王雅楠
- 作品数:13 被引量:7H指数:2
- 供职机构:吉林大学更多>>
- 发文基金:转基因生物新品种培育专项国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生一般工业技术生物学更多>>
- 水稻胚乳表达的H9N2亚型禽流感病毒血凝素蛋白免疫原性研究及B细胞表位的鉴定
- H9N2亚型禽流感病毒(AIV)是一种低致病性A型流感病毒,属于正黏病毒科,流感病毒属的成员。H9N2 AIV在全世界广泛流行并造成巨大的经济损失。由于其宿主的广谱性,禽传人的趋势和快速的抗原变异而引起越来越多的关注。此...
- 王雅楠
- 关键词:黏膜免疫
- H5N1亚型禽流感病毒HA蛋白在水稻胚乳中的表达及其纯化
- 2024年
- 为制备H5N1亚型禽流感病毒HA蛋白并评估其免疫原性,利用水稻表达系统表达H5N1亚型禽流感病毒重组HA蛋白。首先构建了重组植物表达载体pCAMBIA1300-HA,该载体具有GT13特有启动子、信号肽SP和终止子,有利于外源基因在水稻中表达。之后将重组质粒pCAMBIA1300-HA通过电转化法导入根癌农杆菌EHA105中,筛选出阳性菌落并侵染水稻愈伤组织。经过暗培养、潮霉素筛选、分化、生根、成苗,采用CTAB法提取水稻叶片DNA,PCR鉴定结果显示,HA基因已插入到水稻基因组中,重组HA基因大小为4660 bp。将阳性植株移植到大田中,4个月后收获水稻种子,提取水稻胚乳蛋白,Western blot鉴定结果表明,HA蛋白在水稻胚乳中成功表达。重组HA蛋白通过Q阴离子层析、疏水层析和凝胶过滤层析三步分离纯化,其纯度达到90%以上。最后将纯化后的重组HA蛋白与ISA 50V佐剂混合并乳化制成疫苗,免疫小鼠,小鼠血清具有较高的特异性抗体水平,表明重组HA蛋白免疫原性较好。综上,成功构建了H5N1亚型禽流感病毒HA重组蛋白的水稻表达系统,并分离纯化获得了高纯度和免疫原性良好的重组HA蛋白。
- 屈小天王雅楠许倩茹李雪洋张申立张二芹张改平
- 关键词:H5N1亚型禽流感病毒HA蛋白蛋白质纯化
- 异质元素掺杂Co9S8的电催化析氧性能研究
- 随着社会经济的快速发展以及人类对化石燃料日益增长的需求,能源危机成为全世界人民普遍关注的问题。由于传统化石燃料是不可再生的一次资源且含量有限,因此可再生的新型能源的开发与利用,对于实现可持续发展、改善人类赖以生存的环境都...
- 王雅楠
- 关键词:电催化
- 禽流感病毒H9N2亚型HA蛋白在水稻胚乳中的稳定、高效表达及活性鉴定被引量:4
- 2020年
- 为了在体外获得表达量高、储存容易、成本低且免疫活性高的H9N2亚型HA蛋白,利用水稻胚乳表达系统表达HA蛋白。首先,将HA基因根据水稻偏好密码子进行优化,合成到pUC57载体上,通过双酶切、连接将HA基因先后构建到中间载体pMP3和植物表达载体pCAMBIA1300上;再通过电极法将pCAMBIA1300-HA导入到根癌农杆菌EHA105中;然后用农杆菌侵染TP309水稻愈伤组织;最后经潮霉素筛选、分化、生根、移栽至田间种植。利用CTAB法提取叶片基因组DNA,PCR鉴定T0阳性植株;利用Dot Blot和Western Blot检测HA蛋白在水稻胚乳中的表达;提取阳性的T1叶片DNA,通过荧光定量PCR方法筛选纯合植株;利用温汤杀雄剪颖授粉法,将含有HA蛋白的TP309与低谷蛋白水稻杂交;利用Western Blot检测杂交后的T3植株蛋白表达量;利用双抗夹心ELISA方法比较水稻源和昆虫表达HA蛋白的活性。结果显示,成功构建了中间载体pMP3-HA和植物表达载体pCAMBIA1300-HA,且pCAMBIA1300-HA成功导入到根癌农杆菌EHA105中;PCR检测到有66株植株的HA基因成功整合到水稻基因组;Dot Blot和Western Blot检测结果表明,HA蛋白在水稻胚乳中成功表达;利用荧光定量PCR方法,107株T1中筛选到31株纯合植株;Western Blot检测结果表明,杂交后的HA蛋白表达量大幅度提高;双抗夹心ELISA结果证实,水稻胚乳表达的HA蛋白的活性高于杆状病毒-昆虫细胞。
- 赵翔玥张二芹许倩茹马凡舒王雅楠牛香香李雪洋张申立张同旭邓瑞广张以芳张改平
- 关键词:禽流感病毒H9N2HA蛋白纯合子水稻胚乳活性鉴定
- 飞秒激光诱导正向转移有机薄膜的相变及图案化研究
- 有机发光材料具有种类丰富、材料易得和环境友好等优点,被广泛应用于显示领域。以有机发光材料为核心的有机电致发光器件(OLED)近些年发展迅速。和传统液晶显示相比,OLED显示具有柔性可弯折、高分辨率以及高亮度的优点,从而被...
