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人肺癌A549细胞对水不溶性镍化合物摄取作用的实验研究: 2010年; 用不同浓度的水不溶性氧化镍(NiO)和二硫化三镍(Ni3S2)分别处理人肺癌A549细胞,并在不同时间点(0、6、24、48h)用光学显微镜和电子显微镜观察人肺癌A549细胞对水不溶性镍化物的摄取状况。光镜与电镜均观察到人肺癌A549细胞摄取镍化物颗粒时形成的吞噬小泡。此试验证明细胞对水不溶性镍化物的摄取是通过细胞内吞作用实现的。; 高婷李超葛丹梅王大庆付立业蒋涛刘云鹏姜又红; 关键词：A549 光学显微镜电子显微镜

不同浓度不溶性镍化物与人肺癌A549细胞内Cap43、HIF-1α关系的研究: 2010年; 目的探讨不同浓度不溶性镍化物对人肺癌A549细胞内钙激活蛋白43(Cap43)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的影响。方法用不同浓度的水不溶性二硫化三镍(Ni3S2)处理人肺癌A549细胞,24h后用间接免疫荧光法观察染毒后细胞内Cap43与HIF-1α蛋白表达的变化。结果通过细胞免疫荧光法发现,随着处理物浓度的增加,细胞内Cap43、HIF-1α蛋白含量均增加。结论不溶性镍化物可以诱导人肺癌A549细胞内Cap43、HIF-1α蛋白含量的增加。; 高婷吴敏李超刘晓辉孙海燕王大庆刘云鹏姜又红; 关键词：A549 CAP43 HIF-1Α

树突状细胞分泌的exosomes体外诱导特异性CTL抗肾癌的初步研究被引量：1: 2010年; 目的提取树突状细胞外来体(DC)分泌的外来体(exosomes),检测其体外刺激同源T细胞活化和诱导特异性细胞毒性T细胞(CTL)抗肾癌769-P的免疫效应。方法从健康志愿者外周血单个核细胞中诱导培养DC,流式细胞术检测DC的表型;通过超速离心法结合超滤法制备DC分泌的exosomes,透射电镜观察exosomes的形态,MTT法检测DC分泌的exosomes诱导T细胞的增殖和特异性CTL对769-P的体外杀伤活性。结果超速离心法结合超滤法能从DC上清中分离exosomes,并且肿瘤抗原致敏DC分泌的exosomes能有效促进T细胞的增殖及特异性CTL抗769-P效应,T细胞增殖倍数达(1.68±0.22)%,CTL杀瘤活性为(38.23±2.16)%。结论抗原致敏DC分泌的exosomes能有效诱导激活具有较强杀瘤活性的肿瘤特异性CTL。; 王新利李卿高婷付立叶王扬蒋涛姜又红; 关键词：外来体细胞毒性T细胞肾癌

NK细胞杀瘤活性与肿瘤细胞表面MICA/B表达的相关性研究被引量：1: 2010年; 目的探讨自然杀伤NK细胞杀瘤活性与肿瘤细胞表面MICA/B表达的相关性。方法采用流式细胞术检测人红白血病细胞K562、乳腺癌细胞Bcap37、肾癌细胞769P及肺癌细胞A549表面MICA/B的表达,RosetteSep誖改进法分离人外周血NK细胞,MTT法检测不同效靶比时NK细胞对几种肿瘤细胞的杀伤活性。结果K562、Bcap37、769P及A549细胞表面MICA/B的表达阳性率分别是(60.35±0.50)%、(90.72±0.64)%、(55.59±0.55)%、(3.84±0.10)%;RosetteSep誖改进法分选出的NK细胞纯度为(96.52±2.42)%,在同一效靶比时,NK细胞对K562、Bcap37及769P的杀伤活性较强,与A549相比有显著性差异(P<0.01),其中K562与Bcap37之间无显著性差异(P>0.05);效靶比为5∶1、10∶1、20∶1时,NK细胞的杀伤活性与4种肿瘤细胞表面MICA/B表达均呈正相关关系(P<0.01),随着效靶比增加,相关性增强。结论NK细胞的杀伤敏感性与肿瘤细胞表面MICA/B的表达水平相关,肿瘤细胞表面MICA/B的表达水平影响NK细胞的杀伤活性。; 王新利李卿蒋涛王扬付立叶高婷姜又红; 关键词：自然杀伤细胞肿瘤细胞细胞毒性实验

