王磊
- 作品数：16 被引量：45H指数：3
- 供职机构：中南大学湘雅医学院药学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学自动化与计算机技术更多>>
- 甲基转移酶对鼻咽癌细胞中DLC-1基因表达的影响被引量：4
- 2014年
- 肝癌缺失基因-1(deleted in liver cancer-1,DLC-1)在多种肿瘤中呈现表达缺失或表达下调,这种异常表达主要与由DNA甲基转移酶(DNA methyltransferases,DNMTs)参与的启动子区异常甲基化有关。RT-PCR结果显示DLC-1在永生化鼻咽上皮细胞NP69和干扰DNMTs的5-8F细胞中的表达水平较未干扰的鼻咽癌细胞明显升高。甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSPCR)结果则表明DLC-1启动子区在表达下调或缺失的鼻咽癌细胞中均存在异常高甲基化,而干扰DNMTs后5-8F细胞中DLC-1启动子区甲基化状态被逆转,其中特异性干扰DNMT1后效果略为显著,提示DNA甲基转移酶活性对于鼻咽癌中DLC-1启动子区甲基化水平具有重要的调控作用,而DNMT1的调控作用更为突出。
- 冯湘玲陈欢刘卫东张畅祝斌王磊李敏周文姚开泰任彩萍
- 关键词：RNA干扰
- 羧基酯脂肪酶在结直肠癌中的表达及其生物学功能被引量：3
- 2020年
- 背景与目的:尽管结直肠癌的治疗水平在不断提高,但目前其疗效仍难令人满意,因此继续筛选和鉴定在结直肠癌起始和进展中发挥调控作用的关键分子,揭示其功能和机制,是开发诊疗新靶标和进一步提高结直肠癌的治疗水平的重要途经。据此,本研究首次探讨羧基酯脂肪酶(CEL)在结直肠癌中的表达水平,并初步研究其在结直肠癌中的生物学功能。方法:基于收录肿瘤组织基因表达数据的UALCAN和GEPIA在线数据库,综合分析CEL在结直肠癌和正常组织中的表达水平及其启动子甲基化水平。分别用qPCR、免疫组化、Western blot实验检测CEL在结直肠癌组织/癌旁组织与结直肠癌细胞/人正常结肠上皮细胞中的表达。通过转染特异性靶向CEL的siRNA(siCEL),瞬时敲低人结肠癌SW620细胞中CEL的表达水平后,分别用CCK-8、平板克隆形成、Transwell迁移和侵袭实验分析CEL在结直肠癌中的基本生物学功能。结果:癌症相关数据库显示,CEL在结直肠癌组织中的表达水平明显高于正常组织(P<0.05;P<0.001),结直肠癌组织中CEL基因的启动子甲基化水平明显低于正常组织(P<0.001)。qPCR,免疫组化和Western blot结果进一步证实CEL在结直肠癌组织中的基因和蛋白表达水平明显高于癌旁组织,在结直肠癌细胞中的水平明显高于正常结肠上皮细胞NCM460(P<0.01;P<0.001)。转染siCEL敲低SW620细胞中CEL的表达水平后,SW620细胞的生长速度、克隆形成能力、细胞迁移和侵袭能力被明显抑制(P<0.05;P<0.01;P<0.001)。结论:CEL在结直肠癌中高表达,其高表达可能与其启动子区的低甲基化有关。敲低CEL表达能显著抑制结直肠癌细胞的恶性生物学行为,表明CEL高表达促进结直肠癌恶性进展,因此,CEL有望成为结直肠癌诊断和治疗的靶标。
- 王磊王磊黄伟
- 关键词：结直肠肿瘤羧酸酯酶肿瘤侵润
- 鼻咽癌中TSG101基因的突变研究被引量：1
- 2002年
- 应用PCR SSCP方法对鼻咽癌中TSG101基因的编码区进行突变检测,以探讨该基因在鼻咽癌变过程中的作用.16例鼻咽癌标本中未发现TSG101基因编码区存在突变.以上结果可以初步排除TSG101基因在鼻咽癌中突变的可能.
