赵英杰
- 作品数：8 被引量：23H指数：3
- 供职机构：安徽医科大学临床药理研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家级大学生创新创业训练计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 诱导多能干细胞来源间充质干细胞对大鼠骨关节炎的治疗作用被引量：8
- 2019年
- 目的研究诱导多能干细胞来源间充质干细胞(iPSC-MSCs)对大鼠骨关节炎(OA)的治疗作用。方法采用Hulth法建立大鼠OA模型,编号后运用Excel表格随机分组功能将其分为模型组、iPSC-MSCs组、人脐带来源间充质干细胞(hUC-MSCs)组、玻璃酸钠(HA)阳性对照组,另设假手术组作为对照,每组10只。除HA组动物多次给药(每周1次,共给药5次)外,其它各组均单次给药,每次每只动物在术侧关节腔注射50μL药物iPSC-MSCs和hUC-MSCs,假手术组和模型组同法给予生理盐水。给药5周后处死动物,观察iPSC-MSCs对关节直径差值、关节腔结构及评分、关节面评分、病理学评分等指标的影响;检测膝关节基质金属蛋白酶(MMP)-13、Ⅱ型胶原(CollagenⅡ)及解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS)-5表达情况。结果 iPSCMSCs和hUC-MSCs给药均可显著降低膝关节面Pelletier评分、关节直径和病理Mankin评分,改善关节腔结构,降低X线评分和关节肿胀,且iPSC-MSCs较hUC-MSCs给药在降低Pelletier评分[(1.22±0.67)比(2.00±0.71),P=0.021]方面差异有统计学意义;相比于模型组,iPSC-MSCs关节腔注射给药可显著增加软骨层CollagenⅡ表达[(35.87±8.52)比(69.90±7.65),P<0.01],降低MMP-13[(59.25±5.56)比(33.75±5.85),P<0.01]和ADAMTS-5[(52.25±10.47)比(22.25±6.13),P<0.01]表达水平,且与hUC-MSCs给药差异有统计学意义,iPSC-MSCs组与hUC-MSCs组CollagenⅡ、MMP-13、ADAMTS-5值分别为[(69.90±7.65)比(61.00±5.52),P=0.010]、[(33.75±5.85)比(43.25±6.02),P=0.028]、[(22.25±6.13)比(36.50±4.65),P=0.011]。结论关节腔注射iPSC-MSCs可显著改善OA大鼠关节病理,具有明显的软骨保护作用。
- 何继晨严君逸程琢玉程润赵英杰魏伟严尚学
- 关键词：骨关节炎脐血干细胞移植诱导多能干细胞间质干细胞软骨损伤
- 抑制芳香烃受体表达促进人脐带间充质干细胞的增殖和软骨分化
- 2021年
- 目的探究芳香烃受体(AhR)对人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)增殖和软骨分化能力的影响。方法用AhR-homo-1432 inhibitor和AhR-homo-1432 inhibitor阴性对照转染hUC-MSCs,设为si-AhR组和si-NC组。在转染hUC-MSCs后的第1、3、5、7天,CCK-8法测定细胞活力;软骨分化诱导培养hUC-MSCs 7 d,实时荧光定量PCR和Western blot检测软骨分化标志物SOX-9和COL2A1 mRNA和蛋白的表达;阿利新蓝染色检测蛋白聚糖的表达。结果与si-NC组比较,si-AhR组AhR的mRNA和蛋白水平表达降低,表明转染成功。CCK-8实验结果显示,与si-NC组比较,转染后的第5天和第7天si-AhR组hUC-MSCs活力增强。经软骨分化诱导培养后,与si-NC组比较,si-AhR组hUC-MSCs的SOX-9和COL2A1 mRNA和蛋白表达升高;阿利新蓝染色结果显示,si-AhR组hUC-MSCs表达的蛋白聚糖含量较si-NC组增多,染色更深,软骨分化能力增强。结论抑制AhR表达可促进hUC-MSCs的增殖和软骨分化。
- 王新伟赵英杰李素素王越业贾成艳常艳魏伟
- 关键词：人脐带间充质干细胞芳香烃受体细胞增殖软骨分化
- Cytomics FC500与ImageStream^X MarkⅡ检测大鼠脾脏T、B细胞亚群TDO_2表达的比较被引量：1
- 2020年
