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P15^(INK4b)对人黑色素瘤细胞周期及G_1期相关调控基因的影响被引量：1: 2000年; 人黑色素瘤细胞A375是P15^(INK4b)缺失细胞系,通过细胞转染技术将外源P15^(INK4b)cDNA转染A375细胞,经PCR和Western blot检测,证明构建了P15^(INK4b)稳定表达细胞模型MLIK6。流式细胞光度术结果显示,与对照组MLC2相比,MLIK6细胞G_1期升高11％,S期下降14％。利用TdR-N_2O同步法所得同步的MLIK6和MLC2的M期细胞比例分别达到89.1％和76.8％,而G_1期的比例分别为74.3％和76.4％。~3H-TdR掺入的结果显示,MLIK6从G_1期进入S期的时间比MLC2延长2 h,并且掺入强度明显减弱。进一步探讨P15^(INK4b)对G_1/S相关调控基因的影响,发现G_1期的MLIK6细胞在诱导P27表达升高的同时,cyclinD1,CdK4,cyclinE和c-myc的蛋白水平均降低,其中cyclinD1的抑制在晚G_1期附近最显著,而对cyclinE的抑制则在G_1/S转换处表现突出,癌基因c-myc表达受到明显抑制并贯穿于G_1→S全部时间进程中。说明P15^(INK4b)是通过对G_1期不同阶段细胞周期引擎分子cyclinD1,CdK4,cyclinE和癌基因c-myc的抑制及增加CKI P27延缓了G_1/S进程。; 刘军童迎凯柳惠图张伟高萍; 关键词：细胞周期细胞同步化人黑色素瘤细胞调控基因

细胞自噬的诱导及检测技术在细胞生物学实验教学中的应用实例被引量：1: 2012年; 细胞自噬是一种在进化上高度保守的溶酶体吞噬降解自身成分的胞内代谢途径。它与多种生理功能有关,如在饥饿、刺激等不利环境条件下,细胞通过自噬降解多余或异常的大分子,为细胞的生存提供能量及原材料,促进生物体的生长发育、细胞分化及对环境变化产生应答。但是,过度的自噬可以导致细胞死亡,因此自噬又被称为II型程序性细胞死亡,这是除凋亡和坏死之外的一种新的细胞死亡方式。另外,自噬异常与多种病理过程如肿瘤、神经退行性病变、病原体感染等密切相关。由于细胞自噬在生理和病理过程中都发挥着重要作用,因此,自噬成为细胞生物学领域的一个新的研究热点。以细胞自噬为研究内容,设计了适合在本科生课程中开设的细胞自噬的诱导及观察实验项目,对该实验项目的实验原理、实验设计与安排等进行了详细的介绍,为该项目在实验课程中的推广提供了有益的参考。; 翟欢欢薛秀花张伟; 关键词：细胞自噬细胞生物学实验教学

p14^(ARF)高表达对γ射线诱导的人黑色素瘤细胞凋亡的影响被引量：2: 2003年; 抑癌因子ARF可以激活p53诱导细胞周期的阻断或凋亡.为阐明ARF在促进细胞凋亡作用中的分子机理,建立了高表达p14^(ARF)的人黑色素瘤A375细胞模型.实验表明,p14^(ARF)高表达能促进p53富集在细胞核.经γ射线照射后,发现pI4^(ARF)高表达能促进A375细胞凋亡,促使Smac从线粒体释放到胞质中,p53,Bax,Caspase-3,Caspase-9,p21^(cipl)和p27^(kipl)蛋白水平明显提高,而Bcl-2和磷酸化的ERK蛋白水平下降.提示γ射线辐照下,p14^(ARF)促进A375细胞凋亡是ERK介入的依赖p53的以线粒体为核心的凋亡途径.; 彭丽霞张伟柳惠图何大澄高萍; 关键词：抑癌因子 ARF Γ射线黑色素瘤细胞凋亡 A375细胞

