刘伟 作品数:19 被引量:202 H指数:5 供职机构: 中国科学院水生生物研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 河南省科技创新杰出青年基金 河南省科技攻关计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 环境科学与工程 医药卫生 更多>>
流式细胞分选技术的质量控制 被引量:2 2015年 越来越多科研者利用流式分选技术进行分选染色体、纯化细胞株、单细胞克隆、分选干细胞等稀有细胞或细胞富集,将获取细胞主要用于细胞基因、蛋白、功能水平的研究,为了保证分选的细胞直接用于培养、移植、核酸提取、单细胞PCR扩增或原位杂交等后续实验,我们有必要考虑分选细胞的生物学活性、回收率、纯度等相关分选指标。实际上,流式细胞仪在分选细胞过程中,通常受到细胞本身状态、仪器性能、操作者等多种因素的干扰,无法获取流式细胞仪理想的分选参数值,即高速、高纯度、高活性、高得率,这些参数往往是相互制约,不能同时满足,需要考虑和平衡实验目的侧重选择。我们将从流式分选术影响因素来阐述分选的质控。 汪艳 胡锐 刘伟 乔志仙 李婷婷关键词:流式细胞仪 细胞分选 氧化应激对粗柄羊肚菌菌丝生长和菌核发生的影响 被引量:7 2014年 采用平板覆盖玻璃纸培养法,初步探讨了甘露醇、二甲基亚砜(DMSO)、苯甲酸钠和N,N-二甲基对亚硝基苯胺等4种羟基自由基清除剂,L-半胱氨酸、还原型谷胱甘肽和β-巯基乙醇等3种巯基化合物和抗坏血酸对粗柄羊肚菌(Morchella crassipes)菌丝生长和菌核发生的影响。结果表明,作为可以降低真菌胞内氧化应激的活性氧自由基清除剂,测试药剂对菌丝生长和菌核发生具有抑制作用,且该抑制作用随着药剂浓度的增加而增强,较高浓度的添加药剂可完全抑制菌核发生。随着测试药剂的羟基自由基清除能力增强,完全抑制粗柄羊肚菌菌核发生的浓度相应降低,菌丝生长也大致表现出类似的趋势。测试的较强自由基清除剂苯甲酸钠、N,N-二甲基对亚硝基苯胺、3种巯基化合物和抗坏血酸改变了粗柄羊肚菌菌落的色泽,表明打破了粗柄羊肚菌正常的生理活动。 何培新 刘伟 蔡英丽 马本军 陈磊涛 武晓瑞关键词:氧化应激 菌丝生长 铜和磺胺甲唑复合污染下人工湿地对禽畜养殖尾水的处理效果 被引量:4 2022年 为研究人工湿地同步去除养殖尾水中重金属和抗生素的效果,文章以铜(Cu)和磺胺甲唑(Sulfamethoxazole,SMZ)为例,设计了5组小试垂直流人工湿地模拟处理不同重金属-抗生素复合水平的养殖尾水(A:空白;B:Cu 2 mg/L;C:Cu 2 mg/L,SMZ 5 mg/L;D:Cu 20 mg/L,SMZ 0.2 mg/L;E:Cu 20 mg/L,SMZ5 mg/L),探究复合污染下人工湿地处理效果的差异。结果显示,复合污染下人工湿地对模拟禽畜养殖尾水中的N、P、化学需氧量(Chemical Oxygen Demands,COD)、Cu和SMZ仍具有较高的去除率和较为稳定的去除效果,各组平均去除率均达到99%,复合污染的影响主要体现在氨态氮(Ammonia Nitrogen,NH3-N)和总氮(Total Nitrogen,TN)的去除上。添加不同浓度Cu和SMZ后,各组NH3-N平均去除率依次为81.75%、87.59%、79.50%、74.45%和65.41%,TN平均去除率依次为81.59%、87.63%、80.82%、74.15%和67.56%,C、D和E组植物地下部分干重分别较A组下降了22.22%、30.58%和30.64%,复合污染对植物产生毒害作用,使微生物的群落结构产生变化,一些在氮去除过程中具有重要作用的微生物比如Propionicicella和Bacillus丰度降低,从而影响NH3-N和TN的去除。 杨玲丽 马琳 刘伟 褚一凡 谭启洋 周巧红 周巧红 吴振斌关键词:重金属 抗生素 人工湿地 水平潜流人工湿地堵塞初期微生物群落结构变化 被引量:4 2022年 为了寻找合适的湿地堵塞监测指标,文章通过运行4组湿地装置来模拟水平潜流人工湿地堵塞的过程,并研究人工湿地中微生物群落在湿地堵塞初期的响应。