王凤丽
- 作品数：6 被引量：8H指数：2
- 供职机构：扬州大学兽医学院更多>>
- 发文基金：江苏高校优势学科建设工程资助项目江苏省教育厅自然科学基金江苏省高等学校大学生实践创新训练计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 伏马毒素B_1单克隆抗体的研制及ELISA检测方法的建立被引量：1
- 2016年
- 为了制备伏马毒素B1（FB1）单克隆抗体,建立针对FB1快速、简便、灵敏的检测方法,试验用戊二醛一步法分别偶联FB1与BSA和OVA作为免疫原和检测原,5次免疫后取脾细胞与SP2/0融合。结果表明：共筛选出2株能稳定分泌抗FB1单克隆抗体杂交瘤细胞,选取其中1株5F5杂交瘤细胞制备小鼠腹水,所制腹水效价达到1∶256000,其半数抑制浓度（IC50）为6.1ng/mL,检测下限（LOD）低于0.05ng/mL。回收率在84.20%-102.60%之间,变异系数为2.48%-8.79%。制备的单克隆抗体对FB1抑制率为100%,与呕吐毒素（DON）、玉米赤霉烯酮（ZEN）、黄曲霉毒素B1（AFB1）、α-玉米赤霉烯醇（α-ZOL）等基本无交叉反应。
- 范文桐项自来徐辉王光光王冰洁蔡国栋王凤丽顾建红袁燕刘学忠刘宗平卞建春
- 关键词：单克隆抗体杂交瘤间接竞争ELISA
- α-玉米赤霉烯醇单克隆抗体的研制及CiELISA检测方法的建立
- 2017年
- 为了建立快速、简便、灵敏的检测动物性食品中α-玉米赤霉烯醇(α-Zearalenol,α-ZOL)残留的方法,试验利用活性酯法将α-ZOL与牛血清白蛋白(BSA)、卵清白蛋白(OVA)偶联鉴定后常规免疫6~8周龄的雌性BALB/c小鼠。经筛选,获得1株稳定分泌抗α-ZOL单克隆抗体的杂交瘤细胞(1D4),利用1D4获得的抗α-ZOL单克隆抗体建立了检测α-ZOL的间接竞争酶联免疫吸附试验(Ci ELISA)方法。结果表明:该检测方法在1~1 000 ng/m L范围内线性良好,标准曲线方程为y=0.280 2x+0.025 6(R2=0.990 1),半数抑制浓度为76.32 ng/m L。牛奶加标回收试验显示,α-ZOL的回收率在81.29%~117.53%之间,变异系数在4.42%~9.33%之间。试验建立的Ci ELISA检测方法可用于牛奶中α-ZOL残留的定量检测。
- 王光光王冰洁卞晓娇范文桐项自来蔡国栋王凤丽顾建红袁燕刘学忠刘宗平卞建春
- 关键词：单克隆抗体
- ZEA、DON及其联合染毒对CTLL-2细胞因子分泌的影响被引量：5
- 2017年
- 为研究镰刀菌毒素玉米赤霉烯酮(ZEA)、脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)及其联合作用对动物免疫功能的影响,试验以CTLL-2细胞(细胞毒性T淋巴细胞株)为材料,用不同浓度的ZEA(0、5、10、20μg/mL)、DON(0、0.5、1、2μg/mL)及联合(空白组、5μg/mL ZEA、0.5μg/mL DON、5μg/mL ZEA+0.5μg/mL DON)处理CTLL-2细胞48h,采用ELISA法检测了细胞内及培养上清液中颗粒酶B(GZMB)、穿孔素(PFP)、干扰素γ(IFN-γ)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)等细胞因子的含量。结果显示,ZEA、DON能够降低CTLL-2细胞胞内及培养上清液中PFP、GZMB、IFN-γ的浓度,增加TNF-α浓度,染毒组与对照组相比均有显著或极显著差异(P<0.05;P<0.01),且均呈剂量效应关系;ZEA、DON联合染毒表现为加性效应。结果表明,ZEA、DON及其联合作用可通过影响免疫细胞因子的分泌,降低免疫细胞杀伤活力,间接影响机体体液免疫和细胞免疫的负调节,从而导致动物机体免疫机能下降。
- 蔡国栋潘顺叶王凤丽邹辉顾建红袁燕刘学忠刘宗平卞建春
- 关键词：玉米赤霉烯酮脱氧雪腐镰刀菌烯醇细胞因子
- 慢性饮水染镉对大鼠血液及睾丸中某些酶活性的影响
- 2017年
