刘冠
- 作品数：14 被引量：50H指数：3
- 供职机构：首都医科大学附属北京胸科医院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项北京市科技新星计划北京市卫生系统高层次卫生技术人才培养项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 发光二极管荧光显微镜实验室诊断效果评价被引量：27
- 2010年
- 目的评估发光二极管荧光显微镜实验室诊断结核分枝杆菌的能力。方法收集409痰标本,以固体罗氏培养为金标准,比较发光二极管荧光显微镜与普通光学显微镜、普通荧光显微镜在敏感性、特异性及检出时间上的差异,并比较技术人员对几种方法的评价。结果罗氏培养阳性的175份痰标本中,普通光学显微镜法112份为阳性,普通荧光显微镜法121份为阳性,发光二极管荧光显微镜法130份为阳性,敏感性分别为64.0%,69.1%,74.3%;罗氏培养阴性的234份痰标本中,普通光学显微镜法233份为阴性,荧光显微镜法227份为阴性,发光二极管荧光显微镜法227份为阴性,特异性分别为99.6%,97.0%,97.0%。χ2检验统计结果表明,发光二极管荧光显微镜与普通光学显微镜、普通荧光显微镜检测结果差异有统计学意义(P<0.001)。普通光学显微镜、普通荧光显微镜和发光二极管荧光显微镜读片所用的读阳性片时间分别为186.7 s、75.1 s、72.2 s,发光二极管荧光显微镜与普通光学显微镜在读阳性片时间上差异有统计学意义(P<0.05),与普通荧光显微镜差异无统计学意义。参与研究的技术员评价发光二极管荧光显微镜较其他2种方法易接受。结论发光二极管荧光显微镜较普通光学显微镜及普通荧光显微镜在检查效果及检出时间上存在明显优势,对技术人员的亲和性好,具有推广使用的价值。
- 尚美刘冠赵立平夏辉姜广路黄海荣赵雁林
- 肺结核患者呼吸道菌群研究简述被引量：3
- 2010年
- 刘冠赵雁林
- 关键词：肺结核患者呼吸道菌群难治性肺结核结核病控制耐药结核病肺结核病
- 中国首株副瘰疬分枝杆菌临床分离株的生物学特征和毒力研究被引量：2
- 2016年
- 目的 对中国肺病患者体内首次分离到的1株副瘰疬分枝杆菌进行了生物学特征与毒力研究,以提高对该分枝杆菌的认识.方法 2013年对源于2007 2008年全国耐药基线调查的140株非结核分枝杆菌（NTM）,通过联合测定16S rRNA、16S～23S rRNA间隔区（ITS）和hs筇5基因序列进行菌种鉴定,分离到1株副瘰疬分枝杆菌.通过开展一系列标准生化试验,包括生长试验、硝酸还原酶测定、芳基硫酸酯酶测定、碲酸钠还原试验、吐温水解试验、尿素酶试验,以及在50 mg/ml对硝基苯甲酸（PNB）、10 mg/ml噻吩-2-羧酸肼（TCH）、5％ NaCl和麦康凯琼脂上进行生长试验,阐明其生物学特征.通过Alamar blue微量稀释法测定其对利福平、乙胺丁醇、异烟肼、阿米卡星、磺胺甲恶唑、氧氟沙星、对氨基水杨酸、利福喷丁、卷曲霉素、头孢西丁、亚胺培南、米诺环素、多西环素、克拉霉素、阿奇霉素、美罗培南、甲氧苄氨嘧啶、利福布汀、利奈唑胺、链霉素、丙硫异烟胺、莫西沙星和左氧氟沙星共23种抗生素的药物敏感性.为了研究副瘰疬分枝杆菌的毒力,通过尾静脉和腹腔注射两种途径感染C57BL/6小鼠,在小鼠感染后的第2、4、8周取肺脏和脾脏检测细菌载量和病理组织学变化,确定其对小鼠的致病性.结果 该株副瘰疬分枝杆菌在37℃生长旺盛,菌落光滑并呈半球形,呈黄至橘黄色.在体外对利福布丁、利福喷丁、克拉霉素、阿奇霉素、头孢西丁和莫西沙星敏感.在C57BL/6小鼠感染后的第2周,病理组织学结果显示小鼠肺组织出现局限性炎症反应,表现为外周支气管炎性渗出.在感染后的第4和第8周,肺组织表现为外周支气管炎性渗出伴有大量炎性细胞聚集,部分组织有肉芽肿生成,但无坏死.在小鼠感染的8周时间内,肺组织和脾组织中细菌载量呈逐渐上升趋势.结论 该副瘰疬分枝杆菌在体外对利福布汀、利福喷�
- 王桂荣刘冠于霞陈素婷梁倩尚媛媛郑素华黄海荣
- 关键词：药物敏感性试验
- 一株M.chimaera临床分离株的鉴定、药物敏感性和毒力分析
- 目的 对我国首株临床分离获得的非结核分枝杆菌M.chimaera进行生化鉴定、药物敏感性和毒力检测,为临床诊断和治疗提供科学依据.方法 通过传统培养的鉴定方法并结合生化试验对一株临床分离株进行表型特点的研究.高效液相色谱...
