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腾冲嗜热厌氧菌葡萄糖激酶在不同温度下的表达和催化活性被引量：2: 2006年; 尽管在腾冲嗜热厌氧菌的基因组注释中缺乏葡萄糖激酶(Glucokinase,GLK)(EC 2.7.1.2),但是该菌的蛋白质表达谱分析表明,TTE0090可能是一种新型的葡萄糖激酶。利用体外克隆表达的方法,表达了重组TTE0090;此蛋白质不仅具备使葡萄糖磷酸化的催化活性,同时在高温下也能参与反应。采用Western blot和阴离子交换层析的方法进一步检验了TTE0090在腾冲嗜热厌氧菌体内的蛋白质表达及其催化活性,发现体内TTE0090蛋白表达量随温度的升高而降低,而酶比活力却与生长温度呈正相关。这可能预示不同温度下腾冲嗜热厌氧菌中的糖酵解途径的催化通量是相对恒定的。实验数据均表明,TTE0090是存在于腾冲嗜热厌氧菌中的一种新型的葡萄糖激酶。TTE0090基因和其蛋白产物的研究工作,将进一步加深人们对嗜热菌的温度适应性以及它们的生存机理的了解。; 钱忠王敬强周传奇马延和刘斯奇; 关键词：腾冲嗜热厌氧菌葡萄糖激酶温度糖酵解

腾冲嗜热厌氧菌6-磷酸果糖激酶的克隆、表达及其生物活性被引量：1: 2006年; 6_磷酸果糖激酶(PFK)是糖酵解途径一个关键酶。基于腾冲嗜热厌氧菌基因组中的注释,基因TTE1816可能是PFK的一种,但是,它是否确有生物活性还必须有实验数据的支持。腾冲嗜热厌氧菌在最适温度培养后,提取细菌全蛋白,并采用双向电泳将可溶性蛋白质分离,然后运用质谱鉴定若干染色斑点。实验表明,TTE1816在高温条件下能够表达蛋白质。将TTE1816基因体外克隆至细菌表达载体,并在BL_21大肠杆菌中表达为可溶性蛋白。酶动力学实验表明,重组蛋白TTE1816具有PFK的催化活性,最适反应温度在60℃。它还能够催化葡萄糖、果糖、甘露糖和6_磷酸葡萄糖的磷酸化反应。另外,在高底物浓度和酶浓度的条件下,TTE1816还表现果糖二磷酸酶的特性。结果证明,TTE1816是腾冲嗜热厌氧菌中PFK家族的一个新成员。; 周传奇王敬强钱忠马延和刘斯奇; 关键词：腾冲嗜热厌氧菌嗜热菌糖酵解

腾冲嗜热厌氧菌半乳糖激酶的鉴定以及重组表达: 半乳糖代谢的前期过程是通过所谓的Leloir途径完成的,半乳糖激酶(Galactokinase,galK)是这个代谢途径的关键酶。它催化半乳糖转变为1-磷酸半乳糖,然后进一步生成UDP-葡萄糖并融入糖酵解路径。近年来,半...; 钱忠王敬强赵彩风林梁孙海丹任艳薛艳芬马延和徐宁志刘斯奇; 文献传递

嗜碱菌Alkalimonas amylolytica N10在不同pH条件下的膜蛋白差异表达研究被引量：3: 2006年; 为了探讨嗜碱菌的嗜碱机制，对一株新型专性嗜碱菌（Alkalimonas amylolytico N10）在不同pH条件下的差异膜蛋白质组进行了初步的研究。在3种pH条件下（pH值分别为8．4、9．4和10．4）培养的该菌的膜蛋白，通过8％-20％的梯度SDS—PAGE进行分离。经胶图图像和统计计算，7条电泳条带的相对染色强度随培养液的pH值变化而改变，其中仅有一条条带强度随pH值增高而增加。这些条带经胰蛋白酶胶内消化和高效液相色谱-电喷雾离子阱串联质谱（LC—Ms／Ms）分析，共鉴定出了12种蛋白质。其中4种膜蛋白已有报道直接或间接参与细胞pH稳态的保持，其他几种蛋白则是首次发现其表达水平与生活环境的pH变化可能相关。; 王全会王敬强钱忠刘斯奇马延和; 关键词：嗜碱菌 N10 膜蛋白 LC-MS/MS

腾冲嗜热厌氧菌半乳糖激酶的催化动力学性质: 半乳糖激酶(Galactokinase,galK)催化半乳糖代谢的第一步反应,即使半乳糖磷酸化形成1—磷酸半乳糖,是完成Leloir途径的关键酶。近年来,关于半乳糖激酶的工业应用研究也正在成为其研究的重点。工程菌中的半乳...; 钱忠王敬强周传奇谢俊华徐宁志马延和刘斯奇; 文献传递

慢性酒精摄入对大鼠肝脏线粒体蛋白质组的影响: 长期饮酒导致多种疾病的发生。有研究表明,长期慢性酒精摄入能够增加咽喉部癌肿、甲状腺癌、皮肤癌、乳癌、食管癌、心肌病和慢性胃炎的发病几率。而肝脏作为酒精代谢的主要器官,其功能可能在长期酒精刺激和积累的过程中受损。据报道,酒...; 时亮王媛任艳钱忠徐宁志刘斯奇; 文献传递

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钱忠