刘丽
- 作品数:2 被引量:6H指数:2
- 供职机构:重庆医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金重庆市教委科研基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 不同果糖喂养状态下大鼠肝脏的内参基因稳定性分析被引量:2
- 2017年
- 分析取材前不同果糖喂养(禁食给清水和禁食给果糖水)条件下,大鼠肝脏常用内参基因m RNA的稳定性,筛选出最适宜的内参,以保证实时荧光定量PCR(real-time PCR)结果的可靠性。长期给予10%果糖水建立非酒精性脂肪肝大鼠模型,在动物体重与饮用果糖量相等的情况下,取材前随机分成两组:禁食给清水组(Fru 1);禁食继续给果糖水组(Fru 2);正常对照组(Con)自由饮清水。提取肝脏样本RNA,取等量RNA逆转录合成c DNA,real-time PCR检测18S、GAPDH、ACTB和TBP含量变化,分别利用ge Norm程序和Bio-Rad CFX Manager软件分析这几个基因的稳定性。ge Norm分析得到的稳定性排序为:ACTB>GAPDH>TBP>18S。Bio-Rad CFX Manager软件稳定性排序为:ACTB>TBP>GAPDH>18S。两个软件均得到ACTB最为稳定,TBP次之。然而经3次重复逆转录基因表达分析,相对于Con组和Fru1组,Fru 2组ACTB与GAPDH明显升高,18S略有下降,TBP在3组间比较稳定。结合肝脏脂质合成相关的两个关键基因Ch REBP,SREBP1c表达变化分析,分别以这4种基因为内参计算这两个基因在3组间的含量变化。只有以GAPDH为内参时,Fru 2组Ch REBP表达量相对于Fru 1没有明显上升,其它的表达趋势一致,只是含量高低有所区别。因此,我们认为TBP和ACTB均可作为不同果糖喂养状态下大鼠肝脏的内参基因。
- 王尚姚玲马朋蒋丽蓉柯大智刘丽李金秀姜蓉王建伟
- 关键词:REAL-TIME内参基因NORM非酒精性脂肪肝果糖
- 6-姜辣素改善老年大鼠脂肪组织胰岛素抵抗的研究被引量:4
- 2022年
- 研究6-姜辣素改善自然衰老糖脂代谢紊乱大鼠脂肪组织胰岛素抵抗的作用。将27只老年雄性SD大鼠随机分为3组(每组9只):老年模型组(aged)、6-姜辣素低剂量组(G-L,0.05 mg·kg^(-1))和6-姜辣素高剂量组(G-H,0.2 mg·kg^(-1)),另6只青年雄性SD大鼠作为青年对照组(NC),各组大鼠灌胃给药7周。ELISA法检测血浆游离脂肪酸(NEFA)和胰岛素的含量,计算脂肪组织胰岛素抵抗指数(Adipo-IR);采用HE染色法检测附睾周围脂肪组织(eWAT)脂肪细胞的大小;Western blot法检测附睾周围脂肪组织中脂联素(adiponectin,APN)信号通路、胰岛素信号通路和炎症因子相关蛋白如脂联素受体1(adiponectin receptor 1,AdipoR1)、腺苷酸活化蛋白激酶α(AMPKα)、磷酸化AMPK(苏氨酸172位点)(AMPKα;)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助激活因子-1α(PGC-1α)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、总蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(丝氨酸473位点)(p-Akt^(Ser473))、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C-Jun氨基末端激酶1/2(JNK1/2)、磷酸化JNK1/2(苏氨酸183/络氨酸185位点)(p-JNK^(Thr183/Try185))、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)的蛋白质表达;real-time PCR法检测它们基因的表达水平。结果显示,高剂量6-姜辣素给药7周可显著降低禁食血浆NEFA和胰岛素的含量,降低脂肪组织胰岛素抵抗指数;高剂量6-姜辣素组显著升高eWAT中APN、AdipoR1、PGC-1α、PI3K蛋白和mRNA的表达,以及p-AMPK;、p-Akt^(Ser473)的相对表达,显著降低eWAT中TNF-α、IL-1、IL-6蛋白和mRNA的表达,以及p-JNK1、p-JNK2的相对表达;结果说明6-姜辣素能够改善糖脂代谢紊乱大鼠的脂肪组织胰岛素敏感性,其机制可能与增强PI3K/Akt信号通路、抑制脂肪组织的炎症、增加脂肪组织APN的合成、增强AdipoR1的表达并激活其下游AMPK/PGC-1α信号通路有关。
- 詹权操刘宇哲席雨蒙曾颜田伽瑜刘丽李冬JOHJI Yamahara王建伟
- 关键词:胰岛素抵抗APN脂联素受体1