毛明星
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：成都医学院生物医学系更多>>
- 发文基金：四川省应用基础研究计划项目国家大学生创新性实验计划四川省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 一种基于OmpA的分泌型原核表达载体的构建及应用被引量：1
- 2016年
- 目的构建大肠杆菌周质分泌型表达载体并验证其表达效果。方法以pUC18-lpp为基础载体,构建含有核糖体结合元件(RBS)、信号肽(OmpA)、多克隆位点(MCS)的分泌型表达载体pUC-OmpA;通过分子克隆获得含有密码子优化的人生长激素(hGH)编码序列的pUC-OmpA-hGH,转化大肠杆菌JM109菌株并验证周质分泌性质。结果经IPTG诱导后,SDS-PAGE、Western印迹分析结果显示周质空间有hGH重组表达产物,分子量约为22kD,大小与预期一致,周质hGH约占菌体总hGH的43%。结论成功构建了基于OmpA信号肽的周质分泌型表达系统,为实现生物活性蛋白的原核表达奠定了基础。
- 蒋玉亮兰萍李艳余赟毛明星杨亚琼杨平
- 关键词：原核表达信号肽
- 纳豆激酶检测体系的建立及其跨膜转运途径初探
- 2016年
- 目的建立纳豆激酶（nattokinase,NK）酶联检测体系,探讨其跨膜转运机制。方法采用杂交瘤技术筛选抗NK的单克隆抗体,竞争抑制法鉴定单抗识别的抗原表位,Western Blot测定单抗特异性,双抗夹心ELISA法进行单抗灵敏度测定,Caco-2细胞模型探讨NK跨膜转运机制,生物信息学预测NK穿膜相关序列。结果筛选得到稳定分泌抗体且特异性识别NK的杂交瘤细胞6株,其中3株单抗识别相近的抗原表位,其余单抗识别不同的抗原表位;6株单抗检测NK的最小灵敏度分布为0.78~20.00ng/mL;Caco-2细胞模型显示,胞吞作用不是NK跨膜转运的主要途径;生物信息学提示,NK中含有3段穿膜相关序列。结论基于NK单抗建立的酶联检测体系,可有效监控NK跨膜转运过程,NK可能是依据蛋白转导结构域直接介导而实现其肠道吸收转运。
- 李敏惠陈瑜蒋玉亮李艳余赟毛明星林定彪杨亚琼杨平
- 关键词：纳豆激酶单克隆抗体跨膜转运蛋白转导结构域
