高钰 作品数:6 被引量:17 H指数:3 供职机构: 解放军309医院 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 国家自然科学基金 北京市自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
小鼠肾脏特异性miR-29c表达载体的构建与鉴定 被引量:1 2015年 目的构建载体实现miR-29c在肾脏组织的特异性表达。方法分别以质粒pc DNA 3.1(+)和小鼠基因组DNA为模板,扩增CMV增强子序列和肾脏特异性钙黏着素蛋白KSP-cadherin启动子序列;将连接成的单一片段酶切后替换p CAGGS载体上的CAG启动子构成目的载体p CMV-KSP。将GFP编码区序列或小鼠miR-29c前体及两侧序列克隆到构建的载体上观察转染后目的基因的表达。结果从相应的模板上扩增出的序列经验证后连接到了p CAGGS载体上,转染细胞后在荧光显微镜下观察到KSP启动子调控下的GFP在MDCK中表达,而在NIH-3T3细胞中仅见微弱荧光。p CMV-KSP-p CAGGS-miR-29c载体较对照载体在转染人胚肾293T细胞24 h后,成熟miR-29c的表达显著升高,其靶基因bcl-2表达相应降低。结论构建KSP启动子调控miR-29c表达的载体,为构建肾脏特异性表达miR-29c转基因小鼠,进一步研究miR-29c在肾移植后的各种病理过程中的作用奠定了基础。 黄海燕 肖漓 何秀云 许晓光 樊文梅 魏玉香 马锡慧 孔祥瑞 韩永 高钰 王新颖 石炳毅关键词:转录启动子 肾移植 微RNAS 钙黏着糖蛋白类 肾移植术后淋巴细胞亚群的变化与移植肾功能恢复状况分析 被引量:4 2015年 目的分析肾移植术后淋巴细胞亚群的变化与移植肾功能恢复状况的关系。方法收集2013年9月—2014年3月收治的40例术后2周未发生感染或排斥反应的肾移植受者,术后7 d血肌酐值仍>400μmol/L的病例为延迟恢复组(n=12),其余为功能稳定组(n=28)。分别采术前、术后3、7、14 d静脉血,监测T、B淋巴细胞亚群百分比及绝对计数。结果 T、B淋巴细胞和自然杀伤细胞(NK)百分比及绝对计数在功能稳定组与延迟恢复组中有不完全相同的变化趋势;CD4+/CD8+比值变化也不明显。与功能稳定组相比,延迟恢复组术后3 d外周血CD3+百分比明显下降,NK百分比明显升高(P<0.05);术后7 d CD3+和CD4+百分比及绝对计数均明显下降(P<0.05);术后14 d CD4+和CD4+/CD8+比值明显下降(P<0.05)。结论监测肾移植受者T、B淋巴细胞亚群百分比及绝对计数有助于指导免疫抑制药物的合理应用。 高钰 肖漓 何秀云 黄海燕 樊文梅 魏玉香 马锡慧 孔祥瑞 韩永 许晓光 王新颖 石炳毅关键词:肾移植 B淋巴细胞亚群 T淋巴细胞亚群 肾移植受者红细胞CD35、CD58、CD59表达变化 被引量:3 2015年 目的观察肾移植受者移植前后外周血红细胞膜表面CD35、CD58、CD59的表达情况。方法选择2013年1月—2015年1月肾移植受者25例及健康体检者25例,采用流式细胞术对肾移植术前、术后3、7、14 d外周血红细胞膜表面免疫分子CD35、CD58、CD59进行检测,观察红细胞免疫功能的变化情况。结果肾移植受者术前CD35、CD59表达明显低于对照组(P<0.05,P<0.01),CD35术后14 d明显低于术前,CD58术后3 d高于术前和术后14 d(P<0.05)。结论肾移植受者术前红细胞免疫功能低下,术后有所改善。红细胞免疫参与肾移植受者机体免疫功能的调节。 孔祥瑞 肖漓 刘志佳 高钰 毕丽丽 马锡慧 裴艳宏 白剑 石炳毅关键词:肾移植 红细胞 供者特异性抗体在肾移植中的作用研究进展 2015年 目前在临床中,肾衰竭有效的治疗方法之一就是肾移植。