- 用常规方法制备大鼠脾脏细胞悬液,分别用Cytomics FC500流式细胞仪(FC500)和ImageStream^X MarkⅡ成像流式细胞仪(MarkⅡ)检测大鼠脾脏辅助性T细胞(CD3^+CD4^+)、细胞毒性T细胞(CD3^+CD8^+)、B细胞(CD45R^+)色氨酸2,3双加氧酶(TDO2)的表达水平,并观察2种检测技术检测结果的相关性和一致性。结果显示,2种流式细胞仪测得的CD3^+CD4^+T细胞、CD3^+CD8^+T细胞和CD45R^+B细胞表达TDO2的相关性较好(R^2均>0.8)。Bland-Altman法分析2种检测技术测得CD3^+CD4^+细胞、CD3^+CD8^+细胞和CD45R^+细胞表达TDO2的偏倚较小,分别为-1.3%、-8.2%、7.4%。TDO2在大鼠脾脏T、B细胞中均有表达。FC500和MarkⅡ检测结果的相关性和一致性较好。FC500操作方便,速度快。MarkⅡ将传统流式细胞术的高通量分析与细胞形态学分析相结合,精确度高,可获得细胞具体图片。
- 张冰洁李丝雨赵英杰常艳魏伟
- 关键词：流式细胞术
- 新鲜和冷冻人脐带来源间充质干细胞对大鼠骨关节炎的治疗作用比较被引量：3
- 2019年
- 目的:比较新鲜和冷冻人脐带来源间充质干细胞对Ⅱ型胶原酶诱导的大鼠骨关节炎的治疗作用。方法:选用Sprague-Dawley (SD)大鼠,采用Ⅱ型胶原酶关节腔注射法建立大鼠骨关节炎模型,将大鼠随机分为正常组(Normal)、模型组(Model)、新鲜人脐带来源间充质干细胞组(Fresh hUC-MSC)、冷冻人脐带来源间充质干细胞组(Frozen hUC-MSC)和透明质酸组(HA),每组10只,于第一次注射Ⅱ型胶原酶后第7天给药。Fresh hUC-MSC和Frozen hUC-MSC组大鼠分别膝关节腔注射Fresh hUC-MSC和Frozen hUC-MSC 1×10^6/50 μL;HA组大鼠给予HA 50 μL;正常组和模型组大鼠给予等体积无菌生理盐水。给药后6周处死大鼠,观察各项指标。检测各组大鼠膝关节周长差值、关节软骨大体观察评分、膝关节X射线观察及评分、膝关节病理变化以及膝关节软骨基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)和基质金属蛋白酶抑制因子-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)的表达情况。结果:与模型组相比,Fresh hUC-MSC和Frozen hUC-MSC组关节周长差值和关节软骨大体评分均显著减小,差异均有统计学意义(P<0.01);Fresh hUC-MSC和Frozen hUC-MSC组X射线的凯尔格伦-劳伦斯分级评分以及番红固绿染色病理变化的Mankin's评分差异均有统计学意义(P<0.05)。同时,Fresh hUC-MSC和Frozen hUC-MSC组的MMP-13的表达显著降低,TIMP-1的表达显著升高,MMP-13和TIMP-1的比值显著降低,并且差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论:Fresh hUC-MSC和Frozen hUC-MSC均能改善大鼠骨关节的损伤,两组治疗骨关节炎差异无统计学意义,为临床应用hUC-MSC治疗提供实验依据。
- 张斌斌赵英杰杨雪枝韩萍常艳魏伟
- 关键词：骨关节炎
- 人脐带来源间充质干细胞对大鼠佐剂性关节炎的治疗和免疫调节作用
- 2019年
- 目的明确人脐带来源间充质干细胞(hUC-MSCs)对佐剂性关节炎大鼠的治疗和免疫调节作用。方法将24只雄性SD大鼠以完全弗氏佐剂法建立佐剂性关节炎模型(AA),采用随机数字表法分为模型组、hUC-MSCs组(组1:2×10^6 cells/mL,组2:5×10^6 cells/mL,尾静脉注射)和益赛普组(2.8 mg/kg,皮下注射),每组6只;另取6只雄性SD大鼠作为对照组。造模后每周记录大鼠体质量、足爪容积、进行全身评分和关节炎指数评分、计算关节肿胀数;造模d35处死动物,称量胸腺、脾脏重量,计算相应指数;苏木精-伊红(HE)染色法观察大鼠踝关节组织病理学变化;流式细胞术检测AA大鼠脾脏中(CD4^+CD44^+)T细胞和(CD4^+CD62L^+)T细胞百分比;酶联免疫吸附法(ELISA)检测AA大鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α),白细胞介素1β(IL-1β)的水平。