陈伟
- 作品数：31 被引量：80H指数：5
- 供职机构：娄底市中心医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金娄底市科技计划项目兵团博士基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 实时定量PCR技术检测结核分枝杆菌蛋白编码基因表达水平研究被引量：1
- 2012年
- 目的运用实时定量PCR(qRT-PCR)检测66株结核分枝杆菌蛋白编码基因(fbpB,psts1,mpt64)的表达水平,探讨结核分枝杆菌耐药菌株与敏感菌株,北京基因型菌株与非北京基因型菌株的蛋白抗原在转录水平的差异。方法根据GenBank提供的序列,设计特异性引物,扩增目的基因片段,克隆入载体,重组质粒经纯化及梯度稀释,应用qRT-PCR检测基因的表达水平。结果北京基因型菌株psts1基因表达水平与非北京基因型菌株比较差异有统计学意义(t=3.721,P<0.01);耐药菌株mpt64基因表达水平与敏感菌株比较差异有统计学意义(t=3.951,P<0.01)。结核分枝杆菌活菌的扩增曲线呈典型的S型,结核分枝杆菌死菌和非结核分枝杆菌呈水平直线,未检测到荧光信号。结论北京基因型结核分枝杆菌psts1基因的表达量低于非北京基因型,结核分枝杆菌耐药菌株mpt64基因的表达量低于敏感株。
- 陈伟刘艳杨紧根刘金菊王远志袁俐
- 关键词：结核分枝杆菌
- 结核分枝杆菌新疆临床分离株耐药情况调查被引量：8
- 2010年
- 目的分析新疆部分地区结核分枝杆菌(MTB)临床分离株对抗结核药物的耐药情况,探讨本地区耐药结核病的发生率及特点。方法收集2008年11月～2009年10月新疆喀什、和田、皮山等南疆地区确诊的结核病患者痰液标本,进行MTB的分离培养及菌种初步鉴定,并应用比例法对分离菌株进行耐药性检测,与本课题组所做北疆地区耐药情况进行比对。结果共分离到102株分枝杆菌,88株(86.3%)属于结核分枝杆菌复合群,7株(6.9%)属于牛分枝杆菌,7株(6.9%)属于非结核分枝杆菌。88株结核分枝杆菌中对1种以上抗结核药物具有耐药性的有20株,总耐药率为22.7%(20/88),MDR-TB为6.8%(6/88)。新疆南疆地区4种一线抗结药物的耐药率:H15.9%、R8.0%、S12.5%、E3.4%,明显低于新疆北疆地区抗结药物的耐药率:H53.3%、R28.5%、S48.4%、E46.8%。结论新疆南疆地区结核总耐药率有所下降,耐多药率有上升趋势,在结核病防治工作中应给予高度重视;新疆南、北疆地区耐药情况不同,北疆耐药率明显高于南疆地区。
- 曹红艳吴长东米利古刘佩芝陈伟王远志李永祥袁俐
- 关键词：耐药性耐多药结核分枝杆菌
- 结核分枝杆菌双组分系统的研究进展被引量：3
- 2010年
- 陈伟袁俐
- 关键词：结核分枝杆菌双组分结核病人耐药结核新发病例
- 结核分枝杆菌双组分系统PhoPR的研究进展被引量：2
- 2010年
- 双组分系统(Two-component systems,2CS)是高度保守的原核信号转导系统,最简单的2CS由感受器-组氨酸激酶(Histidine Kinase,HK)和效应器-反应调节器(Response Regulator,RR)组成。PhoPR是结核分枝杆菌中最重要的双组分系统,PhoP是结核分枝杆菌PhoPR2CS中的反应调节器。运用转录组学和蛋白组学分析可以揭示PhoP基因调控结核分枝杆菌的许多功能。本文对双组分系统PhoPR及PhoP基因在结核分枝杆菌中的研究进展进行了综述。
- 陈伟袁俐
- 关键词：PHOP双组分系统结核分枝杆菌
- 高尿酸血症与相关疾病的研究进展被引量：16
- 2016年
