赵丽伟
- 作品数：5 被引量：30H指数：3
- 供职机构：昆明理工大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划云南省中青年学术和技术带头人后备人才项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 拟南芥Dof1基因原核表达载体的构建及应用被引量：1
- 2013年
- 【目的】构建拟南芥转录因子Dof1基因的原核表达载体,进行原核表达并制备其蛋白抗体。【方法】利用RT-PCR方法从拟南芥中克隆转录因子Dof1基因,将其连接到原核表达载体pET-32a(+)上,构建重组原核表达载体pET32a(+)-Dof1,经酶切鉴定和测序验证后将其转化至大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导后,纯化重组蛋白,以分离到的重组蛋白为抗原免疫小鼠制备抗血清,检测植物中Dof1蛋白表达水平。【结果】成功构建了拟南芥转录因子Dof1基因的原核表达载体pET32a(+)-Dof1,在28℃、1mmol/L IPTG诱导6h的大肠杆菌中可高效表达分子质量约为42ku的重组蛋白,其分泌到细胞质中,不形成包涵体;Western-blotting检测结果证明,制备的抗血清有较好的抗原-抗体识别反应。【结论】成功实现了Dof1基因的原核表达,制备出的重组蛋白Dof1多克隆抗体可用于植物Dof蛋白表达水平的检测,可为Dof1基因的进一步研究奠定基础。
- 王艺霖赵丽伟李昆志
- 关键词：DOF转录因子原核表达
- 不同基因型烤烟的钾素营养特性被引量：14
- 2012年
- 基因型差异是影响烟叶产量和质量的重要因素之一。本试验以74种烤烟品种(系)为试验材料,在无菌条件下研究低钾(0.05 mmol/L)、中钾(2.50 mmol/L)和高钾(20.00 mmol/L)3种钾浓度下各烤烟品种的钾素营养特性。结果表明:低钾处理抑制了烟草生长,其地上部鲜重、干重均低于高钾和中钾处理。随着钾浓度的降低,烟叶钾含量明显降低。对74种烤烟叶片钾含量进行聚类分析,结果表明,22种烤烟为富钾基因型烤烟,45种烤烟为高钾基因型烤烟,7种烤烟为低钾基因型烤烟。
- 王艺霖赵丽伟肖炳光李昆志
- 关键词：烤烟基因型钾含量
- 激光镊子拉曼光谱检测重组大肠杆菌表达蚕豆14-3-3b可溶性蛋白与包涵体蛋白被引量：8
- 2013年
- 采用激光镊子拉曼光谱(LTRS)分析大肠杆菌(Escherichia.coli)表达蚕豆(Vicia faba L.)14-3-3b可溶性蛋白(Soluble protein)与包涵体蛋白(Inclusionbody protein)的结构差异以及两种蛋白在不同温度下在重组菌中的表达水平。结果表明,14-3-3b可溶性蛋白与包涵体蛋白有明显不同的拉曼光谱特征峰,说明LTRS技术可以鉴定14-3-3b的可溶性蛋白和包涵体蛋白。14-3-3b可溶性蛋白特征峰1002,1451和1665 cm!1在16℃下诱导的重组菌中明显增强,在28℃下诱导的重组菌中明显减弱,而反映14-3-3b包涵体蛋白的特征峰900和1446 cm!1在16℃下诱导的重组菌中明显减弱,在28℃下诱导的重组菌中明显增强,这几个峰强的变化反映14-3-3b可溶性蛋白与包涵体蛋白在大肠杆菌细胞中表达水平的变化和SDS-PAGE电泳分析的结果一致。说明LTRS是检测单个大肠杆菌细胞中可溶性重组蛋白和包涵体蛋白表达水平的一种快速有效的方法。
- 周冰卢明倩赵丽伟黄庶识陈丽梅
- 关键词：大肠杆菌可溶性蛋白包涵体蛋白
- 茶园土壤耐酸铝酵母菌的分离鉴定及其耐铝特性的初步研究被引量：5
- 2011年
- 目的为研究铝毒及耐铝机制提供更好的模式生物材料和进一步研究耐铝机制提供依据。方法通过对云南龙陵县茶园土壤耐酸铝微生物的筛选、分离和纯化,筛选出一株Y31耐酸铝酵母。结果经D1/D2区域克隆测序获取全长26S rDNA区域序列,构建系统发育树,初步鉴定Y31为长形隐球酵母(Cryptococcus longus)。在LPM培养基及GM培养基上耐铝水平检测表明Y31分别能耐100 mmol/L和50 mmol/L铝。用不同铝浓度处理酵母菌后,进行FDA PI双染色并用荧光显微镜观察,当铝浓度达到100 mmol/L时,出现明显的细胞凋亡过程。结论本研究为铝毒和生物体耐铝机制提供了生物材料。
- 赵丽伟罗义勇谭浩年洪娟陈丽梅李昆志
- 关键词：耐酸铝酵母菌
- 酸性土壤中耐铝细菌的筛选鉴定及其耐铝能力分析被引量：2
- 2012年
- 以含有1 mmol/L Al3+的S-LB培养基作为筛选培养基,从酸性土壤中分离到13株耐铝的细菌菌株,选取其中6株进行形态学分析,结果观察到这些菌株的菌体均呈杆状,其中1株为革兰阳性反应,其余5株为革兰阴性反应。以细菌通用引物扩增这些菌株的16S rDNA并测序,将得到的序列与GenBank中的序列进行BLAST比对,利用MEGA 4.0软件,按照Neighbor-joining法构建系统进化树,这6个菌株分别与Enterobacter endosymbiont、Serratia marces-cens、Pantoea agglomerans、Enterobacter aerogenes、Bacillus subtilis和Enterobacter asburiae的亲缘关系最近。将这些菌株接种到加有2 mmol/L Al3+、pH 4.5的S-LB固体培养基上培养时,它们都能生长,说明这些菌株具有较好的耐铝能力,这些菌株为进一步研究细菌的耐铝机制提供了极好的材料。
- 王阁奇年洪娟赵丽伟陈丽梅
- 关键词：酸性土壤
