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表达rhTNFR-Fc的CHO细胞的氨基酸代谢特征及氨基酸流加培养工艺研究: 2008年; 为提高表达重组人肿瘤坏死因子受体-Fc融合蛋白(rhTNFR-Fc)的CHO工程细胞的培养密度和目的蛋白表达,研究了葡萄糖和谷氨酰胺流加-批式培养工艺的细胞氨基酸代谢特征及游离氨基酸和大豆蛋白水解物的补加策略。通过补加葡萄糖和谷氨酰胺浓缩液分别维持其浓度为10 mmol/L和2 mmol/L左右,在不同阶段定期补加特定的氨基酸浓缩液或大豆蛋白水解物补充氨基酸消耗,检测细胞培养上清中rhTNFR-Fc的表达。谷氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、脯氨酸等4种非必需氨基酸快速消耗,是CHO工程细胞增殖和目的蛋白表达的限制性底物。以游离氨基酸、游离氨基酸合并大豆蛋白水解物补充氨基酸消耗可分别使细胞生长密度提高50%、100%,目的蛋白表达增加60%、125%,培养时程延长44%、66%,同时葡萄糖比消耗率、乳酸比生成率降低,谷氨酰胺的利用效率提高。; 唐治华应跃斌江海燕黄敏芬罗家立陈枢青; 关键词：氨基酸代谢

高效亲和色谱法检测细胞培养上清中的抗体融合蛋白质被引量：5: 2007年; 目的建立高效亲和色谱检测抗体融合蛋白质的方法，用于抗体及抗体融合蛋白质生产的过程控制。方法正压匀浆法装填rProtein A Sepharose，用不同pH值缓冲液分步洗脱。结果在25～1000μg／mL浓度范围内，重组人肿瘤坏死因子受体一抗体融合蛋白（TNFR—Fc）浓度和峰面积显著相关，r=0.9996；回收率范围为91％～99％，对表达TNFR—Fc的CHO工程细胞的不同培养阶段的3份上清分别进行3次重复测定，RSD在2％以内。结论该方法适用于抗体及抗体融合蛋白质生产的过程控制。; 唐治华应跃斌黄敏芬罗家立陈枢青; 关键词：抗体过程控制

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唐治华