- 高尿酸血症（hyperuricemia，HUA）是由于体内尿酸产物增加或排泄减少而引起，早期一般无明显症状，随着血清尿酸维持在高水平而表现出乏力、厌食、腰痛、恶心、呕吐等一系列临床症状。尿酸嘌呤代谢的最终产物，大多数哺乳动物可以通过尿酸氧化酶的作用使尿酸水平进一步降低，大约只有人类尿酸水平10％左右［1］。而人类在进化过程中为适应低盐环境尿酸氧化酶基因发生突变，从而导致尿酸氧化酶功能失活，使人的血尿酸水平升高以维持血压，所以人类血清尿酸水平普遍高于其它哺乳动物［2］。近年来随着人们生活水平的提高和生活方式的改变，高尿酸血症的患病率逐年增加，与多种疾病的相关性也日渐明确，目前已成为世界性的公共卫生问题。
- 陈伟肖扬
- 关键词：高尿酸血症相关疾病血尿酸水平血清尿酸水平尿酸氧化酶公共卫生问题
- 新型冠状病毒核酸和抗体联合检测的应用价值被引量：2
- 2020年
- 目的探讨新型冠状病毒核酸检测和血清抗体检测对新型冠状病毒肺炎诊断的临床应用价值。方法收集26例新型冠状病毒肺炎患者确诊后不同时间段(第4、7、15、30、45天)血液和咽拭子标本,采用实时荧光RT-PCR技术检测病毒核酸,胶体金免疫层析法检测血清抗体(IgM和IgG)。结果26例确诊患者病毒核酸检测转阴时间为(16.3±11.6)d,转阴当日IgM和IgG检出率分别65.38%和53.85%,IgM抗体在确诊后15 d检出率达到65.38%,而IgG抗体为46.15%,IgM抗体最早可在确诊4 d内检出,并在15 d左右达到峰值,而IgG抗体需7 d左右才可检出,并随着时间延长检出率持续上升。确诊患者经过治疗,病毒ORF1ab基因和N基因表达量在一周内出现明显下降,至观察截止时间点(45 d)仍有1例ORF1ab基因阳性和5例N基因阳性。结论新型冠状病毒感染早期,核酸检测或联合IgM抗体检测检出率高,感染中后期IgM和IgG抗体检测联合核酸检测可区别既往感染和无症状感染者。
- 陈伟吴成就彭丽梁剑琦朱爱民黄小晔
- 关键词：新型冠状病毒核酸检测血清抗体检测
- 不同方法处理核酸片段的对比研究
- 2023年
- 目的探讨不同处理方法对核酸片段的清除效果,为核酸检测实验室尤其是基层实验室寻求简单方便又行之有效的实验室污染处理方法。方法分别用75%乙醇、含氯消毒剂、紫外线处理2种不同长度(120 bp和1600 bp)的高水平核酸片段,利用琼脂糖电泳技术及凝胶成像技术验证核酸片段的完整性,比较3种方法对核酸片段的清除效果。结果75%乙醇、紫外线对核酸片段的清除无明显效果,含氯消毒剂在有效氯终水平≥2500 mg/L时能有效清除核酸片段。结论84消毒液是最常见的含氯消毒剂,配置适合水平的84消毒液能有效处理实验室的核酸污染,值得在基层实验室大力推广应用。
- 黄小晔彭丽梁剑琦陈伟
- 关键词：核酸检测实验室污染含氯消毒剂75%乙醇紫外线
- qRT-PCR检测结核分枝杆菌蛋白抗原编码基因表达水平被引量：2
- 2011年
- 目的运用实时定量PCR(quantitative real-time,qRT-PCR)检测结核分枝杆菌蛋白Ag85B、38kDa及MPT64编码基因的表达水平,探讨结核分枝杆菌耐药菌株和敏感株,北京基因型和非北京基因型的蛋白抗原在转录水平的差异性及qRT-PCR诊断活菌的价值。方法根据Genbank提供的序列,设计目的基因fbpB、psts1、mpt64及内参基因Sigа的特异性引物,将扩增片段克隆入载体pMD18-T simple,重组质粒经纯化及倍比稀释,应用SYBR GreenⅠ荧光染料建立检测fbpB、psts1、mpt64基因表达水平的实时定量PCR方法。选用46株结核分枝杆菌临床分离株,以及2株非结核分枝杆菌。应用qRT-PCR检测上述菌株、H37Rv国际标准株fbpB、psts1、mpt64基因的表达水平。