刘洁
- 作品数：6 被引量：7H指数：2
- 供职机构：河北医科大学第四医院更多>>
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- 表达CD40L基因的卵巢癌细胞诱导树突状细胞成熟及分泌Th1型细胞因子的作用机制被引量：2
- 2008年
- 目的探讨转染CD40L cDNA的卵巢癌细胞株OVHM对树突状细胞（DC）成熟、分化的影响及诱导其分泌细胞因子的机制。方法采用脂质体转染法将鼠全长CD40L基因转染人小鼠卵巢癌细胞株OVHM中，用C418筛选出表达CD40L基因的抗药性克隆细胞（CD40L-OVHM）。应用免疫磁珠分选并纯化小鼠骨髓DC。将DC与转染和未转染CD40L cDNA的OVHM细胞混合培养，流式细胞术检测DC细胞表面人主要组织相容性复合物Ⅰ类分子（MHC-Ⅰ）、Ⅱ类分子（MHC-Ⅱ）、CD80、CD86和CCR7的表达，逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测共培养细胞中自细胞介素（IL）-12、IL-23、IL-27、IL-18、γ干扰素（IFN-γ）、Mig基因的表达。结果DC与CD40L—OVHM细胞混合培养后可形成集落，且上调了DC细胞MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ、CD80、CD86、CCR7的共刺激分子和黏附分子的表达。在DC＋CD40L-OVHM组可检测到细胞因子IL-12、IL-23、IL-27、IL-18、IFN-γ、Mig基因的表达，而在DC组、DC＋0VHM组、CD40L-OVHM组、OVHM组未检测到这些基因的表达。结论表达CD40L的卵巢癌细胞促进了DC的成熟，诱导了Th1型细胞因子的分泌，这可能是转染CD40L基因的卵巢癌细胞产生抗肿瘤效应的机制之一。
- 张正茂张风华王喜梅张超刘洁顾来梅李全海单保恩田川雅敏
- 关键词：CD40L树突状细胞细胞因子
- 手霉素对人卵巢癌3AO细胞增殖和凋亡的影响被引量：3
- 2010年
- 目的:探讨手霉素对人卵巢癌3AO细胞体外增殖和凋亡的影响及其可能的作用机制。方法:MTT法检测手霉素对3AO细胞的增殖抑制作用;Giemsa染色、透射电子显微镜下观察及FCM分析手霉素对3AO细胞的凋亡诱导作用;FCM检测手霉素对3AO细胞ras、survivin和核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)(p65)蛋白表达的影响。结果:手霉素能显著抑制3AO细胞的增殖(P<0.05),并且这种抑制作用随着手霉素浓度的增加和作用时间的延长而增强。Giemsa染色和透射电子显微镜下观察发现,手霉素可诱导3AO细胞出现典型的凋亡形态学变化及超微结构改变。FCM分析结果显示,与对照组相比,手霉素诱导3AO细胞凋亡率明显增加(P<0.05),细胞周期中的G2/M期细胞也明显增加(P<0.05);3AO细胞的ras、NF-κB(p65)和survivin蛋白的表达水平明显下降(P<0.05)。结论:手霉素可明显抑制人卵巢癌3AO细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与下调细胞ras、NF-κB(p65)和survivin蛋白的表达有关。
- 张正茂顾来梅刘洁张超张风华康山单保恩王士杰
- 关键词：卵巢肿瘤基因表达细胞凋亡手霉素细胞
- 转染CD40配体的卵巢癌细胞株OVHM抗卵巢癌肝转移机制的研究
- 2009年
- 目的探讨转染CD40配体（CD40L）的卵巢癌细胞株OVHM（CIMOL—OVUM）体内抗卵巢癌肝转移的可能机制。方法6～8周龄的C57BL／6N×C3H／He杂交一代（B6C3F1）雌性小鼠5只，经小鼠脾脏内接种OVHM，应用HE染色法验证小鼠肝脾转移模型是否建立成功。将OVHM细胞、空载体DNA—pMKITneo—OVHM细胞和CD40L—OVHM细胞接种于B6C3F1小鼠的脾脏，应用流式细胞术，分析荷瘤小鼠脾细胞CD11C分子的表达情况；应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法，检测荷瘤小鼠脾脏细胞毒性T淋巴细胞（CTL）的杀伤活性；应用酶联免疫吸附试验（ELISA），检测荷瘤小鼠外周血血清中干扰素（IFN）-γ、肿瘤坏死因子（TNF）-α、白细胞介素（IL）-12、IL-4和IL—10的含量，并且观察小鼠脾脏和肝脏的成瘤情况及小鼠生存时间。