- 王雅楠
- 关键词:有机电致发光器件
- 联苯三羧酸配体金属有机骨架材料的合成及荧光性质研究
- 近年来,随着工业化进程的迅猛发展,硝基芳香类有机分子(NACs)的使用逐渐增加,给环境和安全等领域带来了日益严峻的挑战。面对这一挑战,人们不断开发新材料,以实现高效便捷的检测与预防。在人们开发出的众多检测方法和检测材料中...
- 王雅楠
- 关键词:稀土金属溶剂热合成金属有机骨架材料荧光检测
- 一例山羊新孢子虫病的临床观察及病原分离和鉴定
- 2016年,本实验室在进行“宿主胞外诱捕网抗新孢子虫感染”的课题研究过程中,在松原地区购买了9只成年山羊作为分离中性粒细胞的供血动物,其中一只山羊外周血中分离得到的中性粒细胞,在光学显微镜下观察到疑似半月牙形结构,但当时...
- 王雅楠
- 关键词:山羊新孢子虫巢式PCR
- 文献传递
- 一种有机发光分子薄膜相变过程的激光调控方法
- 本发明公开了一种有机发光分子薄膜相变过程的激光调控方法,属于光电器件制备技术领域,包括步骤一:施主衬底和目标衬底的预处理;步骤二:有机发光分子薄膜相变过程的激光调控;该方法通过激光作用于有机分子的过程提供了分子处于液态或...
- 冯晶王雅楠刘岳峰梁书语
- 犬新孢子虫对小鼠神经小胶质细胞活性的影响
- 2017年
- 通过ELISA测定犬新孢子虫感染对小胶质细胞中细胞因子TNF-α、iNOS、IL-10和Arg-1的影响,鉴定小胶质细胞的活性;用Western blot检测分析犬新孢子虫对小胶质细胞中PPARγ/NF-κB信号通路的影响;探讨犬新孢子虫感染对小胶质细胞活性的影响及机制。结果表明:犬新孢子虫感染5d后,小胶质细胞中IL-10和Arg-1的表达显著升高(P<0.01),TNF-α和iNOS的表达显著降低(P<0.01)。PPARγ抑制剂GW9662预处理后,结果则与其相反。同时,犬新孢子虫感染后,能够上调PPARγ的活性,降低p65的磷酸化水平。犬新孢子虫感染能够激活PPARγ/NF-κB信号通路诱导小胶质细胞活性的变化。
- 和学秀王雅楠杨正涛宫鹏涛李建华张西臣
- 关键词:新孢子虫小胶质细胞PPARΓNF-ΚB
- 兼具GPx2和ApSOD活性抗氧化酶的真核表达及活性研究
- 活性氧(ROS)是机体生理代谢的产物,不同浓度的ROS可对机体产生有益或有害的影响。正常生理状态下,ROS的产生和消除处于动态平衡状态,从而维持机体氧化和抗氧化的相对平衡。然而,随着生态恶化、环境污染及现代化生活不规律的...
- 王雅楠
- 关键词:谷胱甘肽过氧化物酶双功能酶真核表达
- 文献传递