随着20世纪中期该技术的兴起,人们就对器官移植排斥反应原因展开过争论。主要以Peter Gorer和Medawar两方为代表的理论。前者认为是抗体抗原结合致其排斥反应;而后者则认为T细胞在排斥反应中起着举足轻重的作用。在随后的一段时期中,器官移植免疫学也快速发展起来。加上临床外科诊疗技术不断改善, 马锡慧 肖漓 裴艳宏 孔祥瑞 刘志佳 高钰 毕丽丽 白剑 石炳毅关键词:肾移植 抗体特异性 移植物排斥 趋化性细胞因子在肾移植排斥反应中的临床应用价值 被引量:3 2014年 目的探讨趋化性细胞因子在肾移植排斥反应中的临床应用价值。方法选取2011年1-12月在解放军第309医院全军器官移植研究所进行同种异体肾移植术的患者21例[分为急性排斥反应(AR)组(n=11)、功能稳定组(F组,n=10)]和健康志愿者10例(C组,n=10)。分别于术前1d,术后第1、7、14、28天以及排斥反应发生时应用流式微球捕获技术(CBA)检测患者血浆中单核趋化蛋白-1(MCP-1)、调节激活正常T细胞表达分泌因子(RNATES)、中性粒细胞激活蛋白-1(NAP-1/IL-8)、IFN-γ诱生单核因子(MIG)和IFN-γ诱导蛋白-10(IP-10)的表达情况;并采用Spearman相关分析趋化细胞因子与肌酐水平的相关性。结果与健康志愿组相比,肾移植患者术前MCP-1、MIG、IP-10水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);IL-8和RANTES无明显差异(P>0.05)。AR发生时,AR组患者的MCP-1、IL-8、MIG、IP-10与F组比较明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),而两组RANTES差异无统计学意义(P>0.05)。趋化性细胞因子与肌酐的相关性分析发现,IL-8和MIG与肌酐均呈正相关[r分别为0.4896、0.6245(P<0.01)],MCP-1、RNATES、IP-10与肌酐无显著相关性(P>0.05)。结论趋化性细胞因子在肾移植排斥反应中发挥重要作用,肾移植术后应监测其变化情况。 肖漓 何秀云 周文强 樊文梅 魏玉香 王新颖 高钰 马锡慧 孔祥瑞 韩永 许晓光 黄海燕 石炳毅关键词:炎症趋化因子类 肾移植 移植物排斥 肝癌肝移植术后西罗莫司转换治疗的免疫学效应分析 被引量:6 2017年 目的探讨以西罗莫司为主的联合免疫治疗方案(SCTR)对肝癌肝移植受者体内调节性T细胞(Treg)和效应性T细胞表达的影响。方法对2010年1月—2015年6月收治的应用SCTR干预的肝癌肝移植28例的临床资料进行回顾性分析,观察术后不同时间点CD3、CD8+的表达,并对其与Treg的表达进行相关性分析。结果 SCTR干预下,肝癌肝移植受者术后12个月内,Fox P3+Treg的比例从术前峰值降低到术后1个月谷值,随后逐渐升高,3个月时在正常值水平(P>0.05),术后12~18个月水平逐步维持在较低水平,与正常水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。术前、术后12和18个月Fox P3+Treg和CD3、CD8+T淋巴细胞的变化呈反向趋势。Fox P3+Treg与CD3和CD8的表达水平呈负相关(r=-6.37、-7.12,P<0.001)。肝癌肝移植术后白介素-10、β型转化生长因子和甲胎蛋白水平均较术前显著降低(P<0.05),且其变化与Treg呈正相关。结论 SCTR可降低肝癌肝移植术后Fox P3+Treg、IL-10、TGF-β的表达,并不增加排斥反应,临床应用安全、有效。 周林 郑永根 杜国盛 肖漓 潘立超 高钰 孔祥瑞 朱志东 宋继勇 史海达 杨绍瑧 索龙龙 蒙轩关键词:西罗莫司 联合免疫治疗 肝肿瘤 肝移植