p14^(ARF)对人黑色素瘤细胞增殖的影响及其作用机理的初探被引量：10: 2004年; ARF (alternativereadingframe)作为INK4a/ARF的 β转录产物 ,能够稳定p5 3,诱导细胞周期阻断或凋亡 .利用高表达p1 4 ARF的人黑色素瘤细胞模型 ,探讨了ARF抑制细胞增殖的分子作用机理 .研究发现p1 4 ARF高表达能将细胞周期阻断在G1和G2期 ,p5 3,p2 1 cip1 和p2 7kip1 蛋白水平明显增强 ,而p ERK1 / 2 ,CyclinD1和CyclinE蛋白水平下降 ,明显抑制细胞生长 .提示p1 4 ARF能通过ERK (extracellularsignal regulatedkinase); 彭丽霞张伟柳惠图何大澄高萍; 关键词：人黑色素瘤细胞 P14^ARF 细胞周期

ARF——一种新的抑癌因子的研究进展被引量：1: 2002年; INK4a/ARF基因位于人染色体 9p2 1,是人类肿瘤中最常见的基因失活位点之一 .INK4a/ARF基因有两套各自独立的启动子 ,通过可变阅读框 ,能够编码两种蛋白质 :p16 INK4a和p14 ARF (ARF在鼠细胞中为p19ARF) .p16作为CDK4 /6的抑制因子 ,能够阻断pRb磷酸化 ,将细胞周期阻断在G1期 ;而ARF可结合原癌蛋白MDM2 ,稳定 p5 3,将细胞周期阻断在G1期和G2 /M转换期 ,或诱导细胞凋亡 .因此ARF蛋白和; 彭丽霞张伟何大澄柳惠图; 关键词：ARF 抑癌因子细胞凋亡

基于绿色荧光蛋白的RNAi技术在细胞生物学实验课程中的应用实例被引量：4: 2010年; RNAi和GFP报告基因的转染技术是细胞生物学领域常用的研究手段,我们以GFP作为靶基因,设计了适合在本科生课程中开设的RNA干扰技术实验项目,本教改研究将GFP荧光观察、基因转染技术及RNA干扰技术融合在一个实验中,并且对该实验项目的实例应用做了细致的设计和具体实践,结果表明RNAi技术对细胞中GFP报告基因表达的抑制效果明显。此外本文还阐述了该实验项目在本科生的细胞生物学实验课程中开展的可行性和必要性。这种将传统技术与新技术交叉组合型实验项目的开展对于学生综合科研能力的培养具有良好的效果,也为细胞生物学实验课程的改革提供了新思路。; 宋宏涛向本琼张伟; 关键词：RNAI GFP 细胞生物学实验

p16INK4a高表达对人肺癌A549细胞凋亡的影响及其作用机理的初步探讨: p~(16)通过抑制CyclinD-CDK4/6的活性而阻抑周期的进程。p~(16)可以同CyclinD竞争与CDK4的结合,抑制CDK4活化,从而阻断CyclinD-CDK4对pRb的磷酸化,使pRb对E2F的结合力增...; 张伟彭丽霞柳惠图; 关键词：人肺癌细胞凋亡 INK4A P16; 文献传递

高表达钙调素NRK细胞模型的建立及其对细胞生长失调的影响被引量：8: 1996年; 钙调素作为Ｃａ￣（２＋）信号的主要胞内受体，在细胞增殖调节中起着重要作用。实验中运用ＤＮＡ体外重组技术构建了高表达钙调素的真核载体，并将其转染到大鼠正常肾细胞（ＮＲＫ）中得到钙调素高表达的稳定细胞株。分析表明，高表达钙调素加速细胞生长，促进细胞从Ｇ＿１期向Ｓ期及Ｇ＿２期向Ｍ期的进程，并且使细胞血清依赖性降低，在单层培养中出现接触抑制丧失的岛状生长的现象。基因表达分析表明，原癌基因ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｍｙｃ随钙调素增高而表达加强，这可能是钙调素作用的分子机理之一。; 刘桂中柳惠图张伟胡江; 关键词：细胞细胞生长调钙蛋白肾细胞

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张伟