吴金青
- 作品数:1 被引量:20H指数:1
- 供职机构:中山大学生命科学学院有害生物控制与资源利用国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 应用SSA报告载体提高ZFN和CRISPR/Cas9对猪IGF2基因的打靶效率被引量:20
- 2015年
- IGF2(Insulin-like growth factor 2)基因作为最复杂多样的生长因子之一,对猪胎儿发育以及出生后生长发育和肌肉生成起着非常重要的作用。通过基因组编辑技术对我国本地猪种的IGF2基因作精确的遗传修饰,对于提高本地猪种的瘦肉率具有重要的育种意义。文章在蓝塘猪胎儿成纤维细胞(Porcine fetal fibroblasts,PEF)中检测了锌指核酸酶(Zinc finger nucleases,ZFN)和CRISPR/Cas9对IGF2基因的打靶效率,结果表明CRISPR/Cas9对IGF2基因的切割效率最高可达9.2%,显著高于ZFN的切割效率(<1%),但两者均未达到作为体细胞核移植(Somatic nuclear transfer,SCNT)供体细胞所需的打靶效率。应用SSA(Single-strand annealing)报告载体筛选技术来富集IGF2基因被ZFN和CRISPR/Cas9修饰过的PEF细胞,结果表明,该技术可使CRISPR/Cas9的打靶效率提高5倍左右,对ZFN的打靶效率具有更大的增强作用。
- 吴金青梅瑰刘志国陈瑶生丛佩清何祖勇
- 关键词:IGF2基因