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重组人溶菌酶酵母工程菌的构建和活性干粉制备: 溶菌酶是一种能水解致病菌细胞壁的碱性蛋白质，具有抗菌消炎和增强免疫力等功效，在临床和食品保鲜方面具有较大应用价值。已知的溶菌酶根据来源不同可分为三类:鸡卵清溶菌酶（c型）、鹅卵清溶菌酶（g型）和噬菌体溶菌酶，其中人溶菌酶...; 齐小雨; 关键词：人溶菌酶毕赤酵母胞内表达; 文献传递

人溶菌酶重组酵母工程菌的构建和活性干粉的制备被引量：6: 2016年; 本试验旨在构建一种胞内表达人溶菌酶的新型酵母工程菌,并利用其高蛋白、富含溶菌酶的特点开发新型动物饲料添加剂,避免直接使用人溶菌酶制剂带来的高成本、活性不稳定等问题。将来自胎盘的人溶菌酶h LYZ基因克隆至表达载体p PICZA上,验证后的重组载体电转化至X-33毕赤酵母中,经标准培养基BMGY/BMMY培养、甲醇诱导表达后,检测蛋白表达活力和人溶菌酶活力。在此基础上,以麦芽汁-蚕蛹为培养基,通过单因素试验和正交试验来优化培养基成分和摇瓶发酵条件。结果表明,人溶菌酶基因在重组酵母工程菌中成功表达且酶活力为1 920 U。以麦芽汁和蚕蛹浸提物为碳氮源,测得蚕蛹浸提物占40%并且营养盐含量为170μg/ml时最适合菌体生长。正交试验测得R值的大小为:生长阶段p H值>诱导阶段甲醇含量>接种量,最佳摇瓶发酵条件是生长阶段p H值为6,诱导阶段甲醇添加量为1%,接种量为3%。经发酵培养的新型酵母工程菌利用真空冷冻干燥技术制成干粉,活菌数为1 ml 1×109个,溶菌酶活性为1 320 U。上述研究结果为新型饲料添加剂的开发和利用奠定了基础。; 齐小雨陈熙张炜; 关键词：人溶菌酶毕赤酵母胞内表达

一种溶菌酶饲料添加剂的制备方法及应用: 本发明公开了一种溶菌酶饲料添加剂的制备方法及应用。该制备方法包括以下步骤：(1)在麦芽汁‑蚕蛹粉基础生长培养基/麦芽汁高温浸提液培养基中发酵含人溶菌酶胞内表达载体的毕赤酵母X‑33工程菌，甲醇诱导表达48h后，收集酵母菌...; 张炜陈熙齐小雨; 文献传递

人溶菌酶定点突变基因在毕赤酵母中的表达及活性分析被引量：3: 2014年; 利用PCR法将人溶菌酶(h LYZ)成熟肽与载体信号肽连接处的氨基酸残基进行定点突变,突变基因亚克隆至酵母分泌型表达载体p PICZαA,重组载体线性化后通过电击转化法转化巴斯德毕赤酵母X-33,利用含Zeocine抗生素的YPDS平板筛选高拷贝转化子。转化子酵母经甲醇诱导后取培养基离心上清液进行SDS-PAGE和活性检测。结果显示,突变体h LYZ活力和表达量较野生型均有显著提高。表明定向改变h LYZ信号肽残基性质可以提高其表达量和分泌效率。; 陈熙陈毓齐小雨张炜; 关键词：人溶菌酶巴斯德毕赤酵母信号肽定点突变

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齐小雨