- 陈素婷刘冠梁倩付育红黄海荣
- 关键词：菌种鉴定药物敏感性毒力
- 文献传递
- DNA测序鉴定分枝杆菌菌种的研究进展被引量：3
- 2015年
- 分枝杆菌包括MTB复合群、麻风分枝杆菌和非结核分枝杆菌.截至2014年9月已经通过文献报道证实的分枝杆菌及其亚群有169种（http：//www.bacterio.net/mycobacterium.html）,而各种分枝杆菌感染性疾病的症状和影像学表现十分相似,但治疗却不尽相同.快速、准确鉴定分枝杆菌菌种是诊断和治疗各种分枝杆菌感染性疾病的关键.传统的分枝杆菌菌种鉴定方法依赖细菌学的特点和生化反应,不仅耗时、操作繁琐且可靠性较低.随着分子生物学技术的发展,DNA测序鉴定菌种方法目前已经成为菌种鉴定的“金标准”.DNA测序鉴定分枝杆菌菌种的方法依据不同种分枝杆菌的某些同源DNA片段具有种特异性来鉴定分枝杆菌至种水平[1],此方法分辨能力较高,且可缩短检测时间.为了提高对DNA测序鉴定菌种方法的认识,现将其在分枝杆菌菌种鉴定领域的现状及研究进展综述如下.
- 刘冠李琦黄海荣
- 关键词：非结核分枝杆菌DNA测序菌种鉴定分子生物学技术麻风分枝杆菌
- rRNA扩增方法对结核分枝杆菌临床诊断作用的评估被引量：8
- 2010年
- 目的评价rRNA扩增方法在临床应用的效果。方法选取到北京胸科医院、山东省胸科医院、河南疾控中心结核病防治所3个机构就诊的肺结核可疑症状者及健康志愿者的痰标本为研究对象,共纳入551例痰标本,对每例痰标本均进行涂片显微镜检查、罗氏培养、rRNA扩增试验以及实时荧光定量PCR。与罗氏培养方法比较分析rRNA扩增方法的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值以及与实时荧光定量PCR扩增方法的一致性。结果 rRNA扩增方法的敏感性为98.5%,特异性为95.0%,阳性预测值为95.0%,阴性预测值为98.5%,rRNA扩增方法在涂阳标本和涂阴标本间的敏感度和特异度差异均有统计学意义(χ2=9.60,P=0.002;2χ=79.80,P<0.01)。与PCR检测结果的一致性为93.8%,涂阳和涂阴标本中2种方法的一致性差异有统计学意义(2χ=4.45,P=0.035)。结论 rRNA扩增方法的敏感度和特异度均较好,且能明显缩短诊断时间,该方法是一种较有前景的结核病实验室诊断方法。
- 夏辉尚美刘冠李辉王海英闫国蕊杨红艺马晓光景辉赵雁林
- 薄层凝胶TLA+PNB法培养和鉴定结核杆菌的应用评价被引量：2
- 2010年
- 目的通过与L-J固体培养,16SrDNA核酸序列测序方法比较,评价一种快速结核分枝杆菌培养和鉴定方法(薄层凝胶TLA+PNB)的应用价值。方法实验样本来源于北京胸科医院疑似结核病例,包括痰样本和气管分泌物。所有的样本用NaOH/NALC方法前处理,然后离心用PBS中和后接种于L-J固体培养基和TLA+PNB固体培养基上。对培养阳性的标本,水煮法提取DNA后PCR扩增16S rDNA核酸序列并测序。最后分别计算2种培养基的敏感度,特异度,培养时间,污染率和TLA+PNB菌种鉴定的敏感度,特异度。结果实验共包含211份临床样本。