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一例犬桡尺骨骨折的诊断与治疗被引量：5: 2018年; 扬州大学动物医院接诊一例桡尺骨骨折经外固定后预后不良的患犬病例,该犬表现右前肢右前肢外翻,无法正常着地。经X线检查确诊,犬的桡尺骨骨折端发生错位对合。对该患犬实施了接骨板内固定,效果良好。; 冯楠楠孙凯孙凯王冰洁刘学忠; 关键词：X线检查手术治疗

ZEA对小鼠T淋巴细胞活化过程中超微结构及核因子NFAT和NF-κB信号通路的影响被引量：2: 2019年; 为揭示玉米赤霉烯酮(ZEA)对动物免疫功能影响的机制,以免疫磁珠负性分选法从小鼠脾脏中分离得到的高纯度T淋巴细胞为材料,刀豆蛋白A(Con A)作为T淋巴细胞活化刺激剂,研究ZEA对小鼠T淋巴细胞活化过程中细胞超微结构的影响及对核因子NFAT、NF-κB信号通路的影响。试验设空白对照组(不含Con A)、Con A (5μg·mL^(-1))对照组、ZEA(10、20及40μmol·L^(-1))+Con A (5μg·mL^(-1))染毒组,细胞染毒48h后用透射电镜观察细胞结构变化情况。细胞染毒处理24和36h后分别提取细胞浆、细胞核蛋白,Western blot检测NFAT及NF-κB信号通路中关键蛋白表达情况。结果表明:与空白对照组相比,Con A组T淋巴细胞胞浆内NFAT、NF-κB等相关蛋白含量显著或极显著升高;细胞体积增大,细胞浆丰富,核糖体和线粒体明显增多。与Con A组相比,ZEA染毒组T淋巴细胞胞浆内NFAT、NF-κB相关蛋白含量显著或极显著下降,并呈剂量-效应关系;细胞胞浆减少,细胞质出现不同程度的空泡化,线粒体肿胀,核糖体消失,异染色质增多。与空白对照组相比,Con A组T淋巴细胞核内NFAT、NF-κB含量均极显著升高;与Con A组相比,ZEA染毒组T淋巴细胞核内NFAT、NF-κB含量显著或极显著下降,并呈剂量-效应关系。这一研究提示ZEA可造成T淋巴细胞活化过程中细胞超微结构的损伤,抑制小鼠T淋巴细胞活化过程中核因子NFAT、NF-κB信号通路活性,抑制相关蛋白合成,造成T淋巴细胞的活化作用被抑制。; 刘利蔡国栋孙凯朱启航王涛邹辉顾建红袁燕刘学忠刘宗平卞建春; 关键词：玉米赤霉烯酮刀豆蛋白A NFAT

ZEA和DON及其联合作用对小鼠T淋巴细胞Fas/FasL凋亡信号通路的影响被引量：2: 2019年; 为揭示玉米赤霉烯酮(ZEA)、脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)及其联合作用免疫毒性的机理,试验研究了ZEA、DON及联合作用对刀豆蛋白A(Con A)刺激的小鼠离体T淋巴细胞细胞凋亡和Fas/FasL凋亡信号通路的影响。从BALB/c小鼠脾分离原代T淋巴细胞,分别设细胞空白组、刀豆蛋白A对照组(Con A组)、Con A+不同浓度ZEA染毒组、Con A+不同浓度DON染毒组、Con A+不同浓度ZEA与DON联合染毒组,染毒时间为24 h,利用流式细胞术检测细胞凋亡率,Western-blot检测Fas、FasL、Cleaved-caspase8、Bax、Bcl-2等关键蛋白表达情况。结果显示,与细胞空白组相比,Con A组细胞凋亡率上升但差异不显著(P>0.05);与Con A组相比,各染毒组细胞凋亡率均上升,多组出现显著或极显著差异(P<0.05或P<0.01);联合处理组较单一毒素处理组细胞凋亡率升高,经CompuSyn软件拟合,ZEA和DON以20∶1联合作用时协同效应最为明显。Con A组与细胞空白组相比,Bax/Bal-2值显著降低(P<0.05)、Fas、FasL、Cleaved-caspase8等蛋白的表达量无明显变化(P>0.05);与Con A对照组相比,各染毒组Bax/Bal-2、Fas、FasL、Cleaved-caspase8等蛋白的表达量均上升,且呈剂量依赖性,多组出现显著或极显著差异(P<0.05或P<0.01);联合染毒组较单一染毒组各蛋白表达量均升高。结果表明, ZEA、DON均可通过Fas/FasL凋亡信号通路诱导T细胞的凋亡,ZEA与DON联合可发挥协同效应。; 夏苏干孙凯蔡国栋邹辉顾建红袁燕刘学忠刘宗平卞建春; 关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇凋亡

