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葡萄座腔菌A13人工诱导对白木香叶化学组成影响研究被引量：2: 2017年; 分析了葡萄座腔菌(Botryosphaeria rhodina)A13人工诱导对白木香叶化学组成的影响。以B.rhodina A13人工诱导前后白木香叶为材料,GC-MS联用技术分析白木香叶三氯甲烷提取物挥发性成分。研究发现,已结香、未结香白木香叶化学组成差异较大,十六烷酸、角鲨烯、β-谷甾醇、γ-谷甾醇和α-生育酚为差异组分。结果表明,B.rhodina A13人工诱导沉香(树脂)形成过程中,对白木香叶挥发性成分可产生一定影响。; 张道旭冯美柔陈晓东陈晓颖周欣高晓霞

不同酸剂诱导人工沉香的分析与评价被引量：6: 2017年; 该研究按照《中国药典》(2015年版)要求测定样品醇溶性浸出物含量,同时建立GC-MS指纹图谱,使用《中药指纹图谱相似度评价(2012年版)》计算指纹图谱相似度,峰面积归一化法计算170~270 min与0~100 min 2区间总峰面积的比值,自动质谱退卷积定性系统(AMDIS)结合保留指数(RI)鉴定共有组分和差异组分,OPLS-DA结合相关系数P(corr)和变量权重(VIP)筛选差异组分,灰色关联度和TOPSIS分析法综合评价人工沉香品质。结果显示18批人工沉香中15批浸出物含量符合要求,指纹图谱相似度在0.439~0.779,2区间总峰面积比值在0.307~13.254,共鉴定出9个共有组分和8个差异组分,综合上述20个指标进行灰色关联度和TOPSIS分析得到2%水杨酸诱导的人工沉香品质最优。建立的灰色关联度结合TOPSIS分析法可快速判断不同酸性诱导剂生产的人工沉香品质,为人工沉香的全面质量评价提供参考依据。; 周欣陈丽燕陈晓东钟兆健李浩华章卫民高晓霞; 关键词：TOPSIS

基于ITS2条形码序列鉴定商品沉香基源植物被引量：10: 2015年; 目的在沉香性状、显微和理化鉴别、浸出物含量测定的基础上,通过探讨不同品种间的r DNA TIS2序列差异及系统发育分析,为商品沉香的鉴定提供分子生物学依据。方法以白木香、商品沉香及人工诱导沉香为材料,对其进行醇溶性浸出物测定、性状及显微鉴别,提取总DNA、扩增r DNA ITS2片段并直接测定序列,MEGA5.0软件计算种内种间Kimura 2-parameter（K2P）遗传距离并进行系统发育分析,构建邻接树（NJ）和最大简约树（MP）。结果人工沉香、商品沉香醇溶性浸出物含量均高于10%,性状和显微鉴别均符合《中国药典》（2010年版）一部有关规定。沉香种内平均K2P遗传距离为0-0.003,种间平均K2P遗传距离为0.005-0.023。白木香、人工沉香和商品沉香在系统发育树上聚为一支。结论在沉香性状、显微和理化鉴别、浸出物含量分析的基础上,基于ITS2条形码序列可以准确鉴别沉香基源植物,为商品沉香的鉴定提供分子生物学依据。; 高晓霞刘少烽陈晓东严寒静钟兆健章卫民朱爽; 关键词：ITS2