对于抗酸染色阳性的标本,培养阳性率为77.4%,而对于抗酸染色阴性的标本,L-J和TLA培养阳性率均为8.2%。TLA和L-J敏感度均为84.2%,特异度均为100%。TLA+PNB培养基在48例培养阳性的标本中发现8例NTM,敏感度为88.9%,特异度为100%。污染率TLA和L-J分别为4.7%和1.2%。平均报告阳性结果时间TLA和L-J分别为10.6 d和22.9 d(P<0.001)。结论 TLA+PNB培养和鉴定方法是一种快速、可靠、廉价的结核分枝杆菌诊断方法。在基层实验室中,有很好的推广价值。
- 戴广明夏辉马异峰刘冠李云絮尚媛媛付育红赵雁林
- 关键词：细菌学技术凝胶类
- 我国首株副瘰疬分枝杆菌临床分离株的药物敏感性和小鼠致病性研究
- 背景 非结核分枝杆菌感染与结核分枝杆菌感染在临床表现上难于区分,因此对非结核分枝杆菌进行准确的鉴别诊断对于疾病的治疗和控制十分重要.副瘰疬分枝杆菌在2004年由加拿大首次分离报道,为暗产色、慢生长分枝杆菌,表型特征与瘰疬...
- 王桂荣刘冠郑素华黄海荣
- 文献传递
- 反义寡脱氧核苷酸对耻垢分枝杆菌抑制作用的研究
- 2009年
- 目的研究反义寡脱氧核苷酸对耻垢分枝杆菌生长的抑制作用，探讨其潜在的抗结核作用。方法在7H9培养基中接种5×10^5 CFU耻垢分枝杆菌MC^2 155，同时加入20μmol／L针对结核分枝杆菌中必须基因Rv3806c在耻垢分枝杆菌中的同源基因MSMEG_6401的反义寡脱氧核苷酸。以耻垢分枝杆菌MC^2 155单独培养作为对照。观察和绘制细菌生长曲线；测定细胞膜MSMEG_6401编码的磷酸核糖转移酶的生物活性；应用高压气相色谱测定耻垢分枝杆菌细胞壁中糖的含量。结果anti-ODNs作用6d后的耻垢分枝杆菌平均吸光度值（A值）为0.84±0.09；而野生型耻垢分枝杆菌平均A值为1.27±0.01，试验组耻垢分枝杆菌较对照组增殖速度平均降低0.45（P〈0.01）；anti-ODNs作用6d后耻垢分枝杆菌平均CFU计数的对数值为8.27±0.19；而野生型耻垢分枝杆菌平均CFU对数值为8.89±0.14，试验组耻垢分枝杆菌较对照组增殖速度平均降低0.62个log单位；在应用等量的膜蛋白的情况下，实验组磷酸核糖转移酶的生物活性降低约40％；试验组和对照组细菌反映细胞壁糖含量的指标甘露糖-半乳糖／阿拉伯糖比值没有明显差异（2组实验组分别为0.63和0.69；2组对照组分别为0.67和0.69）。结论针对MSMEG_6401的反义寡脱氧核苷酸对耻垢分枝杆菌的增殖有一定程度的抑制作用，推测反义寡脱氧核苷酸技术有一定抗结核价值；结核分枝杆菌的Rv3806c基因或是其编码产物可能是一个好的抗结核药物作用靶位。
- 黄海荣赵雁林张宗德于霞刘冠
- 关键词：寡脱氧核糖核苷酸类反义分枝杆菌耻垢分枝杆菌
- 核糖体蛋白S1基因作为分枝杆菌菌种鉴定靶基因的研究
- 2016年
- 【摘要】目的：评估编码核糖体蛋白S1的基因（rpsA基因）作为分枝杆菌菌种鉴定靶基因的准确性和可靠性。方法：PCR扩增42株分枝杆菌标准株、172株非结核分枝杆菌临床分离株和16株结核分枝杆菌临床分离株的rpsA基因，
- 段鸿飞刘冠王晓波付育红梁倩尚媛媛初乃惠黄海荣
- 关键词：非结核分枝杆菌核糖体蛋白菌种鉴定靶基因S1基因临床分离株