玉米赤霉烯酮对小鼠T淋巴细胞趋化因子分泌及受体表达的影响被引量：1: 2018年; 为揭示玉米赤霉烯酮（ZEA）免疫抑制作用的机理,试验以小鼠原代脾淋巴细胞为材料,刀豆蛋白A （ConA）作为特异性刺激剂,用不同浓度的ZEA （0,10,20,40μmol/L）处理细胞,运用流式细胞术以及流式液相蛋白定量技术检测趋化因子受体CCR2、CCR7的表达和趋化因子MIP-1α及RANTES的分泌情况。结果显示,与未刺激活化的T淋巴细胞相比,ConA组细胞CCR2和CCR7的表达、MIP-1α和RANTES的分泌均显著升高（P〈0. 01）。随染毒浓度升高,ConA刺激细胞的CCR2和CCR7表达率、及MIP-1α和RANTES分泌量均呈现下降趋势,与ConA组比较,20和40μmol/L ZEA染毒组CCR2表达率和MIP-1α分泌量均差异显著（P〈0. 05）,40μmol/L ZEA染毒组CCR7表达率和RANTES分泌量均差异显著（P〈0. 05）。结果表明,ZEA可以一定程度上影响T淋巴细胞参与的免疫趋化效应,发挥免疫抑制作用。; 常晓翠蔡国栋孙凯朱启航邹辉顾建红袁燕刘学忠刘宗平卞建春; 关键词：刀豆蛋白A 趋化因子趋化因子受体

玉米赤霉烯酮对小鼠T淋巴细胞体外活化、增殖的影响被引量：11: 2017年; 为揭示镰刀菌毒素之一的玉米赤霉烯酮(ZEA)的免疫抑制作用机制,作者拟研究ZEA对刀豆蛋白A(Con A)介导的小鼠离体T淋巴细胞体外活化、增殖的影响。以Con A作为T淋巴细胞活化刺激剂,以不同浓度ZEA(0、10、20、40μmol·L^(-1))染毒处理细胞后,利用流式细胞术检测T淋巴细胞早期活化标志CD69分子及中期活化标志CD25分子表达情况,用CCK-8法检测T淋巴细胞的增殖情况。结果显示:细胞分别培养48、72、96h后,Con A组与细胞空白组相比均产生了明显的刺激增殖效应(P<0.01)。与Con A对照组相比,ZEA染毒可明显抑制Con A刺激引起的T淋巴细胞的增殖作用。除10μmol·L^(-1) ZEA组在72和96h时间段差异显著外(P<0.05),其余染毒组在各时间段均差异极显著(P<0.01),并呈浓度-效应关系。细胞加入Con A分别活化6、30h后,Con A组与细胞空白组相比,早期活化分子CD69和中期活化分子CD25明显升高,提示细胞发生明显的活化效应。与Con A对照组相比,当ZEA染毒浓度为10μmol·L^(-1)时,T细胞早期活化标志分子CD69和中期活化分子CD25的表达明显抑制,差异均极显著(P<0.01),当ZEA浓度为20、40μmol·L^(-1)时,CD69和CD25的表达进一步抑制(P<0.01),并呈剂量依赖性。研究结果表明,ZEA对动物免疫抑制作用的产生与其可直接抑制对小鼠T淋巴细胞的活化和增殖有关。; 蔡国栋孙凯项自来王玲邹辉顾建红袁燕刘学忠刘宗平卞建春; 关键词：玉米赤霉烯酮 T淋巴细胞增殖 T淋巴细胞活化 CD69

呕吐毒素对小鼠T淋巴细胞体外活化及相应活化标志分子的影响被引量：2: 2020年; 为探究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,简称DON)对离体T淋巴细胞活化的抑制作用,研究DON对刀豆蛋白A(concanavalin A,简称Con A)介导的小鼠离体T淋巴细胞活化及活化标志分子CD69、CD25、CD71的影响,以BALB/c小鼠T淋巴细胞为材料,分设细胞空白组、刀豆蛋白A对照组、不同浓度DON染毒组(Con A+0.5/1/2μmol/L DON),用CCK-8法检测24h内细胞的相对活性,用流式细胞术分别检测6、30、72 h时CD69、CD25、CD71的表达量。结果显示,DON在终浓度为0.5、1、2μmol/L时均极显著地降低了Con A介导的T细胞的相对活性(P<0.01),在终浓度为2μmol/L时显著地降低了T细胞CD69的表达率(P<0.05),在终浓度为0.5、1、2μmol/L时均极显著地降低了CD25、CD71的表达率(P<0.01),且呈剂量效应关系。由结果可知,脱氧雪腐镰刀菌烯醇对动物机体免疫抑制作用的产生与其直接抑制小鼠T淋巴细胞的活化有关。; 刘双双孙凯蔡国栋宋瑞龙邹辉顾建红袁燕刘学忠刘宗平卞建春; 关键词：呕吐毒素 CD69 CD71

