袁维
- 作品数：2 被引量：11H指数：2
- 供职机构：上海健康医学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 重组人BMP-2缓释作用于基质血管成分细胞促进大鼠脊柱融合的实验研究被引量：3
- 2017年
- 目的将重组人BMP-2(recombinant human BMP-2,rh BMP-2)缓释作用于新鲜分离的大鼠基质血管成分细胞(stromal vascular fraction cells,SVFs),移植到大鼠腰椎横突后外侧,观察其促进脊柱融合的效果。方法取健康4月龄SD大鼠双侧腹股沟区皮下脂肪,采用Ⅰ型胶原酶消化法提取SVFs。通过仿生磷灰石涂层方法,将rh BMP-2与β-磷酸三钙(β-tricalcium phosphate,β-TCP)通过共价键结合制成缓释载体,通过BCA法测定其缓释效应。将32只大鼠随机分成4组,每组8只。采用L_4、L_5横突去皮质化方法制备大鼠腰椎后外侧融合模型,分别于A、B、C、D组植入PBS+脱钙骨基质(decalcified bone matrix,DBX)、rh BMP-2/β-TCP缓释载体+DBX、SVFs+DBX和SVFs+rh BMP-2/β-TCP缓释载体+DBX。术后8周获取腰椎融合标本,进行手法判断和X线片观察评价脊柱融合情况,以及micro-CT评价脊柱融合情况,并分析骨密度(bone mineral density,BMD)及骨体积分数;行HE染色、Masson三色组织学染色,以及免疫组织化学染色检测骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)。结果 2周时rh BMP-2/β-TCP缓释载体的rh BMP-2体外累计释放量为40%左右,起到缓慢释放效果;而未经仿生磷灰石涂层的对照组2周时几乎停止释放rh BMP-2。手法判断、X线片和micro-CT评估一致,显示D组成骨能力最强,达100%融合(8/8),之后依次为B组(75%、6/8)、C组(37.5%、3/8)、A组(12.5%、1/8)。Micro-CT分析示,D组BMD和骨体积分数均显著高于其余3组,B组显著高于A、C组,差异均有统计学意义(P<0.05)。HE、Masson三色染色和OCN免疫组织化学染色示,D组有大量软骨细胞连接,伴有骨基质沉积、有活跃的成骨过程,类似长骨的矿化过程;B组的骨形成相对D组较弱;A、C组缺乏有效的新骨形成。结论新鲜分离的SVFs在rh BMP-2缓释作用下,显示出良好的骨生成能力,可有效促进脊柱融合,为临床应用提供理论基础。
- 袁维郑军钱晋宇周小小王明辉王秀会
- 关键词：骨形成脊柱融合
- 终板下椎体缺血诱导兔椎间盘退行性变模型的建立及终板中内皮素1的表达被引量：8
- 2020年
- 目的通过终板下注射无水乙醇阻碍椎体-终板营养,建立一种新型兔腰椎椎间盘退行性变模型,并观察终板退行性变过程中内皮素1(ET-1)的表达情况。方法健康4月龄新西兰兔32只,随机分成4组,每组8只,选取L5,6椎体(对应L4/L5及L5/L6椎间盘)注射300μL无水乙醇,选取L4椎体(对应L3/L4椎间盘)注射磷酸盐缓冲液(PBS)作为实验对照,L7椎体(对应L6/L7椎间盘)未注入任何物质作为正常对照。其中1组造模后1个月提取软骨终板细胞,行免疫细胞化学染色检测ET-1表达;余3组分别于造模后1、3和5个月进行椎间盘X线和MRI检查,取椎间盘组织行HE染色观察形态学改变,免疫组织化学染色观察ET-1表达。结果注射无水乙醇后,随着时间进展,X线片显示椎间隙高度显著下降、椎间隙变窄、边缘骨赘增生,MRI T2WI显示椎间盘低信号;苏木精-伊红染色(HE)显示终板的生长板厚度变薄,终板结构破损,同时软骨终板细胞退化、直至消失,髓核中细胞发生转化(由空泡细胞转变为软骨样细胞,进而形成纤维软骨样细胞)造成髓核纤维化,纤维环结构排列紊乱、纤维化程度逐步加重;免疫组织化学染色显示,发生退行性变的终板组织内有ET-1表达,但随着退行性变加剧,ET-1表达强度下降;提取的退行性变软骨终板细胞(造模后1个月)也显示细胞质内ET-1强表达。结论通过注射无水乙醇阻碍椎体-终板营养途径可成功建立兔椎间盘退行性变模型,终板退行性变过程中伴随ET-1的表达。
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- 关键词：椎间盘退行性变内皮素-1
