怀晓
- 作品数：8 被引量：32H指数：3
- 供职机构：中国农业大学更多>>
- 发文基金：国家苹果产业技术体系建设专项中央高校基本科研业务费专项资金公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 苹果褪绿叶斑病毒北京分离物外壳蛋白基因的克隆和原核表达
- 根据报道的苹果褪绿叶斑病毒（Apple Chlorotic Leaf Spot Virus,ACLSV）外壳蛋白（Coat protein,CP）基因的核苷酸序列设计合成引物,利用RT-PCR方法克隆了ACLSV北京分离...
- 怀晓周颖陈善义张瑞范在丰国立耘周涛
- 文献传递
- 玉米半胱氨酸蛋白酶在甘蔗花叶病毒侵染过程中作用的初步研究
- 怀晓
- 关键词：半胱氨酸蛋白酶甘蔗花叶病毒亚细胞定位
- 苹果潜隐病毒分子检测体系的建立
- 苹果褪绿叶斑病毒(Apple chlorotic leaf spot virus, ACLSV)、苹果茎沟病毒(Apple stem grooving virus, ASGV)、苹果茎痘病毒(Apple stem pit...
- 陈善义周颖张瑞怀晓范在丰国立耘周涛
- 苹果潜隐病毒分子检测体系的建立
- 苹果褪绿叶斑病毒（Apple chlorotic leafspot virus,ACLSV）、苹果茎沟病毒（Apple stem grooyingvirus,ASGV）、苹果茎痘病毒（Apple stempitting ...
- 陈善义周颖张瑞怀晓范在丰国立耘周涛
- 文献传递
- 樱桃病毒A北京分离物外壳蛋白的原核表达及抗血清制备被引量：7
- 2010年
- 根据前期研究获得的樱桃病毒A北京分离物(Cherry virus Aisolate Beijing,CVA-BJ)外壳蛋白基因序列设计引物,将此基因克隆到原核表达载体pET-28a后转化大肠杆菌BL21(DE3),以终浓度为1 mmol/L的IPTG进行诱导表达。Ni珠吸附法纯化表达产物后免疫家兔制备抗血清。间接ELISA测得抗血清效价为1∶2048。以纯化后的蛋白和樱桃叶片总蛋白为检测材料,Western blot分析表明抗血清具有高度特异性。间接ELISA方法检测樱桃病叶,结果呈阳性,与RT-PCR检测结果一致。表明制备的抗血清可用于感病樱桃样品中CVA的检测。
- 郭颂张福兴怀晓周颖张瑞范在丰周涛
- 关键词：间接ELISA脱毒苗
- 苹果褪绿叶斑病毒北京分离物外壳蛋白基因的克隆和原核表达
- 根据报道的苹果褪绿叶斑病毒(Apple Chlorotic Leaf Spot Virus, ACLSV)外壳蛋白(Coat protein,CP)基因的核苷酸序列设计合成引物,利用RT-PCR方法克隆了ACLSV北京分...
- 怀晓周颖陈善义张瑞范在丰国立耘周涛
- 苹果茎沟病毒外壳蛋白基因的克隆、原核表达及抗血清制备被引量：9
- 2010年
- 利用原核系统表达病毒编码的结构蛋白为抗原制备多克隆抗体是提高检测灵敏度和降低检测成本的重要途径。根据已报道的苹果茎沟病毒Apple stem grooving virus（ASGV）外壳蛋白（coatprotein,CP）基因的核苷酸序列设计合成引物,利用RT-PCR方法克隆了ASGV的cp基因（命名为ASGV cp BJ）,该基因由714个核苷酸组成,与GenBank中已报道的ASGV的cp基因核苷酸相似性为86%~96%。将ASGV的cp基因克隆到原核表达载体pET-28a上,转化大肠杆菌BL21（DE3）,筛选得到阳性克隆pET-ASGVcp。SDS-PAGE电泳分析发现,经IPTG诱导,ASGVcp在大肠杆菌中得到高效表达,获得的融合蛋白的分子量约为33kD。利用Ni珠吸附法纯化原核表达的目的蛋白,并以此蛋白为抗原制备了抗血清,ACP-ELISA检测结果显示,此抗血清效价为1∶4 096。Western blot分析结果显示,该抗血清具有高度特异性,能够用于ASGV的快速检测。
- 怀晓周颖张瑞范在丰周涛
- 关键词：潜隐病毒WESTERNBLOT
- 北京地区地黄花叶病病原的分子鉴定被引量：16
- 2010年
- 为明确北京地区发生的地黄花叶病的病原,在进行生物学接种分离纯化的基础上利用RT-PCR方法对其进行了分子鉴定。通过接种指示植物和进行单斑分离,获得了病毒的纯分离物。经RT-PCR和序列测定及分析,有明显花叶症状的北京地黄样品受黄瓜花叶病毒Cucumber mosaic virus（CMV）和蚕豆萎蔫病毒2Broad bean wilt virus2（BBWV2）复合侵染。为进一步明确BBWV2地黄分离物（BBWV2-Rg）的分类地位,克隆了BBWV2-Rg RNA2多聚蛋白基因,并进行了序列测定和分析,结果表明该多聚蛋白基因由3 195个核苷酸组成,编码1 064个氨基酸。经序列比对分析,BBWV2-Rg编码的外壳蛋白大亚基LCP基因和小亚基SCP基因核苷酸序列与已发表的BBWV2其它株系相应基因核苷酸序列的同源性分别为78.69%~89.30%和76.99%~90.52%,氨基酸序列同源性分别为91.29%~97.51%和87.82%~96.45%。
- 周颖张瑞郭颂怀晓范在丰周涛
- 关键词：黄瓜花叶病毒系统进化树