结果结核分枝杆菌活菌的扩增结果呈典型的S型曲线,而结核分枝杆菌死菌和非结核分枝杆菌呈水平直线,没有检测到荧光信号;耐药组中的mpt64基因表达水平低于敏感组及H37Rv标准株,有统计学意义(t=3.093,P<0.01;t=2.545,P<0.05),北京基因型组中的psts1基因表达水平低于非北京基因型组及H37Rv标准株。结论有统计学意义(t=2.567,P<0.05;t=2.373,P<0.05)。结论成功建立了fbpB、psts1、mpt64基因的qRT-PCR检测方法,该方法可以快速判断活菌与死菌。检测发现耐药组中的mpt64基因表达水平低于敏感组及H37Rv标准株;北京基因型组中的psts1基因表达水平低于非北京基因型组及H37Rv标准株。
- 陈伟王远志李永祥米利古张辉张娟魏克娜袁俐
- 关键词：结核分枝杆菌AG85BMPT64实时定量PCR
- 实时定量PCR检测耐异烟肼结核分枝杆菌Ag85B、38kDa及MPT64 mRNA表达水平
- 2011年
- 目的运用实时定量PCR(Real-time PCR)检测结核分枝杆菌耐异烟肼菌株和敏感株Ag85B、38kDa及MPT64编码基因(fbpB、psts1、mpt64)的mRNA表达水平,探讨结核分枝杆菌耐异烟肼株和敏感株的蛋白抗原在转录水平的差异性。方法根据GenBank提供的序列,设计目的基因fbpB、psts1、mpt64及内参基因Sigа的特异引物,将fbpB、psts1、mpt64及Sigа扩增片段克隆入载体pMD18-T simple,重组质粒经纯化及倍比稀释,应用SYBR GreenⅠ荧光染料建立检测fbpB、psts1、mpt64的实时定量PCR方法,并应用此方法检测22株耐异烟肼菌株及25株敏感菌株(含H37Rv标准株)中fbpB、psts1、mpt64的mRNA表达水平。结果耐异烟肼菌株的fbpB表达水平为0.65±0.22,敏感菌株的表达水平为0.36±0.13,两者有显著性差异(t=5.683,P<0.01)。耐异烟肼菌株的psts表达水平为13.63±4.16,敏感菌株的表达水平为9.86±2.79,两者差异有统计学意义(t=3.869,P<0.01)。耐异烟肼菌株的mpt64表达水平为5.89±3.22,敏感菌株的表达水平为7.67±4.52,差异无统计学意义(t=1.552,P>0.05)。结论成功建立了fbpB、psts1、mpt64基因的实时定量检测方法,检测显示耐异烟肼菌株的fbpB、psts1基因的mRNA表达水平显著高于敏感菌株,可能为耐异烟肼MTB的实验室诊断提供分子标识。
- 陈伟李永祥王远志米利古张辉张娟魏克娜袁俐
- 关键词：结核分枝杆菌AG85BMPT64实时定量PCR
- 结核分枝杆菌重组38kD蛋白用于新疆南疆维吾尔族和湖南湘中汉族血清学诊断的研究
- 2014年
- 目的:对结核分枝杆菌38kD蛋白编码基因进行克隆表达及纯化,建立基于重组38 kD蛋白的酶联免疫吸附法(ELISA)检测结核病人血清标本,评价重组38 kD蛋白用于结核病血清学诊断抗原的价值。并比较分析其在汉族和维吾尔族人群中的血清学诊断的差异。方法:用PCR方法扩增38 kD蛋白的编码基因,构建重组质粒,转化到大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导表达,得到纯化的38 kD蛋白,建立以38 kD蛋白为包被抗原的ELISA,并检测临床确诊的结核病人血清标本。结果:ELISA检测结核病患者血清标本的维吾尔族阳性率为34%(52/153),汉族为52.4%(65/124),两者对比有统计学差异(X2=9.538,P<0.005)。在阴性对照中的维吾尔族特异度为96.4%(159/165),汉族为98.8%(130/133),结果无统计学意义(X2=0.111,P>0.5)。结论:重组38kD蛋白用于血清学诊断的敏感度在维吾尔族和汉族中有差异,而其诊断特异度无差别。
- 杨忠华谭卫华陈伟刘艳袁俐
- 关键词：结核分枝杆菌血清学诊断