结果经病理学证实，卵巢癌肝脾转移动物模型建立成功。CD40L—OVHM组中小鼠脾细胞CD11C阳性细胞率明显高于OVHM组和转染空载体DNA—pMKITneo—OVHM组。CD40L—OVHM组小鼠脾脏内CTL的特异性杀伤活性明显增强，小鼠外周血血清中IFN-γ、TNF-α和IL-12的含量明显升高，而IL-4和IL-10的含量则明显降低，与OVHM组和转染空载体DNA—pMKITneo—OVHM组相比，差异均有统计学意义（P〈0．05）。CIMOL—OVHM组小鼠的肝脏和脾脏重量均明显低于OVHM组和转染空载体DNA-pMKITneo—OVHM组，并且小鼠的生存期也明显延长（P〈0．05）。结论转染CD40L cDNA的卵巢癌细胞可促进脾脏树突状细胞（DC）的成熟和分化，增强脾脏CTL的特异性杀伤活性，诱导Th1型细胞因子的分泌，抑制Th2型细胞因子的分泌，这可能是CIMOL基因体内抗卵巢癌肝转移的机制之一。
- 张正茂刘洁张风华顾来梅张超陈书诚康山单保恩
- 关键词：CD40配体卵巢肿瘤
- 转染CD40L基因的卵巢癌细胞OVHM抗卵巢癌肝转移机制的研究
- 目的建立小鼠卵巢癌肝脾转移动物模型,探讨转染CD40LcDNA的卵巢癌细胞株OVHM(CD40LOVHM)体内抗卵巢癌肝转移的可能机制。方法6-8周龄的C57BL/6N×C3H/He杂交一代(B6C3F1)雌性小鼠,经小...
- 刘洁顾来梅张超张风华康山单保恩张正茂
- 关键词：CD40L小鼠模型卵巢癌杀伤活性
- 文献传递
- 手霉素联合顺铂对人卵巢癌细胞3AO的增殖抑制作用被引量：2
- 2011年
- 目的:研究手霉素联合顺铂对人卵巢癌细胞3AO体外增殖及裸鼠移植瘤生长的抑制作用,并探讨其机制。方法:MTT法检测手霉素及手霉素联合顺铂对3AO细胞的体外增殖抑制作用;建立人卵巢癌裸鼠移植瘤模型,采用免疫组织化学SP法检测手霉素及手霉素联合顺铂对移植瘤组织survivin、NF-κB、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)和caspase-3蛋白的表达,FCM检测移植瘤细胞周期和细胞凋亡率的变化。结果:手霉素对3AO细胞的增殖有明显抑制作用,且呈时间和剂量依赖效应(P<0.05)。手霉素可增强顺铂对3AO细胞的增殖抑制作用,随着手霉素浓度的增加(10～40 μmol/L),对3AO细胞的增殖抑制作用增强。手霉素或顺铂单药组以及联合用药组的裸鼠移植瘤体积均明显小于对照组,其中联合用药组裸鼠移植瘤体积明显小于手霉素或顺铂单药组(P<0.05)。各给药组裸鼠移植瘤组织中survivin、NF-κB和VEGF蛋白的表达水平均低于对照组(P<0.05),其中联合用药组又明显低于各单药组(P<0.05);各给药组caspase-3蛋白的表达水平均明显高于对照组(P<0.05)。手霉素单药组、顺铂单药组和手霉素联合顺铂组的细胞凋亡率依次升高,与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,G0/G1期细胞依次减少(P<0.05),G2/M期细胞依次增多(P<0.05),S期细胞变化不明显。结论:手霉素联合顺铂可明显抑制3AO细胞的体内外增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与下调survivin、NF-κB和VEGF以及上调caspase-3蛋白的表达有关。
- 张正茂兰静杨雪梅顾来梅刘洁张超张风华范玉香康山单保恩王士杰
- 关键词：手霉素顺铂SURVIVINCASPASE-3
- 手霉素对人卵巢癌细胞3AO体外作用机制的研究
- 目的研究手霉素(Manumycin)对人卵巢黏液性囊腺癌细胞3AO体外增殖的影响,分析手霉素抑制3AO细胞的增殖及诱导其凋亡的可能机制,探讨手霉素用于卵巢癌临床治疗的可行性。方法体外培养人卵巢癌细胞3AO,采用四甲基偶氮...
- 张正茂顾来梅刘洁张超康山单保恩
- 关键词：手霉素卵巢癌SURVIVINNF-ΚB
- 文献传递