在人工湿地反应器运行过程中,定期监测基质过滤速率与人工湿地处理性能,包括化学需氧量(COD)、总氮(TN)和总磷(TP)去除效率,同时应用高通量测序技术测定并分析湿地反应器中微生物群落结构组成与多样性。结果表明:随着堵塞的形成,在4组人工湿地中,基质过滤速率和TP的去除效率持续下降,而COD和TN的去除效率分别为50%—85%和10%—20%;16S rDNA测序结果表明堵塞会降低细菌群落的丰富度和多样性;人工湿地系统中的优势菌门主要是变形菌门(Proteobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)和绿弯菌门(Chloroflexi)等,且当湿地进入堵塞初期后,变形菌门丰度明显增加,具体表现为其门下的反硝化细菌属(Thauera、Zoogloea和Rhizobium)丰度显著增加,此外厚壁菌门和绿弯菌门的有机物降解菌属(Clostridium sensu stricto、Gracilibacter和Levilinea)的丰度也明显增加,这表明上述菌属有望成为人工湿地系统堵塞初期的预警指示菌。 张明珍 曹涛涛 刘伟 李前正 胡泽 陈迪松 吴振斌 吴振斌关键词:水平潜流 人工湿地 高通量测序 细菌群落 Dectin-1内在化表达介导氧依赖性方式杀伤白色念珠菌 被引量:4 2012年 目的探讨Dectin-1介导人嗜中性粒细胞以氧依赖性方式杀伤调理吞噬后白色念珠菌孢子的机制。方法在白色念珠菌孢子作用前后,流式细胞术和激光共聚焦显微镜检测人嗜中性粒细胞中Dectin.1的表达率及表达部位;并通过Dectin-1阻断试验分析嗜中性粒细胞中Dectin-1的表达与胞内活性氧簇(reactiveoxygenspecies,ROS)的产生及对白色念珠菌孢子杀伤的相关性。结果在白色念珠菌孢子刺激30或60min后,细胞内Dectin-1的表达率明显上调(0min,8.32%;30min,16.82%;60rain,23.88%。与0min相比,P均〈0.01),且Dectin-1与ROS在胞内的表达均被募集到吞噬的白色念珠菌孢子表面。Dectin-1的阻断分别与ROS峰值的抑制(R2=0.306,P〈0.01)及白色念珠菌杀伤率的降低(R2=0.251,P〈0.01)呈剂量依存关系。结论Dectin-1可通过内在化的表达模式介导人嗜中性粒细胞以ROS依赖性方式杀伤调理吞噬的白色念珠菌孢子。 董碧麟 李东升 段逸群 柳卫凰 陈金波 刘伟关键词:白色念珠菌 活性氧簇 DECTIN-1 环腺苷酸(cAMP)对粗柄羊肚菌菌丝生长和菌核发生的影响 被引量:5 2015年 通过外源添加环腺苷酸(cAMP)、腺苷酸环化酶激活剂氟化钠(NaF)和cAMP降解产物腺苷酸(AMP),研究了cAMP对粗柄羊肚菌菌丝生长和菌核发生的影响,并测定了不同菌核发育阶段培养物的胞内cAMP浓度。结果表明:在测试浓度范围内,cAMP对粗柄羊肚菌菌丝生长影响不显著,但显著抑制该真菌菌核的发生。菌核数量与外源添加的cAMP和NaF具有明显的剂量负相关性。然而,AMP显著促进粗柄羊肚菌菌丝生长,却没有明显影响其菌核发生。培养物胞内cAMP浓度随着培养时间的延长而增加,与外源添加cAMP抑制菌核发生的结果一致。本研究为羊肚菌菌核发生的分子机制研究提供理论支持。 何培新 黄丽娜 刘伟 刘伟 刘苏萌 陈磊涛关键词:CAMP 腺苷酸 外源脱落酸对湿地植物美人蕉抗寒性的影响 被引量:1 2021年 低温时植物枯萎导致人工湿地运行效率降低,研究将脱落酸应用于湿地植物,以期提高其抗寒性。采用0、5、10、15、20和25 mg/L的脱落酸(ABA)对美人蕉(Canna indica L.)幼苗叶面进行喷施并进行阶段性降温培养,评价各组在0℃时的抗寒性,筛选出最适ABA处理浓度。结果表明:在低温条件下,经过适宜浓度外源脱落酸预处理组的丙二醛(MDA)、相对电导率显著性低于对照组;脯氨酸、可溶性糖和蛋白质含量显著高于对照组,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性也有所提高。综合以上指标,认为15 mg/L脱落酸处理为最佳。