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褚亚芬
作品数:
1
被引量:3
H指数:1
供职机构:
中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心
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发文基金:
中国综合性艾滋病研究项目
国家重点基础研究发展计划
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
彭虹
中国疾病预防控制中心性病艾滋病...
刘强
中国疾病预防控制中心性病艾滋病...
段丹丽
中国疾病预防控制中心性病艾滋病...
杨贵波
中国疾病预防控制中心性病艾滋病...
邢辉
中国疾病预防控制中心性病艾滋病...
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作者
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褚亚芬
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中国艾滋病性...
年份
1篇
2006
共
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运用实时荧光定量RT-PCR和ELISA方法定量检测SHIV的对比分析
被引量:3
2006年
目的 建立一种实时、灵敏、特异的针对人/猴免疫缺陷病毒(SHIV)的RNA载量检测方法,通过与酶联免疫吸附试验(ELISA)进行比较,成为监测SHIV病毒体外复制过程的常用方法。方法 体外转录制备RNA标准品,利用TaqMan EZ逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)试剂盒的反应体系和针对SHIVgag保守区91个碱基的Taq—Man探针与引物,建立一步法实时荧光定量RT—PCR。三种SHIV感染性分子克隆体外转染293T细胞,在不同的时间点采样,通过实时荧光定量RT—PCR和ELISA两种方法监测SHIV病毒复制过程。结果两种方法监测的病毒复制过程基本一致,转染后2~48小时病毒复制出现明显的对数生长期,之后进入平台期,p24浓度大约100pg/ml,而RNA载量大约在100拷贝/ml。两者具有很好的相关性(r^2=0.834;P〈0.001)。实时荧光定量RT+PCR灵敏度更高,检测范围更广,费用更低。结论 所建立的一步法检测SHIV病毒载量的实时荧光定量RT—PCR方法,可以作为监测SHIV体外扩增的常用方法。
刘强
杨贵波
褚亚芬
段丹丽
彭虹
邢辉
邵一鸣
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