镰刀菌诱导结香对白木香倍半萜合成酶基因表达与倍半萜含量的影响研究被引量：3: 2015年; 目的研究镰刀菌诱导结香对白木香倍半萜合成酶（sesqui-TPS）表达的影响与倍半萜类化合物含量的动态变化。方法小孔滴注法进行镰刀菌诱导造香实验并割取造香前后12月内7个时间点的结香部位（沉香树脂）,采用实时荧光定量PCR法（q PCR）测定sesqui-TPS基因表达水平,气相色谱-质谱联用（GC-MS）技术分析倍半萜类化合物含量的动态变化。结果镰刀菌诱导白木香形成沉香2~12个月内sesqui-TPS基因相对表达量分别为10.85,0.793 1,6.484,611.4,5 800,4 211;人工诱导2个月前未检出倍半萜类次生代谢产物,4~12个月内共检出14个倍半萜类化合物,其相对百分含量分别为21.40%,25.52%,36.44%,32.40%和55.70%。结论镰刀菌诱导白木香结香过程中sesqui-TPS基因主要在后期响应伤害胁迫,其表达水平对促进倍半萜类成分生物合成具有滞后性,为进一步研究白木香结香过程中功能基因对萜类成分的生物合成途径调控作用奠定基础。; 陈晓东谢明容刘少烽周伟平章卫民高晓霞; 关键词：白木香倍半萜类化合物

镰刀菌诱导白木香结香部位总RNA提取方法的研究被引量：2: 2015年; 目的白木香树在自然条件下不产生树脂,以自然、微生物或人工方式可使之形成沉香树脂。＂小孔滴注法＂接种镰刀菌人工诱导白木香结香,8个月后野外采集白木香结香部位（分泌黑色树脂的树干组织）,提取其总RNA,为阐明沉香特征产物的代谢途径、揭示人工诱导白木香结香的分子机制奠定基础。方法＂小孔滴注法＂人工造香,手工割取白木香结香部位。分别采用CTAB-Li Cl法、Trizol试剂法、RN09试剂盒法、改良异硫氰酸胍-CTAB法和Qiagen试剂盒法提取总RNA并检测完整性。结果与其它四种提取方法相比,Qiagen试剂盒法提取的RNA条带清晰,OD260/OD280比值在1.8-2.0的范围内。结论 Qiagen试剂盒法适用于镰刀菌人工诱导白木香结香部位总RNA提取,对其它次生代谢物质含量较高的植物中提取总RNA具有一定的借鉴意义。; 陈晓东周伟平刘少烽陈晓颖钟兆健章卫民高晓霞; 关键词：白木香 RNA提取

SHS-GC-MS联用结合保留指数分析沉香香气成分被引量：4: 2016年; 目的建立静态顶空进样-气相色谱-质谱(SHS-GC-MS)联用技术结合保留指数(RI)分析沉香香气成分。方法以白木香、人工沉香和天然沉香为材料,采用SHS-GC-MS技术不经任何化学处理,直接加热提取香气成分进行分析,并应用自动去卷积系统结合保留指数对香气成分进行鉴定。结果天然沉香、人工沉香和白木香中共检出55种挥发性成分,主要为醛、酮、酚醇、酯、萘、烃、2-(2-苯乙基)色酮等化合物。天然沉香、人工沉香中出现7种共有成分,主要为酮类和酚醇类化合物;天然沉香独有7种成分,分别属于酚醇类、酮类和萘类化合物;人工沉香中酮类化合物含量较高,而天然沉香中含量最高的为酚醇类化合物,两者的香气成分存在明显差别。结论该法体现了人工沉香和天然沉香的香气物质基础,可为沉香品质评价提供有效、可行的方法。; 钟秋萍钟兆健陈晓东袁宁詹松高晓霞陈晓颖; 关键词：香气成分

