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米曲霉中蓝藻抗病毒蛋白-N基因的克隆与表达: 2016年; [目的]提高蓝藻抗病毒蛋白-N(CVN)的异源表达量,获得大量高纯度可溶性蛋白。[方法]采用RT-PCR从酱油发酵酱醪宏基因组中克隆获得CVN基因cvn-SF,构建了重组表达载体p ET32a-cvn-SF,转化E.coli BL21菌株,获得工程菌株,优化表达条件,通过Ni-NTA凝胶亲和层析对CVN-SF蛋白进行纯化。[结果]工程菌株在温度30℃、添加1 mmol/L的IPTG诱导剂、培养时间12 h的条件下获得最高表达量的可溶性蛋白。Ni-NTA凝胶亲和层析纯化得到了230.8 mg/L的CVN蛋白,占提取总蛋白含量的33.37%。[结论]所得CVN蛋白高于目前报道的CVN在大肠杆菌的最高表达量140 mg/L^([11])。; 谢露付显令孙萍林俊芳郭丽琼云帆黎倩怡; 关键词：酱醪米曲霉基因克隆

四种乳酸菌中低聚糖合成相关的基因的挖掘及其功能研究: 随着中国经济高速发展，人们生活水平的提高，对环境和健康的日益重视，食品安全问题俨然成为全社会关注的焦点，崇尚绿色，回归自然的饮食观念也随之形成，功能性低聚糖和蛋氨酸因其功能的多样性和独特性而备受关注。肠道微生态的紊乱是影...; 谢露; 关键词：乳酸菌全基因组基因挖掘

蔗糖磷酸化酶的异源表达及合成蜜二糖条件优化: 2024年; 为挖掘蔗糖磷酸化酶(sucrose phosphorylase,SPase)合成蜜二糖的潜力、降低蜜二糖制备的工业成本,该研究利用大肠杆菌对SPase基因进行异源表达,通过镍柱纯化后表征其酶学性质,采用响应面试验优化合成蜜二糖的最佳反应条件,成功将芒果源肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)的SPase基因在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,获得可溶性SPase。酶学性质研究结果表明其比酶活为78 U/mg,最适反应温度和pH值分别为40℃和6.0。以此为基础利用SPase进行蜜二糖的合成优化,结果表明,在40℃条件下,添加200 g/L蔗糖、400 g/L D-半乳糖和390 U/L的SPase,反应24 h最高可获得浓度为(34.20±0.92)g/L的蜜二糖。; 张瑾谢露郭丽琼叶志伟叶志伟林俊芳; 关键词：基因克隆基因表达功能性低聚糖

重组蔗糖磷酸化酶在制备功能性低聚糖中的应用: 本发明公开一种重组蔗糖磷酸化酶在制备功能性低聚糖中的应用，属于酶工程领域。本发明所述的重组蔗糖磷酸化酶利用蔗糖和D‑半乳糖为底物合成功能性低聚糖蜜二糖。本文旨在建立利用重组酶SPase发酵制备蜜二糖的适宜条件，通过构建了...; 林俊芳谢露郭丽琼叶志伟; 文献传递

重组蔗糖磷酸化酶在制备功能性低聚糖中的应用: 本发明公开一种重组蔗糖磷酸化酶在制备功能性低聚糖中的应用，属于酶工程领域。本发明所述的重组蔗糖磷酸化酶利用蔗糖和D‑半乳糖为底物合成功能性低聚糖蜜二糖。本文旨在建立利用重组酶SPase发酵制备蜜二糖的适宜条件，通过构建了...; 林俊芳谢露郭丽琼叶志伟; 文献传递

植物乳杆菌α-葡萄糖基转移酶基因挖掘及表达研究: 2017年; α-葡萄糖基转移酶(α-GTF)是一类可以利用麦芽糖,异麦芽糖,O-甲基葡萄糖苷等为底物合成低聚糖的多功能性酶,因其功能多样性和独特性而备受关注。本文利用本团队测序的植物乳杆菌(FMNP01)全基因组信息,采用生物信息学方法分析获得α-葡萄糖基转移酶基因(α-gtf),同时根据NCBI中上传的乳酸菌全基因组信息中的α-GTF的DNA序列设计引物,利用PCR技术分别从植物乳杆菌、干酪乳杆菌和短乳杆菌中克隆得到3个α-gtf基因,其编码的氨基酸序列相似性分别为42%、29%和29%;将克隆得到的3个基因分别与表达载体pET-32a连接构建成表达质粒,转入大肠杆菌BL21表达宿主菌中进行诱导表达,产物经SDS-PAGE分析表明,在75 ku处都有一明显条带,与预期蛋白分子量一致,表明这3个基因成功获得了表达。同时对诱导剂浓度、诱导时间和温度进行优化,可望为以后相关研究奠定了基础。; 谢露郭丽琼林俊芳叶志伟钟倩婷; 关键词：乳酸菌基因挖掘原核表达

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谢露