宋庆凤
- 作品数：3 被引量：22H指数：3
- 供职机构：东北农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程更多>>
- 重组木聚糖酶的安全高效表达与应用研究被引量：5
- 2011年
- 以pPIC9为载体能够实现里氏木霉木聚糖酶基因(xyn2)在巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)中的高效表达,但是却需要甲醇诱导,从而限制其在食品加工等领域的应用。本研究以毕赤酵母组成型启动子——GAP启动子替换pPIC9上的甲醇诱导型启动子AOX,成功地表达了木聚糖酶。在此基础上以经密码子优化后的INU信号肽替换载体上原有的α-Factor信号肽,同时根据已发表的基因序列和AOX1基因的氨基酸序列,按照毕赤酵母的酵母偏爱密码子,对毕赤酵母表达载体pPIC9上的α信号肽序列进行改造,结果表明,两种信号肽均能够引导木聚糖酶的分泌。通过添加0.01%的Triton,可以有效增强细胞膜的通透性,提高外源蛋白的分泌能力。薄层层析结果表明,木聚糖酶的酶解产物为木二糖和木三糖为主的低聚木糖及少量的木糖。
- 暴立娟宋庆凤李杰
- 关键词：低聚木糖
- 乳糖酶及其基因工程研究进展被引量：7
- 2008年
- 人体内乳糖酶缺乏造成乳糖不耐受,在乳和乳制品中添加乳糖酶是解决乳糖不耐受的主要方法。而传统的乳糖酶工业生产方法已经不能满足快速增长的需求。通过基因工程方法大规模生产安全、高纯度的乳糖酶将是未来乳糖酶生产的主要方式。对乳糖酶及其性质进行了简要介绍,在此基础上介绍了基因工程技术生产乳糖酶的研究现状和发展前景,为乳糖酶的研究和生产开拓了思路。
- 仲伟麒宋庆凤程涛李杰
- 关键词：乳糖酶基因工程乳糖不耐受
- 新型毕赤酵母分泌表达载体的构建与功能验证被引量：10
- 2009年
- 巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)是目前应用最广泛的外源蛋白表达系统之一。用于毕赤酵母表达系统的表达载体种类繁多,却因需要甲醇诱导表达或者基因转化过程中引入抗生素基因而限制了其在食品行业中的应用。研究设计以毕赤酵母组成型启动子-GAP启动子替换毕赤酵母表达载体pPIC9上的甲醇诱导型启动子AOX,成功构建了毕赤酵母组成型表达载体pGAPHα。并以里氏木霉木聚糖酶基因xyn2为报告基因进行功能验证,结果表明,该载体可实现xyn2基因在毕赤酵母中的高效表达。在此基础上以经密码子优化后的克鲁维酵母菊粉酶基因信号肽INU替换载体上原有的α-Factor信号肽,结果表明,INU信号肽能够有效引导XYNII的分泌。
- 宋庆凤暴立娟李杰
- 关键词：毕赤酵母GAP启动子