随后将其应用于人工湿地,对其冬季净化效果进行评估。结果发现,15 mg/L脱落酸预处理可使人工湿地的冬季TP、TN和COD去除率显著高于对照组(P<0.05)。由此可见,一定浓度的脱落酸预处理能够有效提高美人蕉的抗寒性,并提高人工湿地冬季净化效果。 陈金梅 褚一凡 谭启洋 刘伟 杨玲丽 黄涛 吴振斌 吴振斌关键词:美人蕉 抗寒性 人工湿地 脱落酸 鄱阳湖西侧周边农村水塘夏季表层沉积物氮、磷、有机质分布特征及评价 被引量:1 2023年 水塘作为农村重要的水生态系统,其环境状况与人们生产生活和健康密切相关。为了解鄱阳湖西侧周边农村水塘沉积物的有机质和营养盐赋存状况,于2018—2019年对鄱阳湖流域西侧附近4个县的23个水塘进行沉积物营养盐的分析,同时通过相关分析和差异性分析对其来源进行解析,并采用综合污染指数评价法和主成分分析法对水塘沉积物的污染程度进行评价。结果表明:水塘沉积物污染物含量较高,其有机质、有机碳(TOC)、总氮(TN)和总磷(TP)含量分别为5.81%±2.16%、2.46%±1.02%、(6.48±2.35)mg/g和(1.89±0.80)mg/g。3种形态的无机氮中铵态氮含量最高,其次为硝态氮和亚硝态氮。沉积物TP受到洗涤废水的影响较大,清淤和活化显著减轻了沉积物TN和TOC污染。综合污染指数评价结果表明重度污染和中度污染的水塘占比分别为95.65%和4.35%,其平均评价结果为重度污染,表明水塘沉积物污染严重。而主成分分析结果表明P18水塘污染最重,而P6水塘污染最轻。综合污染指数与主成分分析总得分的相关系数为0.92,表明两者的评价结果较为一致。本研究通过分析鄱阳湖西侧农村水塘的沉积物营养盐含量、污染来源以及污染现状,拟为农村水塘的生态修复提供数据和技术支撑。 刘伟 褚一凡 谭启洋 陈金梅 杨玲丽 周巧红 周巧红 吴振斌关键词:表层沉积物 有机质 综合污染指数 鄱阳湖流域 大银鱼食性转变与摄食同类的生态学意义 在2010年3月-2013年12月,对兴凯湖外来大(Protosalanx hyalocranius)银鱼食性和生活史特征的研究表明:大银鱼种群内个体间出现了由浮游动物食性转变为食鱼性的食性转变差异,种群内占少数的大个体... 唐富江 刘伟 王继隆 李喆 谢松光关键词:大银鱼 食性 G 试验阳性血清通过干扰 Dectin-1的内在化表达抑制 ROS 依赖性杀伤白念珠菌 2013年 目的:探讨G试验阳性血清中游离β-1,3-D-葡聚糖干扰人嗜中性粒细胞Dectin-1所介导的氧依赖性杀伤白念珠菌的机制。方法激光共聚焦显微镜检测经β-1,3-D-葡聚糖酶预处理前后的白念珠菌孢子作用下,人嗜中性粒细胞内Dectin-1表达分布的变化及与活性氧簇( reactive oxy-gen species, ROS)的共定位关系;进一步分析Dectin-1的阻断对白念珠菌诱导下胞内ROS生成的影响;流式细胞术检测G试验阳性血清中游离的β-1,3-D-葡聚糖对白念珠菌诱导下人嗜中性粒细胞内Dectin-1和ROS表达水平的影响。结果在白念珠菌作用下,人嗜中性粒细胞内诱导性表达的Dec-tin-1主要被募集到内吞的孢子表面,且与ROS的产生具有一定的共定位关系。然而,经β-1,3-D-葡聚糖酶预处理后,胞内则未见Dectin-1的明显表达;当Dectin-1被其功能性抗体(5μg/ml)阻断后,白念珠菌诱导胞内ROS的表达与阻断前相比显著降低(LSD-t检验,P<0.01);经G试验阳性血清预处理的人嗜中性粒细胞中,白念珠菌诱导下胞内Dectin-1和ROS的表达水平均显著低于单一的白念珠菌作用组(LSD-t检验, P<0.01);线性回归分析提示G试验阳性血清中游离β-1,3-D-葡聚糖浓度分别与Dectin-1及ROS表达水平的抑制部分呈显著的剂量依存关系( Dectin-1,R2=0.702,P<0.01;ROS,R2=0.588,P<0.01)。结论 G试验阳性血清中的游离β-1,3-D-葡聚糖可通过干扰人嗜中性粒细胞Dectin-1内在化表达的方式抑制ROS依赖性杀伤内吞的白念珠菌孢子。 董碧麟 汪明 柳卫凰 李东升 童中胜 段逸群 刘伟关键词:G试验 DECTIN-1 白念珠菌