结果hUC-MSCs静脉注射可降低AA大鼠的足爪容积、全身评分、关节炎指数评分以及关节肿胀数量(F=20.573、89.092、14.161、10.914,均P<0.01);降低胸腺指数[(0.120±0.032)、(0.120±0.031)]和脾脏指数[(0.250±0.070)、(0.240±0.018)](F=6.339、4.105,均P<0.01);改善踝关节病理;hUC-MSCs静脉注射可调节脾脏中T细胞亚群(CD4^+CD62L^+)[(7.0±1.4)%、(7.9±2.2)%],(CD4^+CD44^+)[(15.0±3.6)%、(12.0±1.9)%]的百分比(F=6.331、12.719,均P<0.01),降低AA大鼠血清中TNF-α[(172.0±13.0)ng/L、(150.0±12.0)ng/L]和IL-1β[(75.0±36.0)ng/L、(74.0±20.0)ng/L]水平(F=8.221、3.581,均P<0.05)。结论hUC-MSCs静脉注射可调节大鼠T细胞亚群比例和功能,发挥对大鼠AA的治疗作用。
- 程润丁文溪程琢玉何继晨赵英杰严尚学魏伟
- 关键词：间质干细胞脐带免疫调节肿瘤坏死因子Α
- BAFF-BAFFR及信号转导分子参与佐剂性关节炎的免疫反应及芍药苷-6′-O-苯磺酸酯的作用被引量：2
- 2016年
- 目的观察佐剂性关节炎(AA)大鼠炎症不同时期脾脏B淋巴细胞刺激因子(BAFF)及其受体(BAFFR)表达变化以及芍药苷-6′-O-苯磺酸酯(CP-25)对其的影响。方法采用完全弗氏佐剂制备大鼠AA模型,随机分为正常组、AA组、CP-25(25、50、100 mg/kg)组、甲氨蝶呤(0.5 mg/kg)组、白芍总苷(50 mg/kg)组、芍药苷(50 mg/kg)组,造模后第17~31天给药。ELISA法检测外周血BAFF水平;免疫组织化学法、流式细胞术、Q-PCR和Western blot法检测CP-25对脾脏BAFFR表达的影响;Western blot法检测脾脏肿瘤坏死因子相关因子2(TRAF2)蛋白的表达。结果与正常组比较,炎症反应期(D9)、炎症初期(D16)、炎症高峰期(D23)及炎症缓解期(D30)模型大鼠血清BAFF水平和脾脏BAFFR mRNA及蛋白表达均增加。与AA组比较,CP-25(25、50、100 mg/kg)体内给药明显下调AA大鼠脾脏BAFFR mRNA及蛋白表达。体外BAFF刺激后,大鼠脾脏细胞TRAF2及BAFFR蛋白表达显著增加,CP-25(1×10^(-6)mol/L)明显降低TRAF2及BAFFR蛋白的表达。结论 CP-25发挥炎症免疫调节作用可能与其抑制AA大鼠BAFFR受体及TRAF2信号分子表达有关。
- 徐澍魏芳贾晓益孙晓静杨雪枝赵英杰常艳魏伟
- 关键词：佐剂性关节炎BAFFTRAF2
- 间充质干细胞治疗骨关节炎软骨损伤:作用、应用与问题被引量：8
- 2021年
- 背景:间充质干细胞来源广泛、易于分离培养,并且具有多向分化、组织修复、抗炎和免疫调节功能,为治疗骨关节炎软骨损伤提供新的途径。目的:对间充质干细胞治疗骨关节炎软骨损伤的应用和研究方面作一综述。方法:由第一作者以“osteoarthritis,cartilage damage,mesenchymal stem cell,treatment”为英文关键词,以“间充质干细胞,骨关节炎,软骨损伤,治疗”为中文关键词,检索2000至2020年期间收录在PubMed和中国知网数据库中的相关文献,排除与文章研究目的无关及重复性的文献,对纳入符合标准的50篇文献进行综述。结果与结论:①组织工程方法将间充质干细胞的多向分化功能和生物支架材料的特性结合,能够更好地促进受损软骨的修复,已在基础研究和临床研究上取得了众多成果;②间充质干细胞与溶媒联用关节腔注射可以充分发挥间充质干细胞的治疗作用,而且可以将间充质干细胞的优点扩大;③间充质干细胞外泌体治疗骨关节软骨损伤目前还停留在临床前动物研究阶段,但有希望成为骨关节炎软骨损伤治疗的新手段。
- 王新伟赵英杰常艳魏伟
- 关键词：干细胞间充质干细胞骨关节炎软骨损伤
- HPLC同时测定关节炎大鼠血清色氨酸和犬尿氨酸被引量：3
- 2019年
- 建立新的高效液相色谱法(HPLC),检测佐剂性关节炎(AA)大鼠血清中色氨酸(Trp)和犬尿氨酸(Kyn)。SD大鼠成模后取血清,用蛋白沉淀法处理,离心后取上清液进样。考察该方法的专属性、标准曲线、精密度、回收率和稳定性等能否用于AA大鼠Trp和Kyn含量测定。Trp保留时间9.0 min,线性范围25~1 000μmol/L,检测限0.27μmol/L;Kyn保留时间5.6 min,线性范围0.5~10μmol/L,检测限0.07μmol/L;平均回收率在80%~120%范围之内;日内、日间精密度RSD均小于15%,符合生物样品定量分析方法要求,并可应用于AA大鼠血清中Trp和Kyn测定。建立了一种灵敏度高、快速的HPLC分析方法,适于测定AA大鼠血清中Trp和Kyn含量。
- 韩萍杨雪枝赵英杰张冰洁李丝雨张斌斌常艳魏伟
- 关键词：色氨酸犬尿氨酸血清佐剂性关节炎