不溶性镍化合物对人肺癌A549细胞镍含量影响被引量：1: 2010年; 目的探讨不溶性镍化合物对细胞中镍含量的影响。方法用不同浓度的水不溶性氧化镍(NiO)和二硫化三镍(Ni3S2)分别处理人肺癌A549细胞,用原子吸收分光光度计(AAS)检测染毒48 h后细胞内镍含量并估算其摄取率。结果经过终浓度为0,0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3μg/cm2的Ni3S2处理后,平均每105个细胞中含镍量为0.002 4,0.077 1,0.015 7,0.226 8,0.475 4,0.7,0.988 2μg;终浓度为0,0.5,1.0,2.0,4.0,8.0,16μg/cm2的NiO处理后,平均每105个细胞中含镍量为0.003,0.07,0.108,0.255,0.628,1.543,6.571μg;相同浓度(0.5,1.0,2.0μg/cm2)镍颗粒物处理下,Ni3S2处理组细胞镍含量分别为(0.077 1±0.006 6,0.157 4±0.019 0,0.475 4±0.112 1)μg/105个细胞,均高于NiO处理组(0.070 1±0.003 2),(0.108 1±0.015 9),(0.255 2±0.041 5)μg/105个细胞,各剂量组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论人肺癌A549细胞对不溶性镍化合物的摄取与其染毒剂量成正比,且相同浓度下对NiS的摄取率高于NiO。; 高婷王大庆王晓华王新利李妍李超王扬姜又红; 关键词：人肺癌A549细胞原子吸收分光光度计

基底样乳腺癌与ERK信号传导通路关系的研究: 2010年; 目的检测三阴性乳腺癌中CK5/6,EGFR,P-ERK的表达,探讨基底细胞样乳腺癌与ERK/MAPK信号传导通路的关系。方法采用免疫组化法检测CK5/6,EGFR,P-ERK在70例三阴性乳腺癌组织中的表达。结果在(70例)三阴性乳腺癌中,CK5/6与EGFR的阳性表达率分别为68.6%(48/70),57.1%(40/70),共筛出基底细胞样乳腺癌53例。在三阴性乳腺癌中P-ERK在基底细胞样乳腺癌与非基底细胞样乳腺癌的阳性表达率分别为79.2%(42/53),47.1%(8/17),其差异有统计学意义(P<0.05)。CK5/6与EGFR、P-ERK在基底细胞样乳腺癌的表达中具有正相关性(r=0.471;0.389,P<0.05)。结论 CK5/6,EGFR是诊断基底细胞样乳腺癌的重要分子标记物;基底细胞样乳腺癌的发生发展与ERK/MAPK信号传导通路被异常激活有关;CK5/6与EGFR、P-ERK在基底细胞样乳腺癌的表达中具有相关性。; 李超高婷陈广泉姚凡葛丹梅金锋; 关键词：基底细胞样乳腺癌免疫组化 CK5/6 EGFR

一种经济高效的人外周血NK细胞纯化方法的建立被引量：5: 2010年; 目的:建立一种经济并且纯化率高的人外周血NK细胞分离方法。方法:对用RosetteSep(法直接从全血分离NK细胞的方法进行改进,先从全血中获得单个核细胞(PBMC),与红细胞按比例混合后再进行分离,利用流式细胞仪检测纯度,并且用CCK-8法检测NK细胞对K562细胞的杀伤活性。结果:改进后分离每毫升血所需RosetteSep抗体复合物用量仅为直接分离法的1/50;NK细胞的纯度由纯化前的(11.02±3.15)%提高到(96.52±2.42)%,细胞回收率为(70.24±10.51)%;纯化的NK对靶细胞K562有较强的杀伤作用,与直接分离法比较杀伤活性差异无统计学意义(P>0.05)。结论:改进后的方法可以获得高纯度的NK细胞,该分离方法不影响NK的杀伤活性,同时极大的降低了分离成本。初步建立了一种经济高效,快速简便,并且纯化率高的人外周血NK细胞纯化方法。; 王新利李卿高婷姜又红; 关键词：外周血 NK细胞纯化

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高婷