李慧
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：中国医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 多壁碳纳米管抑制RAW264.7巨噬细胞的吞噬功能
- 2014年
- 目的观察多壁碳纳米管(MWCNT)对巨噬细胞吞噬功能的影响。方法采用常规细胞培养技术培养RAW264.7巨噬细胞;用流式细胞术定量检测RAW264.7巨噬细胞吞噬异硫氰酸荧光素标记的大肠杆菌(FITC-tagged E.coli k-12)的情况。结果 MWCNT剂量依赖性地抑制RAW264.7细胞吞噬大肠杆菌,随着MWCNT浓度的增加,RAW264.7细胞吞噬大肠杆菌的量(用平均荧光强度表示)降低。此外,MWCNT抑制RAW264.7细胞吞噬大肠杆菌亦呈时间依赖性:用MWCNT(75μg/ml)孵育RAW264.7细胞12h后,RAW264.7细胞吞噬大肠杆菌的量与对照组相比降低了约70.4%(P<0.01),同时参与吞噬活动的RAW264.7细胞的百分比也从对照组的98.6%降低到了92.4%(P<0.05)。即使用低剂量的MWCNT(25μg/ml)孵育RAW264.7细胞较长时间(24h)后,RAW264.7细胞吞噬大肠杆菌的量与对照组相比仍降低了约77.1%(P<0.01),同时参与吞噬活动的RAW264.7细胞的百分比也从71.2%降低到了43.4%(P<0.01)。用脂多糖(LPS,10μg/ml)激活RAW264.7细胞后,其吞噬能力明显增强,而MWCNT仍可剂量依赖性地抑制LPS激活的RAW264.7细胞的吞噬能力,与LPS组相比,MWCNT(75μg/ml)和LPS共孵育组吞噬大肠杆菌的量降低了70.9%(P<0.01)。结论 MWCNT可明显抑制RAW264.7巨噬细胞的吞噬功能。
- 李慧祝红闫莉谷婧丽郝维曹济民
- 关键词：多壁碳纳米管巨噬细胞大肠杆菌流式细胞术
- 钙激活钾通道KCa3.1对巨噬细胞吞噬功能的抑制性调节作用被引量：1
- 2013年
- 目的观察巨噬细胞膜的钙激活钾通道KCa3.1与吞噬功能的关系。方法通过光镜下半定量观察RAW264.7巨噬细胞吞噬鸡红细胞,以及采用流式细胞术定量检测RAW264.7巨噬细胞吞噬异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)标记的大肠杆菌(FITC-tagged E.coli)等方法,研究正常RAW264.7细胞的吞噬活动,以及阻断KCa3.1通道后RAW264.7细胞吞噬能力的改变。结果光镜检测结果显示,未受吞噬刺激因子激活的对照RAW264.7细胞对鸡红细胞有较弱的吞噬能力,其吞噬率为1.67%±0.29%;用KCa3.1通道选择性阻断剂TRAM-34(20nmol/L)处理RAW264.7细胞后,吞噬率增高至5.08%±0.38%,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01),且单个RAW264.7细胞吞噬鸡红细胞的个数也明显增加。流式细胞术结果显示,阻断KCa3.1通道后,RAW264.7细胞吞噬FITC标记的大肠杆菌的数量明显增多,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论 KCa3.1通道的活动对RAW264.7巨噬细胞的吞噬活性有抑制性调节作用。
- 祝红刘枭李慧闫莉郝维曹济民
- 关键词：钙激活钾通道巨噬细胞鸡红细胞大肠杆菌
- Ku70作为RNA解旋酶调节miR-124的加工成熟及神经细胞的分化
- 2024年
- 目的Ku70蛋白主要通过其DNA结合特性参与双链DNA断裂(DSB)的非同源端连接(NHEJ)修复,有报道称其具有RNA结合功能,本文探索Ku70是否具有RNA解旋酶活性并影响miRNA加工成熟。方法利用RNA免疫共沉淀(RIP)测序结合生物信息学分析Ku蛋白结合的RNA;蛋白质印迹法(Western blot,WB)结合定量反转录PCR(qRTPCR)检测Ku蛋白与miRNAs的表达关系;生物膜干涉技术(BLI)实验分析Ku蛋白与RNA的结合能力;电泳迁移率变动分析(EMSA)实验确定Ku70及Ku80的RNA解旋酶活性;形态学检测结合WB分析Ku70调节miR-124引起的神经细胞功能变化;免疫荧光结合形态学分析寨卡病毒(ZIKV)感染后Ku70及miR-124的变化与神经元分化关联。结果研究发现,Ku70蛋白具有RNA解旋酶活性,并通过其RNA解旋酶活性影响miRNA加工成熟。Ku70缺失引起许多miRNAs上调,其中包括神经细胞特异的miR-124。在人神经前体细胞(h NPCs)和人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)中敲低Ku70可促进miR-124的成熟,从而导致上述细胞向神经元分化。本文进一步发现,ZIKV感染影响了Ku70及miR-124的表达,导致细胞形态的分化。结论本研究揭示了Ku70的一种新功能,即Ku70有可能参与miRNA的成熟调控和神经细胞的分化,并且可能是ZIKV病毒致小头症的原因之一。
- 黄皑雪李睿婷赵越超李洁李慧丁学锋王琳肖参刘雪梅秦成峰邵宁生
- 关键词：KU70RNA解旋酶神经元分化