白叶茶鲜叶制益生茶的急性、慢性毒性试验研究被引量：1: 2017年; 为了探明白叶茶鲜叶制益生茶作为保健茶的毒理学安全性,以不同浓度的益生茶为原料,对SD大鼠同时进行急性和慢性毒性试验。急性毒性试验,清洁级SD大鼠随机分为对照组和试验组,试验组每天以5 m L/kg·BW浓度5%益生茶液灌胃,对照组灌服等量生理盐水,试验期为14 d,观察相关生理体征变化。慢性毒性试验,清洁级SD大鼠随机分为对照组和益生茶高、中、低剂量组共四组,益生茶对应各组自由饮用浓度分别为3%、2%和1%的茶液,对照组自由饮用蒸馏水,试验期6周,试验结束后,检测各组大鼠血液学和血液生化学指标及脏器系数变化。经口急性毒性试验中,益生茶对SD大鼠的食物利用率和生理体征无显著影响(P>0.05)。慢性毒性试验中,益生茶各剂量组SD大鼠的体重、血液学、血液生化学指标值及各脏器的脏/体比值与对照组比较均无显著性差异(P>0.05)。益生茶各组大鼠主要脏器在外观形态和组织学上均无异常变化。在本试验条件下,未发现明显毒性反应和病理变化,表明白叶茶鲜叶制益生茶对雄性大鼠基本无毒。; 孙凯黎顺庚王光光王光光王玲卞建春; 关键词：SD大鼠急性毒性慢性毒性

DON、ZEA及其联合作用对小鼠T淋巴细胞活化及MAPK信号通路的影响被引量：1: 2020年; 为揭示脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)、玉米赤霉烯酮(ZEA)及其联合作用的免疫抑制机制,试验研究霉菌毒素DON、ZEA单独及联合染毒对小鼠离体脾脏淋巴细胞活性、T淋巴细胞活化及其MAPK信号通路的影响。以小鼠原代混合淋巴细胞为材料,以刀豆蛋白A(Con A)为混合淋巴细胞活化刺激剂,设ZEA、DON单独及联合染毒组,CCK-8法检测不同毒素组处理细胞24 h后细胞活性的变化;流式细胞术检测T淋巴细胞活化标识分子CD25以及共刺激分子CD278(ICOS)的表达情况;Western blot检测T淋巴细胞内MAPK通路相关蛋白ERK、JNK、p38等表达情况。结果表明:与细胞对照组相比,Con A组混合淋巴细胞相对存活率极显著上升;与Con A组相比,ZEA或DON单染组及联合染毒组细胞相对存活率显著或极显著下降。与对照组相比,Con A组CD4^+CD25^+/CD4^+及CD4^+CD278^+/CD4^+比例均极显著上升;与Con A组相比,ZEA、DON及联合染毒组CD4^+CD25^+/CD4^+比例均极显著下降,CD4^+CD278^+/CD4^+比例均不同程度下降,染毒浓度越高下降越明显。此外,不同浓度毒素处理组对T淋巴细胞MAPK通路相关蛋白ERK、JNK、p38等表达均有促进作用。这一研究提示,DON、ZEA及其联合可通过抑制CD25、CD278(ICOS)的表达来干扰T淋巴细胞的活化过程,DON、ZEA及其联合作用通过对MAPK信号通路的影响调控T淋巴细胞的存活。; 王珺孙凯郑豪邹辉袁燕顾建红刘学忠刘宗平卞建春; 关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇 T淋巴细胞活化 CD25

玉米赤霉烯酮对小鼠T淋巴细胞共刺激分子调节功能的影响被引量：3: 2018年; 在原代培养的小鼠T淋巴细胞中加入刀豆蛋白A(Con A)作为活化刺激剂,研究不同浓度玉米赤霉烯酮(ZEA)对T淋巴细胞共刺激信号分子CD28和CD152,及PI3K-Akt-mTOR信号通路关键蛋白表达的影响。结果表明:染毒48h后,Con A组与细胞空白组相比,CD28和CD152均显著升高;染毒组与Con A组相比,10和20μmol·L-1ZEA组CD28表达量呈下降趋势但差异不显著,CD152表达量显著或极显著降低,40μmol·L-1 ZEA组CD28表达量显著降低,CD152表达量无显著差异。染毒24h后,Con A组与细胞空白组相比,PI3K等蛋白表达量显著或极显著升高;各染毒组与Con A组相比,PI3K等蛋白表达量均显著或极显著下降,且呈剂量依赖性。这一研究说明ZEA可通过干扰CD28/CD152表达及抑制PI3K-Akt-mTOR信号通路来干扰T淋巴细胞的活化过程。; 孙凯蔡国栋蔡国栋常晓翠王涛王涛邹辉顾建红袁燕刘学忠刘宗平; 关键词：玉米赤霉烯酮 T淋巴细胞活化刀豆蛋白A

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孙凯

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