邓梦阳
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：第三军医大学新桥医院更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肝细胞生长因子基因转染后对内皮祖细胞增殖、迁移、分泌一氧化氮及血管再生的影响
- 目的本研究拟用肝细胞生长因子(HGF)基因修饰内皮祖细胞(EPC),以观察其对EPC增殖、迁移、分泌一氧化氮(NO)及生血管能力的影响。方法采用梯度离心法分离并培养大鼠骨髓EPC,荧光DiI标记乙酰化低密度脂蛋白(DiI...
- 宋明宝黄岚于学军朱光旭张坡康华利邓梦阳
- 文献传递
- 肝细胞生长因子基因转染后对内皮祖细胞增殖、迁移、分泌一氧化氮及血管再生的影响被引量：1
- 2007年
- 目的:本研究拟用肝细胞生长因子(HGF)基因修饰内皮祖细胞(EPCs),以观察其对 EPCs 增殖、迁移、分泌一氧化氮(NO)及生血管能力的影响。方法:采用梯度离心法分离并培养大鼠骨髓 EPCs,荧光 DiI 标记乙酰化低密度脂蛋白(DiI-acLDL)摄取和异硫氰酸荧光素标记的荆豆凝集素(FITC-UEA-I)结合荧光双染法鉴定大鼠 EPCs。细胞分为 HGF 转染组、阴性对照组及空白对照组,HGF 组用脂质体介导法导入 pIRES2-EGFP-HGF 质粒,阴性对照组导入 pIRES2-EGFP 质粒,空白对照组不导入质粒,然后用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的合成及逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测细胞 HGF mRNA 的表达来鉴定转染的 EPCs。用四唑盐(MTF)法、改良的 Bodyen 小室及硝酸盐还原法观察细胞增殖、移行及分泌 NO 能力;体外成管试验用于分析细胞生血管的能力。结果:原代细胞培养4天后发现可成梭形贴壁细胞,7天后细胞成集落状,原代细胞培养21大左右接近融合并呈典型的鹅卵石样排列,细胞 DiI-LDL 摄取试验阳性,FITC-UEA-I 染色阳性。转染18h 后 HGF 转染组及阴性对照组细胞绿色荧光蛋白检测呈阳性,转染率为40%,而空白组则呈阴性。RT-PCR 结果显示,HGF 转染组细胞内 mRNA 的表达显著高于对照组,而空白对照及阴性对照组 HGF mRNA 表达无显著性差异。HGF 转染组细胞增殖、移行能力及分泌 NO 量均显著高于对照组。在 ECMatrix 培养基上培养12h,HGF 转染组体外成管评分显著高于对照组。结论:HGF 基因修饰能够显著提高 EPCs 增殖、移行、分泌 NO 及生血管能力,改善 EPCs 的生物学功能。
- 宋明宝黄岚于学军朱光旭张坡康华利邓梦阳
- 关键词：内皮祖细胞肝细胞生长因子基因转染
