分析FSH和CART互作效应并不显著(P>0.05),这一点需进一步试验证明;(4)当培养液添加50ng.mL-1 FSH时,随着CART浓度的升高(0.01、0.1、1μmol.L-1),与对照组相比,雌激素浓度各组差异不显著(P>0.05)。猪卵巢卵泡颗粒细胞雌激素的产生需在FSH诱导下进行;当培养液FSH为25和50ng.mL-1时,CART对FSH诱导的猪卵巢卵泡颗粒细胞雌激素的产生有抑制作用,但抑制效果并不显著。由此推断,并不像单胎的牛、羊,CART在猪卵泡发育过程中,可能并非是个主要的局部负调控因子。
- 李鹏飞岳文斌李富禄黄洋孙晋艳朱芷薇于秀菊贺俊平范瑞文任有蛇吕丽华
- 关键词:促卵泡素雌激素颗粒细胞
- 猪下丘脑CART完整CDS区结构域分析
- 2011年
- 为获得猪可卡因苯异丙胺调控转录肽(Cocain and amphetamine-regulated transcript,CART)的完整CDS区并分析其结构域,根据GenBank中公布的其他物种CART的cDNA序列,设计了三对特异性引物,采用RT-PCR技术扩增出猪下丘脑组织CART mRNA的部分序列。经NCBI比对,与其他物种的相似性较高,提示该序列为猪CART的mRNA序列,CART mRNA在猪下丘脑上有表达;对该序列进行3D结构分析,发现猪CART蛋白在第40~116位氨基酸间存在一个CART超家族(CART Superfamily),这个超家族可能通过作为铁离子的配合基,在动物体内实现多种生理功能。
- 李鹏飞李富禄于秀菊吕丽华
- 关键词:CART克隆
- 猪下丘脑中肝细胞生长因子基因序列的测定及其研究
- 2010年
- 本实验采用PCR技术检测出猪下丘脑有HGF的表达,并测定了其部分序列,共281bp,并与其它物种HGF基因进行同源序列比较得出:猪下丘脑扩增出HGF与其他物种HGF基因具有很高的同源性。本研究为诠释下丘脑的内分泌功能提供新的基础,HGF在下丘脑分泌机制和作用途径还需进一步研究证实。
- 李富禄于秀菊张涛卫宁吕丽华
- 关键词:下丘脑肝细胞生长因子PCR
- CART对FSH诱导的绵羊卵巢卵泡颗粒细胞雌激素分泌影响的研究
- 本研究在国内首次将绵羊作为研究对象,展开对可卡因-苯丙胺调控的转录肤(Cocaine-and Amphetamine-Regulated Transcript,CART)对绵羊繁殖性能影响的相关研究。(1)Trizol法...
- 张涛李富禄黄洋孙晋艳文怡刘超吕丽华
- 关键词:绵羊颗粒细胞
- 文献传递