- 杨旭宇王磊冯湘玲周文尹志华姚开泰
- 关键词：鼻咽癌突变研究
- 利用RNA干扰技术研究PTX1在鼻咽癌中的功能被引量：1
- 2007年
- 目的:探讨位于鼻咽癌高频扩增区+12p12-p11的PTX1基因在鼻咽癌中的表达及生物学功能。方法:用RT-PCR和荧光定量RT-PCR检测PTX1在36例鼻咽癌及8例慢性鼻咽炎中的表达。构建发夹状pSUPER-shPTX1干扰载体,转染鼻咽癌细胞系6-10B。mRNA水平检测PTX1基因的干扰效果,采用细胞周期及细胞凋亡检测PTX1被干扰后对鼻咽癌细胞6-10B细胞生物学特性的影响。结果:RT-PCR和荧光定量RT-PCR显示PTX1在鼻咽癌中高表达(P<0.05)。RNA干扰PTX1能抑制鼻咽癌细胞系的细胞增殖,诱导凋亡。结论:RNAi对PTX1的表达阻断改变了鼻咽癌细胞系6-10B的生物学特性,提示鼻咽癌12p12-p11扩增区获得的PTX1基因可能通过促进细胞的增殖和减少凋亡双途径来参与鼻咽癌的发生发展。
- 周文李虹冯湘玲王磊祝斌李辉姚开泰任彩萍
- 关键词：鼻咽癌RNAI
- 人pcDNA3.1(+)-Cav-1真核表达载体的构建及鉴定
- 2012年
- 目的构建pcDNA3.1(+)-Cav-1真核表达载体,建立稳定转染pcCav-1的6-10B细胞系(6-10B-Cav-1)。方法提取5-8F细胞总RNA,利用RT-PCR获取caveolin-1(Cav-1)开放读码框(Openreading frame,ORF)序列构建Cav-1/TA亚克隆载体,再将双酶切后的目的片段连入pcDNA3.1(+)真核表达载体并转染6-10B细胞。结果 RT-PCR扩增Cav-1基因ORF序列在783 bp附近见目的条带;质粒酶切鉴定及菌落PCR鉴定分别在783 bp及346 bp附近见目的条带;转染6-10B细胞后,转染组与对照组相比,Cav-1在mRNA水平表达差异具有统计学意义(P=0.027),在蛋白质水平前者比后者高出2倍以上。结论人Cav-1重组真核表达载体pcDNA3.1(+)-Cav-1构建成功并获得稳定表达Cav-1的6-10B细胞,为进一步检测Cav-1在鼻咽癌转移过程的作用奠定基础。
- 文秋元朱德茂袁松英任彩萍王磊
- 关键词：鼻咽癌真核表达载体转染
- 应用小鼠整体原位杂交技术检测MDM2在鼠胚发育不同阶段的表达
- 2006年
- 整体原位杂交(whole-mountinsituhybridization,WMH)已经成为基因表达定位和表达分布模式研究的一种重要手段.该技术能在整体水平上精确地研究胚胎发育过程中基因表达的三维信息,而且为大规模筛选区域及组织特异性候选克隆提供了有利的技术手段.采用体外转录地高辛标记的RNA探针,检测已知基因MDM2在鼠胚胎发育不同阶段的表达模式.
- 周文冯湘玲李虹王磊任彩萍姚开泰
- 关键词：整体原位杂交RNA探针小鼠MDM2
- 小分子表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂的研究进展被引量：19
- 2016年
- 表皮生长因子受体是一种具有酪氨酸激酶活性的膜受体,在细胞的增殖、迁移、代谢、分化和存活中发挥重要作用。目前,表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor-tyrosine kinase inhibitors,EGFR-TKIs)的开发已成为肿瘤治疗领域的热点。EGFR-TKIs分为可逆性EGFR-TKIs和不可逆性EGFR-TKIs,可逆性EGFR-TKIs主要包括吉非替尼和厄洛替尼等已上市的药物,不可逆性EGFR-TKIs主要包括阿法替尼和一些正处于临床研究中的药物,如AZD9291、CO-1686和HM61713等。本文对EGFRTKIs的研究进展进行了综述,为非小细胞肺癌临床治疗的药物选择提供参考。
- 李莹田驰王磊谢蒙蒙程泽能
- 关键词：抗肿瘤药物表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂非小细胞肺癌
- DIG标记DNA探针检测noggin在爪蟾胚胎中的表达被引量：2
- 2002年
- 整体原位杂交 (Whole mountinsituhybridization)用于基因表达定位和表达分布模式的研究 ,已经成为一种非常重要的手段 .PCR方法进行探针标记 ,可以获得特异性高 ,片断大小可变的探针 .采用DIG标记 ,检测已知基因noggin在爪蟾胚胎时空分布 ,所得结果与文献报道一致 。
- 周文冯湘玲杨旭宇王磊姚开泰
- 关键词：DNA探针NOGGIN整体原位杂交
- 用生物信息学方法处理基因芯片结果被引量：1
- 2006年
- 基因芯片是一种能够同时检测大量基因在同一组织中表达情况的有力工具.利用前期工作筛选的2210个鼻咽癌差异表达基因和Biocarta信号通路资源库,构建了一个基于信号通路的基因相互作用网络.通过统计学分析,进一步筛选出一批对该基因相互作用网络具有重大影响的基因(特别是RAN、CEL、RELA).随后,采用RT-PCR方法检测候选基因在鼻咽癌活检组织中的表达,发现RAN和CEL基因在高达80%的鼻咽癌组织中高表达.进一步将网络分析结果和ArrayXPath软件分析的结果比较,共计有40%(32/80)基因结果吻合,这验证了网络分析方法的有效性和可行性.最终探索建立了新的分析基因芯片的方法.
- 李辉张宏波杨旭宇王磊周文任彩萍
- 关键词：鼻咽癌微阵列信号通路
- 改写网卡启动芯片完善计算机实验室的维护被引量：3
- 2004年
- 总结目前计算机实验室各种维护方法的利弊,并通过修改网卡启动芯片启动程序,使网卡启动顺序适合有盘工作站,结合硬盘还原卡和网络远程启动的功能做到完全不开箱完成计算机实验室的维护。
- 王磊熊壮姚开泰
- 关键词：计算机实验室网卡