沉香DNA的提取及其ITS2-PCR体系的优化被引量：6: 2015年; 目的:建立沉香的总DNA提取方法及r DNA第二内转录间隔区序列(ITS2)聚合酶链式反应(PCR)扩增体系。方法:分别采用改良的CTAB法、改良的CTAB法联合DNA提取试剂盒法及DNA提取试剂盒法提取沉香总DNA,利用通用引物ITS2P1/ITS2P2扩增r DNA ITS2目的片段,通过正交试验优选沉香的PCR扩增条件并对目的片段进行测序。结果:改良的CTAB法联合DNA提取试剂盒法提取总DNA的A260 nm/A280 nm1.79,质量浓度350 mg·L-1,PCR扩增目的片段产率最高。不同因素水平对沉香ITS2-PCR反应的影响顺序为模板DNA>引物>Taq DNA聚合酶>d NTP。最佳反应体系为20μL体系,DNA模板40 ng,引物0.2 mmol·L-1,d NTP 0.5 mmol·L-1,Taq DNA聚合酶1.5 U。测序获得的目前片段长度230 bp,与Gen Bank中瑞香科沉香属白木香序列相似性100%。结论:CTAB法联合DNA试剂盒法可简单、快速获得高质量沉香总DNA,正交试验可快速获得ITS2目的片段,为沉香的分子鉴定和系统发育分析提供参考。; 刘少烽陈晓东朱爽陈晓颖钟兆健章卫民高晓霞; 关键词：DNA提取 ITS2 聚合酶链式反应

天然沉香香气成分的SHS-GC-MS指纹图谱研究被引量：14: 2015年; 目的建立基于静态顶空进样-气相色谱-质谱（SHS-GC-MS）联用技术的天然沉香香气成分指纹图谱。方法以22批经《中国药典》及前期研究方法验证为天然沉香的沉香样品为材料,采用SHS-GC-MS联用技术构建天然沉香香气成分指纹图谱,并用《中药指纹图谱相似度评价（2004 A版）》软件进行数据处理;采用自动质谱退卷积定性系统（AMDIS）结合保留指数（RI）鉴定共有峰,采用主成分分析（PCA）对不同产地天然沉香进行判别分析,并将共有峰的相对峰面积与浸出物质量分数进行相关性分析。结果 22批天然沉香指纹图谱的相似度范围为0.467~0.905,经AMDIS结合RI双重定性鉴定了18个色谱峰。以全谱碎片信息和18个共有峰相对峰面积为变量分别进行PCA分析,22批天然沉香按产地均可分为2类。共有成分γ-桉叶油醇与沉香的主要评价指标——浸出物质量分数呈显著正相关。结论18个共有峰组成的香气成分指纹图谱能表达天然沉香的共有品质并区分不同产地的天然沉香,可为沉香的感官分析提供简便、快速的科学依据。γ-桉叶油醇可作为香气指纹图谱的指标性成分。; 黄欣佩樊云飞陈晓东钟兆健袁宁詹松高晓霞陈晓颖; 关键词：香气成分指纹图谱

人工诱导方法对白木香萜类相关基因表达量影响研究被引量：2: 2017年; 目的研究不同人工诱导方法对白木香结香过程中萜类相关基因表达量的影响。方法 "小孔滴注法"进行甲酸、甲酸结合镰刀菌人工诱导试验,手工割取诱导前、后12个月内的白木香结香部位,实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)测定As-HMGR、As-DXS1、As-DXS2基因表达水平。结果 As-HMGR、As-DXS1、As-DXS2回归方程分别为Y=-3.580X+40.11、Y=-3.424X+38.38、Y=-3.728X+41.84,相关系数均大于0.997,线性关系均良好。甲酸、甲酸结合镰刀菌诱导过程中,As-DXS1与As-DXS2的表达模式相近,前8个月表达水平较低,随后显著升高。甲酸诱导时,As-HMGR基因从2个月开始表达,呈现先升高后下降再升高的趋势;甲酸结合镰刀菌诱导时,初期相对表达量缓慢升高,6个月时达到峰值,随后急剧下降。人工诱导12个月As-HMGR、As-DXS1的相对表达量,甲酸诱导高于甲酸结合镰刀菌诱导(P<0.05)。结论甲酸、甲酸结合镰刀菌诱导白木香结香过程中As-HMGR基因在伤害早期响应伤害胁迫,As-DXS1、As-DXS2基因在后期响应,为进一步研究白木香萜类次生代谢产物表达与调控,改善人工沉香品质奠定基础。; 冯美柔樊云飞陈晓东周欣章卫民高晓霞; 关键词：白木香

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陈晓东

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