- 为了探讨慢性饮水染镉(Cd)对大鼠血液、睾丸中某些酶活性的影响,试验将30只近交系SD大鼠(雄性,170 g左右)随机分成5组,即对照组、试验1组、试验2组、试验3组、试验4组,分别饮用Cd(Cd Cl2)质量浓度为0,25,50,100,200 mg/L的饮水。56 d后宰杀大鼠,测定血液中和睾丸中镉的蓄积量及碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶同工酶-X(LDH-X)、酸性磷酸酶(ACP)、乳酸脱氢酶(LDH)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)、山梨醇脱氢酶(SDH)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、γ-L-谷氨酰转肽酶(GGT)活性。结果表明:与对照组相比,试验1组大鼠血浆LDH活性降低;血浆AST和ALT活性的剂量效应不规律,试验2组有降低现象,而且均只有试验4组显著升高(P<0.05)。与对照组相比,试验2组睾丸中ALP活性显著降低(P<0.05);试验3组中,除LDH-X和ACP外,其他酶活性均显著降低(P<0.05);试验4组各酶活性均显著降低(P<0.05)。慢性饮水染镉,睾丸中某些酶活性的改变较血液中敏感,睾丸中LDH和ALP可以作为反映慢性饮水染镉雄性生殖毒性较敏感的生化指标。
- 王光光蔡国栋王冰洁范文桐项自来王凤丽顾建红袁燕刘学忠刘宗平卞建春
- 关键词：镉(CD)睾丸饮水
- 脱氧雪腐镰刀菌烯醇诱导CTLL-2细胞凋亡的信号途径研究被引量：3
- 2016年
- 为探讨脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)对动物免疫功能的影响及其机理,以细胞毒性T淋巴细胞株CTLL-2为材料,用不同浓度的DON(0、0.5、1、2μg/m L)处理CTLL-2细胞48h,流式细胞术检测细胞的凋亡率,免疫印记法检测细胞凋亡相关通路蛋白CleavedCaspase 9、Cleaved-Caspase 3、Fas L、Fas、Cleaved-Caspase8等表达情况;并用流式细胞术检测了DON(1μg/m L)与Fas L中和抗体(10μg/m L)共处理后细胞的凋亡率。结果表明,随着DON浓度的升高,CTLL-2细胞的凋亡率呈上升趋势,染毒组均较对照组有极显著差异(P<0.01);Bax/Bcl-2的比值升高,呈剂量-效应关系;DON促进细胞色素c(Cyt-c)从线粒体中释放到胞浆中,能够上调Cleaved-Caspase 9、Cleaved-Caspase 3的表达,染毒组均较对照组有显著性或极显著差异(P<0.05或P<0.01);Fas L、Fas、Cleaved-Caspase 8蛋白表达量随着DON浓度的升高逐渐增加,染毒组均较对照组有显著性或极显著差异(P<0.05或P<0.01);随着DON浓度的升高,p38 MAPK、JNK、Erk的磷酸化水平也升高,呈剂量-效应关系;与DON处理组相比,Fas L中和抗体与DON共同处理组细胞凋亡率明显下降(P<0.01)。结果表明,DON可以诱导CTLL-2细胞发生凋亡,激活CTLL-2细胞线粒体通路、MAPKs通路,DON通过死亡受体途径诱导CTLL-2细胞凋亡,影响动物的免疫机能。
- 李茜岑雪潘顺叶王冰洁王凤丽邹辉袁燕顾建红刘学忠刘宗平卞建春
- 关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇免疫功能凋亡通路
- β-玉米赤霉烯醇单克隆抗体的研制及CiELISA检测方法的建立
- 2020年
- 为建立一种针对β-玉米赤霉烯醇(β-ZOL)快速准确的检测方法,笔者用活性酯法将β-ZOL与牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)偶联合成人工完全抗原,纯化鉴定后免疫BALB/c小鼠。经筛选最终获得1株稳定分泌抗β-ZOL抗体的细胞株1F5。利用该抗体建立检测β-ZOL的间接竞争酶联免疫吸附试验(CiELISA)方法。结果显示,β-ZOL的药物抑制标准曲线在浓度为5~500 ng/m L时线性关系良好,标准曲线方程为y=0.406 3x-0.204 2(R^2=0.990 4),IC_(50)为53.19 ng/m L,检测下限(LOD)为6 ng/m L。该单克隆抗体对β-ZOL的抑制率为100%,与α-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉烯酮、β-雌二醇、呕吐毒素、伏马毒素等基本无交叉反应。牛奶样品β-ZOL添加回收试验显示,β-ZOL的回收率为91.24%~110.07%,变异系数为6.17%~8.73%。说明建立的检测β-ZOL的CiELISA方法稳定可靠。
- 朱根生王凤丽夏苏干原俊朝邹辉邹辉顾建红袁燕刘学忠刘宗平
- 关键词：单克隆抗体
